一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片制造技术

本实用新型专利技术公开了一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，包括微流控芯片主体和与其连接的驱动装置，所述微流控芯片主体包括由下至上依次设置的玻璃基片、PDMS中间层和PDMS盖片层；所述玻璃基片表面具有单糖、寡糖或多糖修饰层；所述PDMS中间层设有多条平行的微流道，所述微流道的底部为玻璃基片表面的修饰层；所述PDMS盖片层上设有多组进样口和出样口，同组进样口和出样口分别连通于微流道两端；所述修饰层与微流道的形状相对应。其结构简单，能够快速准确识别表达I型菌毛的细菌。

A microfluidic sugar modified chip for bacterial identification

The utility model discloses a microfluidic sugar modified chip for bacterial recognition, including a microfluidic chip body and a driving device connected with it. The microfluidic chip body consists of a glass substrate, a PDMS middle layer and a PDMS cover layer arranged in a lower and upper order, and the surface of the glass substrate has monosaccharides, oligosaccharides or polysaccharides. The PDMS middle layer is provided with a plurality of parallel microfluidic channels, and the bottom of the microfluidate is a modified layer on the surface of the glass substrate; the PDMS cover layer is provided with a number of groups of inlet and exit samples, the same group inlet and the exit sample are connected to the two ends of the microfluidic channel, and the modified layer corresponds to the shape of the microfluidic channel. Its structure is simple, and it can identify bacteria expressing I fimbriae quickly and accurately.

【技术实现步骤摘要】
一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片
本技术涉及生化分析技术，具体涉及一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片。
技术介绍
现有技术中，人们将能够与单糖、寡糖或多糖结合的大肠杆菌属菌称为表达I型菌毛的大肠杆菌属菌，同时在肠道杆菌中也发现了表达I型菌毛的细菌，如肠炎沙门氏菌等，这些大多为食源性致病菌，食源性致病菌易通过食品流通环节感染人群。因此，对食品、饮料生产中表达I型菌毛的细菌的快速、高效识别检测是食品安全的重要保证。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，其结构简单，能够快速准确识别表达I型菌毛的细菌。本技术所述的用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，包括微流控芯片主体和与其连接的驱动装置，所述微流控芯片主体包括由下至上依次设置的玻璃基片、PDMS中间层和PDMS盖片层；所述玻璃基片表面具有单糖、寡糖或多糖修饰层；所述PDMS中间层设有多条平行的微流道，所述微流道的底部为玻璃基片表面的修饰层；所述PDMS盖片层上设有多组进样口和出样口，同组进样口和出样口分别连通于微流道两端；所述修饰层与微流道的形状相对应。进一步，所述微流道平行设置，相邻微流道之间的间距与检测仪器的孔板槽的间距相匹配。进一步，所述玻璃基片表面具有甘露糖修饰层。进一步，所述玻璃基片的长度为50~100mm，宽度为10~40mm。进一步，所述微流道的数量为2~8条。进一步，所述微流道的长度为10~30mm，宽度为0.5~3mm，高度为0.5~1mm。进一步，所述PDMS盖片层的厚度为0.5~1mm。进一步，所述驱动装置为微泵、压力驱动或利用虹吸原理提供驱动力，用于控制微流道内流体流速，所述微泵、压力驱动或利用虹吸原理提供驱动力均是现有微流控芯片技术中的常用手段。进一步，所述微泵与出样口连接，通过负压进样调节微流控芯片通道内流体流速。本技术通过玻璃基片表面的单糖、寡糖或多糖修饰层，且设置的微流道底部为玻璃基片表面的修饰层，使得流体经过微流道时与玻璃基片表面的单糖、寡糖或多糖修饰层接触，进而表达I型菌毛的细菌与单糖、寡糖或多糖结合，能够快速识别出表达I型菌毛的细菌。并且结构简单，成本低廉，使用方便。附图说明图1是本技术的结构示意图；图2是本技术的截面示意图。图中，1—PDMS盖片层，11—进样口，12—出样口，2—PDMS中间层，21—微流道，3—玻璃基片，31—修饰层。具体实施方式下面结合附图对本技术作详细说明。参见图1和图2所示的用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，包括微流控芯片主体和与其连接的驱动装置，所述微流控芯片主体包括由下至上依次设置的玻璃基片3、PDMS中间层2和PDMS盖片层1。所述驱动装置为微泵、压力驱动或利用虹吸原理提供驱动力，用于控制微流道内流体流速，所述微泵、压力驱动或利用虹吸原理提供驱动力均是现有微流控芯片技术中的常用手段。所述玻璃基片3、PDMS中间层2和PDMS盖片层1从下至上依次键合制得微流控芯片主体。所述玻璃基片3的长度为75mm，宽度为25mm，表面具有单糖、寡糖或多糖修饰层31；优选地，所述玻璃基片表面具有有甘露糖修饰层31，甘露糖是一种单糖，表达I型菌毛的细菌能够与甘露糖结合，进而实现表达I型菌毛的快速识别。所述PDMS中间层2设有六条平行的微流道21，所述微流道21的底部为玻璃基片3表面的甘露糖修饰层31。相邻微流道21之间的间距与检测仪器的孔板槽的间距相匹配，现有的检测仪器的孔板槽的间距与384孔板或946孔板的孔间距相匹配，因此相邻微流道21之间的间距与384孔板或946孔板的孔间距一致。所述微流道21的长度为15mm，宽度为1mm，高度为0.5mm。所述修饰层31与微流道21的形状相对应。所述PDMS盖片层1上设有六组进样口11和出样口11，同组进样口11和出样12口分别连通于微流道21两端。所述PDMS盖片层1的厚度为0.5mm。所述微泵与出样口12连接，通过负压进样调节微流控芯片微流道21内的流体流速。具体试验时，为了增强识别过程中信号强度，结合细菌荧光标记技术进行细菌识别。其具体步骤为：步骤一、将用吖啶橙标记的梯度浓度为102~106cfu/mL-1的沙门氏菌S.123443以5μL/min的进样速度通入到所述微流控芯片的五条微流道中，记作识别组，最后一条微流道通入pH=7.4的磷酸缓冲液作为空白对照，记作对照组。步骤二、流动状态孵育45min后，用1mL的pH=7.4的磷酸缓冲液冲洗微流道，去除残留吖啶橙。步骤三、将步骤二处理后的微流控芯片固定在化学荧光发光仪的孔板读数托架上，测定微流道内荧光强度。通过识别组与对照组的荧光值的差值判断识别效果。以上所述仅是本技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，包括微流控芯片主体和与其连接的驱动装置，其特征在于：所述微流控芯片主体包括由下至上依次设置的玻璃基片（3）、PDMS中间层（2）和PDMS盖片层（1）；所述玻璃基片（3）表面具有单糖、寡糖或多糖修饰层（31）；所述PDMS中间层（2）设有多条微流道（21），所述微流道（21）的底部为玻璃基片（3）表面的修饰层（31）；所述PDMS盖片层（1）上设有多组进样口（11）和出样口（12），同组进样口（11）和出样口（12）分别连通于微流道（21）两端；所述修饰层（31）与微流道（21）的形状相对应。

【技术特征摘要】
1.一种用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，包括微流控芯片主体和与其连接的驱动装置，其特征在于：所述微流控芯片主体包括由下至上依次设置的玻璃基片（3）、PDMS中间层（2）和PDMS盖片层（1）；所述玻璃基片（3）表面具有单糖、寡糖或多糖修饰层（31）；所述PDMS中间层（2）设有多条微流道（21），所述微流道（21）的底部为玻璃基片（3）表面的修饰层（31）；所述PDMS盖片层（1）上设有多组进样口（11）和出样口（12），同组进样口（11）和出样口（12）分别连通于微流道（21）两端；所述修饰层（31）与微流道（21）的形状相对应。2.根据权利要求1所述的用于细菌识别的微流控糖修饰芯片，其特征在于：所述微流道平行设置，相邻微流道（21）之间的间距与检测仪器...

【专利技术属性】
技术研发人员：张沐，卓峻峭，
申请(专利权)人：张沐，
类型：新型
国别省市：重庆,50