谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段及其制备方法和应用。所述片段的制备方法：Trizol法提取谷子幼苗组织mRNA，以mRNA为模板，经酶催化，反转录成cDNA。根据谷子抗肿瘤活性蛋白FMBP质谱鉴定结果，在Genebank中获得该蛋白基因序列，根据其不同的功能区域分别截短筛选，确定Ca

Peroxidase antitumor active fragment from rice bran and preparation method and application thereof

The invention provides a peroxidase antitumor active fragment from rice bran, and a preparation method and application thereof. The preparation method of the fragment is: Trizol extraction of mRNA from millet seedling tissue, taking mRNA as template, enzyme catalyzed and reverse transcribed into cDNA. According to the FMBP mass spectrometric identification results of the antitumor activity protein of millet, the gene sequence of the protein was obtained in Genebank, and the Ca was screened according to the different functional regions.

【技术实现步骤摘要】
谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物技术和医药领域，具体属于一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段及其及其制备方法和应用。
技术介绍
谷子，学名：Setariaitalica，又称粟，去皮后称为小米，在植物学上属禾本科黍族狗尾草属，起源于中国，是北方的优势农作物，也是山西省的特色农产品之一。谷糠是谷子加工成小米的过程中得到的副产品。目前，对于谷糠的开发和研究并不多。谷糠中含有丰富的营养成分和有益成分。如：甘油三脂、脂蛋白、谷维醇、维生素B、维生素E、葡萄糖、纤维素以及微量元素等。近年来发现谷子中有一系列具有药用价值的活性分子，这些活性分子具有抗氧化活性，抗菌活性，抗高血糖活性等。国内外尚未见关于谷糠中抗肿瘤活性蛋白分子的研究报道。我们课题组在前期研究中首次发现谷糠来源的过氧化物酶蛋白FMBP具显著的抗肿瘤活性，并已授权国家专利技术专利。为了降低该天然蛋白在体内可能产生免疫源性，同时也为了该蛋白后期能够进行规模化放大生产，我们通过重组截短优化获得FMBP发挥抗肿瘤效应的活性片段的功能基因、重组蛋白，以及将该重组蛋白在制备抗肿瘤药物以及耐药逆转剂中应用。专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段，其特征在于具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段，其特征在于具有SEQIDNo.1所示的氨基酸序列。2.一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段基因，其特征在于具有SEQIDNo.2所示的核苷酸序列。3.一种载体，其特征在于含有权利要求2所述的谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段基因。4.一种工程菌，其特征在于含有权利要求3所述的载体。5.如权利要求1所述的一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段的制备方法，包括如下步骤：(1)将谷子幼苗在液氮中磨成粉末，Trizol法提取总RNA，利用反转录酶获得cDNA模板；(2)根据谷子抗肿瘤活性蛋白FMBP质谱鉴定结果，在Genebank中获得该蛋白基因序列，根据其不同的功能区域分别截短筛选，确定Ca2+结合位点的基因序列为抗肿瘤效应结构域，以此设计上下游引物SEQIDNo.3和SEQIDNo.4；以cDNA为模板，建立PCR反应体系，回收PCR产物，测序鉴定；(3)PCR产物经BamHI和HindⅢ双酶切，与同样经过双酶切的pMal-s载体连接，转化E.co...

【专利技术属性】
技术研发人员：单树花，张晓莉，李卓玉，李汉卿，武海丽，史江颖，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西,14