一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料及制备与应用制造技术

本发明专利技术属于亲和富集整体材料领域，公开了一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料及制备与应用。将单体GMA与交联剂、致孔剂和引发剂混合反应得到基质整体材料；然后将金属螯合剂溶液灌注到基质材料中，加热反应，然后灌注金属无机盐溶液反应，将金属离子螯合固定到基质材料上，再灌注含组氨酸标签的小肽配体溶液反应，得到基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料。本发明专利技术的整体材料以小肽作为亲和配基，相比较于常用的蛋白质A/G、抗原或靶标蛋白等生物大分子配基，其表现出价格低廉、化学性质稳定、不含生物杂质、无免疫原性、洗脱条件非常温和不会对抗体蛋白的构象产生破坏、使用寿命长等优点。

Affinity and enrichment monolithic materials based on biomimetic peptide ligands and their preparation and Application

The invention belongs to the field of affinity enrichment and integral materials, and discloses an affinity and enrichment monolithic material based on biomimetic peptide ligands, and its preparation and application. The monomer GMA is mixed with the crosslinker, the pore forming agent and the initiator to get the whole material. Then the metal chelating agent is perfused into the matrix material, the reaction is heated and then the metal salt solution is perfused. The metal ion chelation is immobilized on the matrix material, and then the small peptide ligand solution containing the histidine label is filled. The affinity and enrichment materials based on biomimetic peptide ligands were obtained. The whole material of the present invention has small peptide as an affinity ligand. Compared with the common protein A/G, antigen or target protein, it shows low price, stable chemical properties, no biological impurities, no immunogenicity, elution conditions, very mild conditions and no damage to the conformation of the antibody protein. The advantages of long life and so on.

【技术实现步骤摘要】
一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料及制备与应用
本专利技术属于亲和富集整体材料领域，具体涉及一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料及制备与应用。
技术介绍
单抗药物由于具有靶向性强、特异性高、毒副作用低等众多优点而成为目前制药界的热点领域。2014年全球销售前十的药物中抗体类药物占七席，并包揽了前三甲[NatureReviewsDrugDiscovery,2015,14(2):83-83；NatureReviewsDrugdiscovery,2014,13(8):577-587.]。据全球顶尖市场调研公司PMR的最新预测，至2020年全球抗体类药物市场规模将超过1400亿美元。值得注意的是，在单抗药物的生产过程中，下游单抗纯化的花费约占总体成本50-80％[JournalofChromatographyA,2016,1466:105-112.]，严重制约了单抗药物的推广和普及。一直以来，基于蛋白质A/G的亲和富集材料凭借其高亲和能力和强特异性在单抗纯化中占主导地位[JournalofChromatographyB,2014,962:89-93.]。但是，蛋白质A/G存在易降解、易本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将单体甲基丙烯酸缩水甘油酯与交联剂、致孔剂和引发剂混合，超声溶解、脱气后灌入容器内，加热聚合反应，冲洗除去未反应的残留物，得到基质整体材料；(2)合成含组氨酸标签的小肽配体：将小肽与间隔臂试剂反应后再与组氨酸标签反应，得到含组氨酸标签的小肽配体；(3)将金属螯合剂溶液灌注到步骤(1)所得基质整体材料中，加热反应；然后灌注金属无机盐溶液反应，将金属离子螯合固定到基质整体材料上，再灌注步骤(2)所得含组氨酸标签的小肽配体溶液反应，得到基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料。

【技术特征摘要】
1.一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将单体甲基丙烯酸缩水甘油酯与交联剂、致孔剂和引发剂混合，超声溶解、脱气后灌入容器内，加热聚合反应，冲洗除去未反应的残留物，得到基质整体材料；(2)合成含组氨酸标签的小肽配体：将小肽与间隔臂试剂反应后再与组氨酸标签反应，得到含组氨酸标签的小肽配体；(3)将金属螯合剂溶液灌注到步骤(1)所得基质整体材料中，加热反应；然后灌注金属无机盐溶液反应，将金属离子螯合固定到基质整体材料上，再灌注步骤(2)所得含组氨酸标签的小肽配体溶液反应，得到基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料。2.根据权利要求1所述的一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述交联剂是指乙二醇二甲基丙烯酸酯、聚乙二醇二丙烯酸酯、3-(N-甲基-N,N-二甲基丙烯酰氧乙基氨)丙烷磺酸盐、2-(N-甲基-N,N-二甲基丙烯酰氧乙基氨)乙烷羧酸盐和2-(甲基丙烯酰氧基)乙基-[N-(2-甲基丙烯酰氧基)乙基]磷酰胆碱中的任意一种；所述致孔剂为水、1,4-丁二醇和正丙醇的混合溶液；所述引发剂为偶氮二异丁腈。3.根据权利要求1所述的一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的容器为不锈钢管、玻璃管、毛细管、固相萃取小柱、磁性纳米材料、固相萃取吸头、薄层板、滤纸、滤膜或玻璃单体瓶。4.根据权利要求1所述的一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的容器为经过γ-MAPs预处理的色谱容器。5.根据权利要求1所述的一种基于仿生小肽配基的亲和富集整体材料的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：江正瑾，王启钦，王祥宇，韩海，金含颖，刘潇，罗荣英，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44