一种哈维氏弧菌快速检测试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术属于检测领域，具体涉及鱼虾等水产品以及养殖鱼虾塘中病原性哈维氏弧菌，适用于现场快速检测鱼虾塘中病原性哈维氏弧菌及其检测方法。所述哈维氏弧菌快速检测试剂盒包括哈维氏弧菌快速检测试纸条、已与多抗偶联的免疫磁珠液和层析液；所述层析液由Tween‑20、BSA和BS组成，其中Tween‑20体积百分比为5％‑10％，BSA浓度为0.15‑0.2mg/mL，层析液的pH为8‑9。本发明专利技术的目的在于克服上述现有技术存在的不足，开发出一种适用于现场快速检测水产品虾中哈维氏弧菌快速检测方法；可以在肉眼可见范围内达到样品中哈维氏弧菌数量在可控范围内。

【技术实现步骤摘要】
一种哈维氏弧菌快速检测试剂盒及其使用方法
本专利技术属于检测领域，具体涉及鱼虾等水产品以及养殖鱼虾塘中病原性哈维氏弧菌，适用于现场快速检测鱼虾塘中病原性哈维氏弧菌及其检测方法。
技术介绍
哈维氏弧菌是一种发光弧菌,广泛分布于近岸温暖的海水或海洋沉积物中，富集在海洋动物的体表或肠道内，尤其在虾苗中最常见。养殖虾户们发现感染哈维氏弧菌的养殖虾经常会出现体表肌肉不同程度的充血溃烂，并且某些部位在黑暗处可以发光，喂养一段时间会死亡，给养殖业带来巨大的损失。虾体感染哈维氏弧菌初期，虾苗的活动能力会有所下降,此时哈维氏弧菌在虾体内累积量少而尚未观察到荧光，可通过对虾体或水质进行检测，判断哈维氏弧菌是否超过控制线，以便及时对养殖环境进行调控，即可控制哈维氏弧菌繁殖与传播。虾体感染哈维氏弧菌中期即虾苗处于濒死状态时,可在黑暗中观察到微弱的荧光,这时一旦生长环境有利于哈维氏弧菌的繁殖，则会导致养殖虾类大量死亡，这一阶段无任何补救措施。故此，控制哈维氏弧菌浓度在感染中期很关键。目前检测哈维氏弧菌手段主要包括传统培养分离法、分子生物学法、免疫学检测方法等，由于操作要求高并不适用于现场检测；所以开发一种适用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种哈维氏弧菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述哈维氏弧菌快速检测试剂盒包括哈维氏弧菌快速检测试纸条、已与多抗偶联的免疫磁珠液和层析液；所述哈维氏弧菌快速检测试纸条包括底板和底板的上表面自一端至另一端依次粘贴有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫依次交错粘贴在底板；所述硝酸纤维素膜为预包被有哈维氏弧菌多克隆抗体的检测线和山羊抗兔IgG的控制线的硝酸纤维素膜；所述已与多抗偶联的免疫磁珠液是与哈维氏弧菌多抗偶联过的磁珠的溶液；所述层析液由Tween‑20、BSA和BS组成，其中Tween‑20体积百分比为5％‑10％，BSA浓度为0.15‑0.2mg/mL，...

【技术特征摘要】
1.一种哈维氏弧菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述哈维氏弧菌快速检测试剂盒包括哈维氏弧菌快速检测试纸条、已与多抗偶联的免疫磁珠液和层析液；所述哈维氏弧菌快速检测试纸条包括底板和底板的上表面自一端至另一端依次粘贴有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫依次交错粘贴在底板；所述硝酸纤维素膜为预包被有哈维氏弧菌多克隆抗体的检测线和山羊抗兔IgG的控制线的硝酸纤维素膜；所述已与多抗偶联的免疫磁珠液是与哈维氏弧菌多抗偶联过的磁珠的溶液；所述层析液由Tween-20、BSA和BS组成，其中Tween-20体积百分比为5％-10％，BSA浓度为0.15-0.2mg/mL，层析液的pH为8-9。2.根据权利要求1中所述哈维氏弧菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述已与多抗偶联的免疫磁珠液的制备方法包括以下步骤：(1)将磁珠分散均匀，磁分离，至澄清，弃上清液，用MEST清洗，弃上清液；(2)依次加入MEST、0.25g/mLEDC和0.5g/mLNHS，混合均匀，弃上清液；所述MEST、EDC和NHS的体积比为485：5：10；(3)依次加入BST、哈维氏弧菌多抗，混合均匀，封闭30min，去上清，最终加入500μL保存液；...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢瑛，陈璐萍，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：上海,31