一株解淀粉芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)NTBA，该菌株已于2016年12月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其生物保藏号为：CGMCC NO.13449。该菌株具有解磷、解钾、抑制植物病原菌和促进烟草植株生长多种功能，为提高烟田土壤肥力、改善烟田土壤环境、植物病害生物防治和进一步提高我国烟叶品质提供了理论依据和菌质资源。

Bacillus amyloid bacillus and its application

The invention discloses a strain of Bacillus amyloliquefaciens NTBA, which has been preserved in the general microorganism center of the Chinese microbe preservation management committee in December 14, 2016, and its biological preservation number is CGMCC NO.13449. The strain has many functions as phosphorus removal, potassium solution, inhibition of plant pathogens and the growth of tobacco plant growth. It provides a theoretical basis for improving soil fertility in tobacco fields, improving soil environment in tobacco fields, biological control of plant diseases, and further improving the quality of tobacco leaves in China.

【技术实现步骤摘要】
一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株解淀粉芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
植物内生细菌(Endophyticbacteria)泛指那些定殖于植物体内而未表现致病外部症状的、或对宿主植物无负面影响的细菌。植物内生细菌的一个重要生物学功能是生防特性，可用于植物病害、虫害和植物寄生线虫的生物防治。植物内生细菌易于定殖在植物体内，相对于植物外生生防微生物，在定殖方面更具优势。在地球上存在的300000种植物中，每种植物都有内生细菌存在，但仅有少数植物的内生细菌资源被报道。部分烟草品种的烟草内生菌种类组成、种群动态特征已有报道，并用于烟草病害的生物防治。但大多数研究都集中于单一功能生物因子或同一功能的不同生物因子的功能菌群的研究，对多功能内生细菌菌株筛选研究甚少。钾和磷在优质烟叶生产中具有重要作用，国外优质烟叶的钾含量一般都高于2.5％，而我国烟叶钾含量一般低于2％，优质烤烟要达到所需含钾量实际上是钾素在烟株体内的积累过程，因此，生产优质烟叶必须施用形成最适产量烟株生产所需钾素2-3倍的钾肥，才能使烟叶含钾量大幅提高。磷也是烟草生长的要素之一，烟草缺磷时，会导致烟草生长缓慢，抗逆性减弱，影响烤烟品质。但是，我国烟区土壤中有效钾、磷含量普遍偏低，而且土壤中95％以上的钾以矿物钾形态存在，不能被烟株直接吸收利用。土壤中的磷素以无机态和有机态两种形式存在，其中无机磷的含量约占35-50％，可供烟株直接利用的只有不足10％；有机磷不能被直接吸收利用，必须在微生物的作用下转变成可利用的无机态形式才能被吸收利用。为提升烟叶品质，在烟草种植的过程中大量施入钾肥和磷肥，虽然能够增加烟叶的产量，但却破坏了土壤结构，造成土壤肥力不断下降。因此，开发新的高效解磷、解钾菌株制成微生物肥料，来释放土壤中固定的磷和钾资源，对于发展生态农业具有十分重要的意义。另外，烟草是受病害威胁最为严重的农作物之一，烟草从育苗到采收的各个阶段，都可受到病原物的侵害。采用生物防治烟草病害，可以提高烟叶的质量和使用安全性，但现有的用于烟草病害防治的微生物农药，其抑菌谱范围较小，抑菌效果不理想。因此，针对烟草的生理特性，为提高烟田土壤肥力，改善烟田土壤环境，提高烟草的抗病能力和提升烟叶品质，亟需开发新的多功能烟草内生菌。
技术实现思路
针对上述现有技术的不足，专利技术人经长期的技术与实践探索，从烟草茎秆的髓部组织中筛选分离出一株具有解磷、解钾、抑菌和促进烟草植株生长的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA，该菌株为多功能的烟草内生菌，为提高烟田土壤肥力、改善烟田土壤环境、植物病害生物防治和进一步提高我国烟叶品质提供了理论依据和菌质资源。具体的，本专利技术涉及以下技术方案：本专利技术的第一方面，提供了一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA，该菌株已于2016年12月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，其生物保藏号为：CGMCCNO.13449。本专利技术的第二方面，提供上述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA的培养方法，所述培养方法包括：将解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA置于NB培养基中培养，培养条件为28℃下有氧培养，如28℃、150r/min振荡培养。本专利技术的第三方面，提供解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA的发酵培养物。所述发酵培养物具体可为如下方法制备的发酵培养物：将解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA接种到NB培养基中，28℃、150r/min振荡培养48-72h，得到发酵培养物(即整个发酵体系)。本专利技术的第四方面，提供上述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA的应用；所述应用为解钾和/或解磷和/或抑制植物病原菌和/或促进烟草植株生长；所述植物病原菌为杨树溃疡病菌和烟草黑胫病菌。本专利技术的第五方面，提供上述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)和/或解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)的发酵培养物在制备产品中的应用；所述产品具有如下至少一种用途：(I)解钾；(II)解磷；(III)抑制植物病原菌；(IV)促进烟草植株生长；所述植物病原菌为杨树溃疡病菌和烟草黑胫病菌。本专利技术的第六方面，提供一种微生物菌剂，其活性成分为上述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA或解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA的发酵培养物。作为优选，微生物菌剂的剂型为可湿性粉剂、水分散剂、水悬浮剂或可分散油悬浮剂。作为优选，微生物菌剂中还包括农药学上可接受的辅料，所述农药学上可接受的辅料选自分散剂、润湿剂、崩解剂、粘结剂、消泡剂中的一种或多种。本专利技术对于所述农药学上可接受的辅料的来源没有特殊限制，一般采用市售产品即可。在烟田土壤中施用本专利技术的微生物菌剂，其活性成分解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA或其发酵培养物可以将烟田土壤中难以被烟草植株直接利用的磷和钾分解成可被直接吸收的磷和钾，提高了烟田土壤的肥力，促进了烟草植株的生长，也促进了钾素在烟株体内的积累，从而提高了烟草和烟叶的品质；另外，本专利技术的微生物菌剂对烟草生长过程中的病原菌具有防治作用，提高了烟草植株的抗病能力。基于此，上述微生物菌剂在提高烟田土壤中可被烟草直接利用的钾和磷含量、提高烟草植株的抗病能力和提高烟叶品质中的应用也是本专利技术的保护范围。本专利技术的有益效果：本专利技术首次从烟草植株内分离出了一株具有解磷、解钾、抑制植物病原菌和促进烟草植株生长的多功能解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA，为提高烟田土壤肥力、改善烟田土壤环境、植物病害生物防治和进一步提高我国烟叶品质提供了理论依据和菌质资源。而且，本专利技术的解淀粉芽孢杆菌本身为烟草的内生细菌，将其应用于烟草种植时，相较于其他外来引进的菌种，能够在烟地土壤环境中更好的存活和迅速的生长，更有利于促进烟草植株的生长和烟草病虫害的防治，对生态环境的安全性也更高。附图说明图1：菌株的系统发育树。图2：解淀粉芽孢杆菌NTBA的抑菌活性实验结果；其中，A：对杨树溃疡病菌的抑菌效果；B：对烟草黑胫病菌的抑菌效果。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。正如
技术介绍
部分所介绍的，由于我国烟区土壤中有效钾、磷含量普遍偏低，而优质烟叶需要大量钾和磷的积累，再加之烟草植株极易受到植物病原菌的侵害，因此，亟需一种能够集解钾、解磷、抑制植物病原菌和促进烟草植株生长多种功能于一体的烟草内生菌。解淀粉芽孢杆菌是芽孢杆菌的一个种，在酶工业、食品工业和农业中具有广泛的应用，但解淀粉芽孢杆菌同本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)NTBA，其生物保藏号为：CGMCCNO.13449。

【技术特征摘要】
1.一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA，其生物保藏号为：CGMCCNO.13449。2.权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，所述培养方法包括：将解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)NTBA置于NB培养基中培养，培养条件为28℃下有氧培养。3.权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌的发酵培养物。4.权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌的应用；所述应用为解钾和/或解磷和/或抑制植物病原菌和/或促进烟草植株生长；所述植物病原菌为杨树溃疡病菌和烟草黑胫病菌。5.权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌和/或权利要求3所述的发酵培养物在制备产品中的应用；所述产品具有如下至少一种用途：(I)解钾；(I...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘振宇，李祥英，孟武，杨德廉，
申请(专利权)人：山东农业大学，齐鲁工业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37