The invention belongs to the technical field of extraction of total DNA from fungal hyphae, in particular to a method for extracting total DNA from fungal hyphae and extracting total DNA from fungal hyphae. The total DNA extraction solution of the fungal mycelium includes the extract I and the extract II, in which the extract I includes a buffer salt, a nonionic surfactant, and a aqueous solution of neutral salt, with a pH value of 7.5 and 8.5; the extraction liquid includes a buffer salt and a cationic surfactant, and its pH value is 7.5 of 8.5. The total DNA extract of fungal mycelium using the invention can achieve the following beneficial effects: 1) simplifies the total DNA extraction step; 2) applies to the total DNA trace extraction, provides effective experimental means for the rare experimental materials; 3) avoids the use of toxic organic solvents; 4) can simplify operation steps and time; 5) also avoid It is easy to cause frostbite in liquid nitrogen grinding process.
【技术实现步骤摘要】
一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法本申请为2016年3月20日提交的专利技术名称为一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法,申请号为201610163675.7的分案申请。
本专利技术属于真菌菌丝总DNA提取的
,特别涉及一种真菌菌丝总DNA提取液及提取真菌菌丝总DNA的方法。
技术介绍
在真菌的分子生物学研究中,真菌总DNA的提取至关重要。目前常用的提取方法主要有CTAB法、SDS提取法、尿素提取法及酶解法等。提取的步骤大体相似,关键在于如何有效地破碎细胞壁,有的是通过机械来进行破碎细胞壁,有的是通过酶等物质来消化去壁。由于真菌细胞壁上富含多糖等物质,因此即使是液氮冷冻干燥研磨后也很难被普通抽提液打破,而直接用酶去消化又常常得不到好的去壁效果。事实上,目前大部分实验室所采用的破壁方法均是液氮冷冻干燥研磨,但是这些方法大多会用到有毒有机溶剂、酚等,而且操作时间较长,步骤较多。另外,使用液氮研磨容易冻伤皮肤,需要强力研磨,费时费力,受研钵数量的限制容易产生交叉污染,在研磨过程中真菌菌丝也容易损失,效率也不高,特别是一些单位和机 ...
【技术保护点】
一种真菌菌丝总DNA提取液,其包括提取液I和提取液II,其中所述提取液I包括缓冲盐、非离子表面活性剂、以及中性盐的水溶液,其pH值为7.5‑8.5;所述提取液II包括缓冲盐和阳离子表面活性剂,其pH值为7.5‑8.5;所述非离子表面活性剂为醇醚硫酸盐。
【技术特征摘要】
1.一种真菌菌丝总DNA提取液,其包括提取液I和提取液II,其中所述提取液I包括缓冲盐、非离子表面活性剂、以及中性盐的水溶液,其pH值为7.5-8.5;所述提取液II包括缓冲盐和阳离子表面活性剂,其pH值为7.5-8.5;所述非离子表面活性剂为醇醚硫酸盐。2.根据权利要求1所述的提取液,其特征在于,所述非离子表面活性剂为脂肪醇醚硫酸铵和/或脂肪醇醚硫酸钠。3.根据权利要求2所述的提取液,其特征在于,所述非离子表面活性剂为C12~C18的脂肪醇醚硫酸铵和/或脂肪醇醚硫酸钠;优选地为C12~C15的脂肪醇醚硫酸铵和/或脂肪醇醚硫酸钠。4.根据权利要求1或2所述的提取液,其特征在于,所述缓冲盐选自Tris-HCl、磷酸钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠中的至少一种。5.根据权利要求1所述的提取液,其特征在于,所述中性盐为氯化盐;优选地,所述氯化盐为氯化钠和/或氯化钾。6.一种提取真菌菌丝总DNA的方法,包括如下步骤:(1)收集真...
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