糖皮质激素受体的小分子拮抗剂制造技术

本发明专利技术描述糖皮质激素受体的小分子拮抗剂及其在药物合成方面的应用，糖皮质激素受体的小分子拮抗剂以及所述糖皮质激素小分子拮抗剂药学上的可用盐作为用于治疗或预防预防糖皮质激素受体介导的相关疾病或病症的药物的用途。

Small molecular antagonist of glucocorticoid receptor

A small molecular antagonist describing glucocorticoid receptor and its application in drug synthesis, a small molecular antagonist of glucocorticoid receptor, and the pharmaceutically available salt of the glucocorticoid small molecule antagonist as a drug for the treatment or prevention of related diseases or diseases mediated by glucocorticoid receptor. Use.

【技术实现步骤摘要】
糖皮质激素受体的小分子拮抗剂
本专利技术描述糖皮质激素受体的小分子拮抗剂及其在治疗或者预防糖皮质激素受体介导的疾病中的应用。
技术介绍
糖皮质激素是由肾上腺皮质中束状带分泌的一类甾体激素，主要为皮质醇，具有调节糖、脂肪、和蛋白质的生物合成和代谢的作用，还具有抑制免疫应答、抗炎、抗毒、抗休克作用，称其为“糖皮质激素”是因为其调节糖类代谢的活性最早为人们所认识。糖皮质激素有抗炎、抗过敏、抗风湿、免疫抑制作用，广泛的用于治疗过敏性与自身免疫性炎症性疾病。如结缔组织病、活动性风湿病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、严重支气管哮喘、严重皮炎、溃疡性结肠炎、急性白血病等，也用于某些严重感染及中毒、恶性淋巴瘤的综合治疗。糖皮质激素在体内还参与糖异生过程，血糖的来源主要有体内食物消化为葡萄糖、糖异生和糖原分解等3种途径。催化肝脏葡萄糖异生和糖原分解的关键酶的基因异常表达会导致高血糖，这些基因受多种不同的转录因子共同调控，如糖皮质激素受体，糖皮质激素受体(Glucocorticoidreceptor，GR)与进入体内循环的配体结合并启动催化葡萄糖异生的相关酶的基因转录而发挥作用。糖皮质激素作为GR激动剂可促进蛋白质分解，使较多的氨基酸进入肝脏，同时增强肝内糖异生相关酶的活性，促进糖异生过程，使血糖水平升高。此外，GR激动剂具有强烈的胰岛素抵抗作用，降低血糖的利用率，导致血糖升高。因此，利用GR拮抗剂竞争性地与糖皮质激素结合，可抑制糖异生作用，同时削弱胰岛素抵抗，降低血糖水平，因此可以利用糖皮质激素拮抗剂达到治疗糖尿病的目的。糖皮质激素拮抗剂的药物还包括米非司酮，该药物在临床上用于紧急避孕、终止妊娠和早产，其催经止孕的机理主要是通过竞争内膜(蜕膜)的孕酮受体，阻断孕酮的作用。和孕酮受体的亲和力比黄体酮强5倍。糖皮质激素拮抗剂可用于治疗青光眼，青光眼是指眼内压间断或持续升高的一种眼病，持续的高眼压可以给眼球各部分组织和视功能带来损害，如不及时治疗，视野可以全部丧失而至失明。青光眼是导致人类失明的三大致盲眼病之一，总人群发病率为1％，45岁以后为2％。青光眼包括原发性开角型青光眼、原发性闭角型青光眼、继发性开角型青光眼、继发性闭角型青光眼、色素性青光眼、新生血管性青光眼、人工晶状体青光眼、恶性青光眼、葡萄膜炎青光眼、由外周粘膜导致的青光眼及其组合。糖皮质激素受体拮抗剂还可用于动脉粥样硬化、风湿性关节炎、风湿性肩周炎、精神性疾病、多器官功能性障碍综合症、库欣综合征等多种疾病的治疗。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供糖皮质激素受体拮抗剂的小分子化合物。所述小分子化合物包括：化合物GR-1，它的化学名称为：2-((8R，9S，10R，13S，14R，17R)-17-乙酰氧基-10，13-二甲基-3，11-二氧代6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17-十二氢-3H-环戊二烯并[a]菲-17-基)-2-氧代乙酸乙酯，结构式为I；化合物GR-2，它的化学名称为：2-((3，4-二甲基-2-苯基-2H-吡唑并[3，4-d]哒嗪-7-基)硫基)-N-(4-氨磺酰苯基)乙酰胺，结构式为II；化合物GR-3，它的化学名称为：N-(3-(苯并[d]噻唑-2-基)苯基)-3-氯-4-氟苯磺酰胺，它的结构式为III；化合物GR-4，它的化学名称为：(3R，8S，9R，10S，13R，14S，17R)-3-乙酰氧基-10，13-二甲基2，3，4，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17-十四氢-1H-环戊二烯并[a]菲-17-基苯甲酸酯，它的结构式为IV；化合物GR-5，它的化学名称为：(8R，9S，13R，14S，17R)-17-乙炔基-13-甲基-3-(4-硝基苯氧基)-7，8，9，11，12，13，14，15，16，17-十氢-6H-环戊二烯并[a]菲-17-醇，它的结构式为V；化合物GR-6，它的化学名称为：(5S，8R，9R，10S，13S，14R，17R)-17-乙酰基-17-羟基-5，10，13-三甲基十四氢-3H-环戊二烯并[a]菲-3，11(2H)-二酮，它的结构式为VI；上述小分子均能够有效拮抗糖皮质激素，其抑制活性分别为：GR_1_IC50＝28.43μM，GR_2_IC50＝2.915μM，GR_3_IC50＝26.97μM，GR_4_IC50＝23.53μM，GR_5_IC50＝18.53μM，GR_6_IC50＝8.603μM。本专利技术的又一个目的是提供所述小分子治疗或预防预防糖皮质激素受体介导的相关疾病或病症的药物的用途。其中所述疾病或病症包括(但不仅限于)：动脉粥样硬化、风湿性关节炎、风湿性肩周炎、精神性疾病、多器官功能性障碍综合症、库欣综合征、青光眼、糖尿病。所述青光眼包括继发性开角型青光眼、继发性闭角型青光眼及其组合。实现上述用途的的药用组合，包含治疗有效量的中药小分子抑制剂任意一种或几种和任何药学上可接受的赋形剂。上述药学上可接受的赋形剂可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂，特定赋形剂的选择将用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态，用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学上可接受的赋形剂包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂等。附图说明附图1GR_1的IC50曲线图附图2GR_2的IC50曲线图附图3GR_3的IC50曲线图附图4GR_4的IC50曲线图附图5GR_5的IC50曲线图附图6GR_6的IC50曲线图具体实施方式为了使本领域的技术人员更好的理解本专利技术的技术方案，下面以实施例进一步说明本专利技术。1.材料与消耗品2.化合物溶液制备与保存DMSO储存液，3个月以内室温保存，三个月以上-20℃保存。3.实验步骤3.1细胞悬浮液制备与细胞接种3.1.1所有细胞以ATCC建议的方式培养。HEK293T细胞采用指数增长期细胞。3.1.2移除烧瓶内培养基。3.1.3用PBS冲洗细胞。3.1.4在烧瓶中加入TrypLE溶液使细胞分离，用完全培养液清洗细胞。3.1.5离心并采用PBS清洗细胞，重复两次除去酚红，最然后使其悬浮于适当浓度的培养基中。3.1.6取存活率大于90％的细胞进行下一步实验。3.1.7将5.5*106HEK293T细胞传代至100mm的培养皿中培养，在37℃，5％CO2的环境下培养16h。3.2细胞转染3.2.1取Trans-IT转染试剂放至室温3.2.2充分混合Trans-IT转染试剂与Opti-MEM试剂，注意试剂不可沾到试管侧面。颠倒混匀，然后在室温下培养5min。随后在混合液中加入DNA，颠倒混匀并在室温下培养20min。所有质粒浓度为0.5mg/ml。在染色部分：分别添加8.4ugGAL4ERbeta质粒和1.26μpg14.35荧光素酶试剂。3.2.3将混合液加入步骤3.1准备的100mm培养皿中，37℃，5％CO2的环境下培养5-6h。3.3化合物处理3.3.1转移125nl化合物使用echo550稀释，放在384分析板中。3.3.2在步骤3.3.1准备的384孔板中培养步骤3.2得到的HEK293T细胞，培养至每孔中有15,000个细胞。采用无酚红DMEM以及含5％活性炭本文档来自技高网...

【技术保护点】
小分子化合物在制备糖皮质激素受体拮抗剂药物方面的用途，所述小分子化合物包括：2‑((8R，9S，10R，13S，14R，17R)‑17‑乙酰氧基‑10，13‑二甲基‑3，11‑二氧代6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17‑十二氢‑3H‑环戊二烯并[a]菲‑17‑基)‑2‑氧代乙酸乙酯(I)；2‑((3，4‑二甲基‑2‑苯基‑2H‑吡唑并[3，4‑d]哒嗪‑7‑基)硫基)‑N‑(4‑氨磺酰苯基)乙酰胺(II)；N‑(3‑(苯并[d]噻唑‑2‑基)苯基)‑3‑氯‑4‑氟苯磺酰胺(III)；(3R，8S，9R，10S，13R，14S，17R)‑3‑乙酰氧基‑10，13‑二甲基2，3，4，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17‑十四氢‑1H‑环戊二烯并[a]菲‑17‑基苯甲酸酯(IV)(8R，9S，13R，14S，17R)‑17‑乙炔基‑13‑甲基‑3‑(4‑硝基苯氧基)‑7，8，9，11，12，13，14，15，16，17‑十氢‑6H‑环戊二烯并[a]菲‑17‑醇(V)(5S，8R，9R，10S，13S，14R，17R)‑17‑乙酰基‑17‑羟基‑5，10，13‑三甲基十四氢‑3H‑环戊二烯并[a]菲‑3，11(2H)‑二酮(VI)...

【技术特征摘要】
1.小分子化合物在制备糖皮质激素受体拮抗剂药物方面的用途，所述小分子化合物包括：2-((8R，9S，10R，13S，14R，17R)-17-乙酰氧基-10，13-二甲基-3，11-二氧代6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17-十二氢-3H-环戊二烯并[a]菲-17-基)-2-氧代乙酸乙酯(I)；2-((3，4-二甲基-2-苯基-2H-吡唑并[3，4-d]哒嗪-7-基)硫基)-N-(4-氨磺酰苯基)乙酰胺(II)；N-(3-(苯并[d]噻唑-2-基)苯基)-3-氯-4-氟苯磺酰胺(III)；(3R，8S，9R，10S，13R，14S，17R)-3-乙酰氧基-10，13-二甲基2，3，4，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17-十四氢-1H-环戊二烯并[a]菲-17-基苯甲酸酯(IV)(8R，9S，13R，...

【专利技术属性】
技术研发人员：林建平，魏宇，赵骁勇，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：天津,12