志贺氏菌干粉化LAMP快速检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了志贺氏菌干粉化LAMP快速检测试剂盒，该试剂盒由干粉化检测试剂、复溶液、阳性对照干粉、阴性对照干粉、封闭液、显色液和裂解液组成，以上7种试剂分别置于容器中。应用于本试剂盒中的6条引物对应志贺氏菌特异性靶基因序列的8个区段，通过加入显色液，阴阳性显色差异明显，具有特异性强、灵敏度高、易于操作、结果判断简单等优点，适合于食品安全卫生领域中的志贺氏菌快速检测。另外，本发明专利技术为干粉化的检测试剂，便于常温运输，且使用简单、快捷，无需专门仪器，降低成本并拓宽产品应用范围，更适用于现场及偏远地区基层对志贺氏菌的快速检测，具有广泛的应用前景。

Rapid detection kit for dry powder LAMP detection of Shigella

The present invention discloses a rapid detection kit for Shigella dry powder LAMP. The kit consists of dry powder detection reagent, complex solution, positive control dry powder, negative control dry powder, sealing solution, color solution and lysate, and the above 7 reagents are respectively placed in the container. The 6 primers used in this kit correspond to the 8 sections of the specific target gene sequence of Shigella. By adding color solution, the color difference between yin and Yang is obvious. It has the advantages of strong specificity, high sensitivity, easy operation and simple results. It is suitable for rapid detection of Shigella in food safety and health field. In addition, the invention is a testing reagent for dry powder, easy to transport at normal temperature, easy to use, quick, without special instruments, lower cost and widen the application range of products. It is more suitable for rapid detection of Shigella at the base of field and remote areas, and has wide application foreground.

【技术实现步骤摘要】
志贺氏菌干粉化LAMP快速检测试剂盒
本专利技术涉及微生物分子生物学检测试剂，具体涉及一种基于LAMP技术的干粉化志贺氏菌核酸快速检测试剂盒.
技术介绍
志贺氏菌属(Shigella)即通称的痢疾杆菌，是一类革兰氏阴性杆菌，属于肠杆菌科，根据其抗原构造的不同分为四个种，分别为痢疾志贺氏菌(S.dysenteriae)、福氏志贺氏菌(S.flexneri)、鲍氏志贺氏菌(S.boydii)、宋内志贺氏菌(S.sonnei)。志贺氏菌属的四个种均是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌属，在人体中产生溃疡性结肠感染。该病原菌一般通过排泄物污染的食物或水传播的。每年全球可见大量因志贺氏菌感染肠道疾病的报道，夏秋两季患者最多，我国也深受其害，因此在食品安全领域如何快速准确对志贺氏菌进行快速的鉴定具有重要的意义。目前对致病微生物的检测有多种方法，传统方法以病原微生物分离培养鉴定、形态学鉴定和生化鉴定为主。目前志贺氏菌的检测以选择性培养基为主，其原理是利用志贺氏菌不利用乳糖、蔗糖等糖类物质产酸的特性而与其它肠杆菌相区别。显色培养基方面，目前暂未发现志贺氏菌表达的特异性酶，使得志贺氏菌的显色培养基开发受到本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种志贺氏菌的LAMP引物组，包括外引物F3/B3、内引物FIP/BIP以及环引物LF/LB，其特征在于：其序列如下：志贺氏菌‑F3：agcagacgaaatgtggcac志贺氏菌‑B3：tcgctagtgacagtgatgta志贺氏菌‑FIP：cgatgcgtagggacgcaggtagcatctgggagcattggtacg志贺氏菌‑BIP：agtgcgcagagttagcccagctgacttgtggctgacgccag志贺氏菌‑LF：cgcacaggcaggcctgcctgacg志贺氏菌‑LB：gccgtggccattagtgtgcctg。

【技术特征摘要】
1.一种志贺氏菌的LAMP引物组，包括外引物F3/B3、内引物FIP/BIP以及环引物LF/LB，其特征在于：其序列如下：志贺氏菌-F3：agcagacgaaatgtggcac志贺氏菌-B3：tcgctagtgacagtgatgta志贺氏菌-FIP：cgatgcgtagggacgcaggtagcatctgggagcattggtacg志贺氏菌-BIP：agtgcgcagagttagcccagctgacttgtggctgacgccag志贺氏菌-LF：cgcacaggcaggcctgcctgacg志贺氏菌-LB：gccgtggccattagtgtgcctg。2.一种志贺氏菌的干粉化LAMP快速检测试剂盒，其特征在于：其LAMP引物组如权利要求1所示。3.根据权利要求1所述的干粉化LAMP快速检测试剂盒，其特征在于：检测试剂盒包括干粉化的检测试剂、复溶液、阳性对照干粉、阴性对照干粉、显色液、裂解液和封闭液。4.根据权利要求3所述的干粉化LAMP快速检测试剂盒，其特征在于：干粉化的检测试剂冻干前含有0.9～1.6mmol/LdNTPs、0.3～0.4U/μLBstDNA聚合酶、0.1～0.5μmol/L外引物F3/B3、1.0～2.0μmol/L内引物FIP/BIP、0.5～1.5μmol/L环引物LF/LB以及含3％～6％海藻糖(w/v)、0.01％～0.1％甘氨酸(w/v)、0.1％～1％牛血清白蛋白的冻干复合保护剂，余量为无菌超纯水。5.根据权利要求3所述的干粉化LAMP快速检测试剂盒，其特征在于：复溶液含有2～9mmol/LMgSO4、8～12mmol/LKCl、15～20mmol/LTris-HCl、8～12mmol/L(NH4)2SO4、0.1～0.3％TritonX-100以及0.5～1.5mol/L甜菜碱。6.根据权利要求3所述的干粉化LAMP快速检测试剂盒，其特征在于：显色液由...

【专利技术属性】
技术研发人员：万强，吴清平，周杨，卢勉飞，曲晓莹，容艳芬，蔡芷荷，
申请(专利权)人：广东环凯微生物科技有限公司，广东粤微食用菌技术有限公司，广东环凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44