提高Ubiad1表达的方法技术

本发明专利技术涉及一种提高Ubiad1在器官、组织或细胞中表达的方法，包括将包含通式(I)的肽或其衍生物的组合物接触所述器官、组织或细胞。Ubiad1在器官、组织或细胞中表达的提高将有助于改善其生理机能。

Methods to improve the expression of Ubiad1

The present invention relates to a method for improving the expression of Ubiad1 in organs, tissues or cells, including contact with the organ, tissue, or cell of a peptide containing the general formula (I) or its derivative. The improvement of Ubiad1 expression in organs, tissues or cells will help to improve its physiological function.

【技术实现步骤摘要】
提高Ubiad1表达的方法
本专利技术涉及一种提高Ubiad1表达的方法，具体地涉及一种使用通式(I)的肽提高Ubiad1表达的方法。
技术介绍
皮肤是由包括表皮、表皮真皮连接、真皮等层组成的覆盖器官。最外面的部分是表皮，基本上由彼此紧密地连接的角化细胞组成的多覆层上皮。表皮的基层由增殖细胞(主要为角化细胞和黑素细胞)层组成，其固定于真皮表皮连接上。真皮是支撑皮肤的组织并且由包封于蛋白多糖的间隙基质中的水、弹性纤维和胶原纤维(70％的真皮纤维)组成。成纤维细胞是真皮主要的细胞成分并且是胶原纤维和弹性纤维合成的来源。随着年龄增长的老化也会引起皮肤内的内源抗氧化机制和整体修复过程的效率的下降。此外，人类皮肤明显且长期地暴露在诸如紫外线辐射、污染和化学有机毒物等不利外界环境中。这些不良因素会加重皮肤衰老，甚至导致引起皮肤出现未老先衰的表征。已开发出多种加强皮肤生理机能，包括使皮肤中细胞再生活化、增强皮肤中弹性基质、提高皮肤细胞中如维生素E、辅酶Q10和抗坏血酸等抗氧化分子水平的产品。但是，新的与皮肤护理相关的机理/标靶的鉴定对于相关产品的开发仍然非常重要。
技术实现思路
本专利技术涉及一种提高Ubiad1在器官、组织或细胞中表达的方法，包括将包含通式(I)的肽或其衍生物的组合物接触所述器官、组织或细胞，R1-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2(I)其中AA表示任意氨基酸或其衍生物，并且n和p为0-4之间的整数；R1表示氨基酸N-末端的伯胺官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：乙酰基、苯甲酰基、甲苯磺酰基和苄氧羰基，R2是氨基酸C-末端的羧酸的羟基官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：C1-C30烷基链、NH2、NHY基团和NYY基团，其中Y是C1-C4烷基链。在一个实施方式中，所述通式(I)的肽包括选自SEQIDNO:1和SEQIDNO:2的氨基酸序列。在一个实施方式中，所述通式(I)的肽由SEQIDNO:1或SEQIDNO:2所示的氨基酸序列所组成，优选由SEQIDNO:2所示的氨基酸序列所组成。在一个实施方式中，所述细胞为角化细胞，优选表皮的角化细胞。在一个实施方式中，所述器官为皮肤，包括皮肤以及皮肤附属物。在一个实施方式中，所述组织为皮肤的表皮组织，优选表皮的棘突层和基底层。本专利技术的方法可以提高Ubiad1的表达，这有助于提高皮肤在包括抵御氧化应激和脂质过氧化，保持皮肤细胞质膜流动性/渗透性等方面的生理机能。本专利技术在皮肤护理领域具有很好的应用前景。附图说明图1：Ubiad1在正常皮肤中的表达(A)Ubiad1(绿色)的免疫检测和使用DAPI染色的DNA(蓝色)，Ubiad1在表皮棘突和基底层中是阳性的(x20物镜；比例尺＝31μm)。(B)Ubiad1(绿色)的免疫检测和使用DAPI染色的DNA(蓝色)，Ubiad1显示紧密的核周定位，极性定位(细胞器样)(x63物镜；比例尺＝10μm)。(C)在培养的人角化细胞中的Ubiad1(绿色)、Giantin(红色)的免疫检测和使用DAPI染色的DNA(蓝色)，蛋白共定位(黄色)，在视野中间的细胞的皮尔逊相关系数是相对高的0.79和0.77(x63物镜；比例尺＝10μm)。图2：本专利技术的肽提高Ubiad1在人角化细胞中的表达及其意义(A)在连续角化细胞培养继代后的Ubiad1免疫印迹(E表示早期继代；L表示晚期继代)，和在使用1μM(1％)Ubiad1诱导肽处理后的Ubiad1的免疫印迹。(B)在使用1μM(1％)Ubiad1诱导肽处理后的Ubiad1的qPCR数据。(C)使用Ubiad1诱导肽处理并使用乙酸双氧铀和柠檬酸铅双染色的角化细胞的代表性电子显微镜图像(左图比例尺＝1μm；右图比例尺＝0.5μm)。图3：Ubiad1表达提高对角化细胞的保护作用(A)使用CellROX绿色测定，暴露于200μM枯烯氢过氧化物1小时的角化细胞中的细胞ROS测量(x20物镜，比例尺＝31μm)。(B)使用单向方差分析的CellROX量化图，显示以星形表示的置信区间平均值(绿色)。穿过各星形的线表示组平均值。各星形的垂直跨度表示对各组的95％置信区间。大样本平均值由水平黑线表示。(C)在暴露于200μM枯烯氢过氧化物1小时的角化细胞中的脂质过氧化(还原的BODIPY为红色；氧化的BODIPY为绿色)(x20物镜，比例尺＝31μm)。(D)使用单向方差分析的脂质过氧化量化图，显示以星形表示的置信区间平均值(绿色)。穿过各星形的线表示组平均值。各星形的垂直跨度表示对各组的95％置信区间。大样本平均值由水平黑线表示。(E)在处于反应性氮物质应激下的角化细胞中的3-硝基酪氨酸(绿色)的免疫检测，使用鬼笔环肽染色的F-肌动蛋白(红色)和使用DAPI染色的DNA(蓝色)(x20物镜；比例尺＝31μm)。(F)使用单向方差分析的3NT量化图，显示以星形表示的置信区间平均值(绿色)。穿过各星形的线表示组平均值。各星形的垂直跨度表示对各组的95％置信区间。大样本平均值由水平黑线表示。(G)在暴露于2mM枯烯氢过氧化物1小时的角化细胞中，使用TMA-DPH探针(蓝色)的质膜完整性测量(x20物镜，比例尺＝31μm)。(H)使用单向方差分析的TMA-DPH量化图，显示以星形表示的置信区间平均值(绿色)。穿过各星形的线表示组平均值。各星形的垂直跨度表示对各组的95％置信区间。大样本平均值由水平黑线表示。专利技术详述本专利技术涉及一种提高Ubiad1在器官、组织或细胞中表达的方法，包括将包含通式(I)的肽或其衍生物的组合物接触所述器官、组织或细胞，R1-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2(I)其中AA表示任意氨基酸或其衍生物，并且n和p为0-4之间的整数；R1表示氨基酸N-末端的伯胺官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：乙酰基、苯甲酰基、甲苯磺酰基和苄氧羰基，R2是氨基酸C-末端的羧酸的羟基官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：C1-C30烷基链、NH2、NHY基团和NYY基团，其中Y是C1-C4烷基链。Ubiad1(也称为Tere1)基因克隆于2001年(McGarveyTW等Oncogene2001；20:1042-51)。本专利技术人发现Ubiad1位于表皮的角化细胞中，Ubiad1和穿膜蛋白(Golgin家族蛋白)共定位的光学显微镜图像限定于高尔基域，而Ubiad1染色还涉及线粒体网络。本专利技术人发现Ubiad1的表达提高的期间也伴随有细胞的高尔基体和线粒体元件超微结构特征的显著改进，其积极作用对角化细胞的细胞能量学是有益的。角化细胞中线粒体DNA和蛋白的氧化破坏与皮肤生理机能的下降如老化相关。而且，本专利技术人还证实Ubiad1在皮肤细胞抗氧化应激，防止脂质过氧化等方面具有重要作用。皮肤细胞，如角化细胞(keratinocytes)中Ubiad1表达的提高可有效降低角化细胞中发生的氧化应激以及脂质过氧化。此外，Ubiad1在保持细胞膜流动性/渗透性等方面也具有重要作用，Ubiad1表达的增加也有助于保持细胞膜流动性/渗透性。术语“肽”意指通过肽键彼此结合的两个或多个氨基酸的链。术语“本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高Ubiad1在器官、组织或细胞中表达的方法，包括将包含通式(I)的肽或其衍生物的组合物接触所述器官、组织或细胞，R1‑(AA)n‑Ala‑Val‑Leu‑Ala‑Gly‑(AA)p‑R2  (I)其中AA表示任意氨基酸或其衍生物，并且n和p为0‑4之间的整数；R1表示氨基酸N‑末端的伯胺官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：乙酰基、苯甲酰基、甲苯磺酰基和苄氧羰基，R2是氨基酸C‑末端的羧酸的羟基官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：C1‑C30烷基链、NH2、NHY基团和NYY基团，其中Y是C1‑C4烷基链。

【技术特征摘要】
1.一种提高Ubiad1在器官、组织或细胞中表达的方法，包括将包含通式(I)的肽或其衍生物的组合物接触所述器官、组织或细胞，R1-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2(I)其中AA表示任意氨基酸或其衍生物，并且n和p为0-4之间的整数；R1表示氨基酸N-末端的伯胺官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：乙酰基、苯甲酰基、甲苯磺酰基和苄氧羰基，R2是氨基酸C-末端的羧酸的羟基官能团，是未取代的或者是由选自以下的保护基团取代：C1-C30烷基链、NH2、NHY基团和NYY基团，其中Y是C...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·贡德朗，K·屈居梅尔，F·拉巴拉德，
申请(专利权)人：ISP投资有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US