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一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法技术

技术编号:17994030 阅读:43 留言:0更新日期:2018-05-19 11:15
本发明专利技术属于真菌菌丝总DNA提取的技术领域,特别涉及一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法。所述真菌菌丝总DNA提取液包括提取液I和提取液II,其中所述提取液I包括缓冲盐、非离子表面活性剂、以及中性盐的水溶液,其pH值为7.5‑8.5;所述提取液II包括缓冲盐和阳离子表面活性剂,其pH值为7.5‑8.5。使用本发明专利技术的真菌菌丝总DNA提取液可以取得如下的有益效果:1)简化了总DNA提取步骤;2)适用于总DNA微量提取,为难于稀缺的实验材料提供了有效的实验手段;3)避免了有毒有机溶剂的使用;4)可以简化操作步骤和时间;5)还避免了液氮研磨过程中容易造成冻伤皮肤的可能性。

A method for extracting total DNA from fungal hyphae and extracting total DNA from fungal hyphae

The invention belongs to the technical field of extraction of total DNA from fungal hyphae, in particular to a method for extracting total DNA from fungal hyphae and extracting total DNA from fungal hyphae. The total DNA extraction solution of the fungal mycelium includes the extract I and the extract II, in which the extract I includes a buffer salt, a nonionic surfactant, and a aqueous solution of neutral salt, with a pH value of 7.5 and 8.5; the extraction liquid includes a buffer salt and a cationic surfactant, and its pH value is 7.5 of 8.5. The total DNA extract of fungal mycelium using the invention can achieve the following beneficial effects: 1) simplifies the total DNA extraction step; 2) applies to the total DNA trace extraction, provides effective experimental means for the rare experimental materials; 3) avoids the use of toxic organic solvents; 4) can simplify operation steps and time; 5) also avoid It is easy to cause frostbite in liquid nitrogen grinding process.

【技术实现步骤摘要】
一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法本申请为2016年3月20日提交的专利技术名称为一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法,申请号为201610163675.7的分案申请。
本专利技术属于真菌菌丝总DNA提取的
,特别涉及一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法。
技术介绍
在真菌的分子生物学研究中,真菌总DNA的提取至关重要。目前常用的提取方法主要有CTAB法、SDS提取法、尿素提取法及酶解法等。提取的步骤大体相似,关键在于如何有效地破碎细胞壁,有的是通过机械来进行破碎细胞壁,有的是通过酶等物质来消化去壁。由于真菌细胞壁上富含多糖等物质,因此即使是液氮冷冻干燥研磨后也很难被普通抽提液打破,而直接用酶去消化又常常得不到好的去壁效果。事实上,目前大部分实验室所采用的破壁方法均是液氮冷冻干燥研磨,但是这些方法大多会用到有毒有机溶剂、酚等,而且操作时间较长,步骤较多。另外,使用液氮研磨容易冻伤皮肤,需要强力研磨,费时费力,受研钵数量的限制容易产生交叉污染,在研磨过程中真菌菌丝也容易损失,效率也不高,特别是一些单位和机构由于液氮及干冰不易本文档来自技高网...
一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法

【技术保护点】
一种真菌菌丝总DNA提取液,其包括提取液I和提取液II,其中所述提取液I包括缓冲盐、非离子表面活性剂、以及中性盐的水溶液,其pH值为7.5‑8.5;所述提取液II包括缓冲盐和阳离子表面活性剂,其pH值为7.5‑8.5;所述非离子表面活性剂为醇醚硫酸盐。

【技术特征摘要】
1.一种真菌菌丝总DNA提取液,其包括提取液I和提取液II,其中所述提取液I包括缓冲盐、非离子表面活性剂、以及中性盐的水溶液,其pH值为7.5-8.5;所述提取液II包括缓冲盐和阳离子表面活性剂,其pH值为7.5-8.5;所述非离子表面活性剂为醇醚硫酸盐。2.根据权利要求1所述的提取液,其特征在于,所述非离子表面活性剂为脂肪醇醚硫酸铵和/或脂肪醇醚硫酸钠。3.根据权利要求2所述的提取液,其特征在于,所述非离子表面活性剂为C12~C18的脂肪醇醚硫酸铵和/或脂肪醇醚硫酸钠;优选地为C12~C15的脂肪醇醚硫酸铵和/或脂肪醇醚硫酸钠。4.根据权利要求1或2所述的提取液,其特征在于,所述缓冲盐选自Tris-HCl、磷酸钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠中的至少一种。5.根据权利要求1所述的提取液,其特征在于,所述中性盐为氯化盐;优选地,所述氯化盐为氯化钠和/或氯化钾。6.一种提取真菌菌丝总DNA的方法,包括如下步骤:(1)收集真...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭巍毕扬张艳杰
申请(专利权)人:北京农学院
类型:发明
国别省市:北京,11

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