一种水稻愈伤组织特异高表达启动子的鉴定及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种从水稻中克隆的愈伤组织特异高表达启动子，及该启动子在调控筛选标记基因在水稻遗传转化中的应用。该启动子的核苷酸序列是具有如下1)或2)或3)特征的DNA分子：1)由序列表中序列1所示的DNA片段；2)与1)限定的DNA序列在严格杂交条件下能够杂交的DNA片段；3)与1)限定的DNA序列至少具有90％以上同源性且具有能调控目的基因在水稻愈伤组织中特异表达的DNA片段。应用本发明专利技术启动子控制筛选标记基因在水稻愈伤组织中表达，可以高效地筛选转基因水稻，能完全替代组织型强启动子在转化子筛选中的作用，同时能减少转基因筛选标记基因对生物安全带来的潜在风险，对提高转基因水稻的生物安全性具有重要意义。

Identification and application of a high specific expression promoter for rice callus

The present invention provides a specific high expression promoter of callus from rice, and the application of the promoter in regulating the genetic transformation of rice in rice. The nucleotide sequence of the promoter is the DNA molecule with the following 1 or 2) or 3 characteristics: 1) the DNA sequence defined by the sequence table 1 shows the DNA fragment; 2) and 1) the DNA sequence which is hybridized under the strict hybridization condition; 3) and 1) the DNA sequence has at least 90% homology and has the ability to regulate the target gene in rice. The specific expression of DNA fragment in the injured tissue. Using the promoter to control the expression of the screening marker gene in the rice callus, it can efficiently screen the transgenic rice, and can completely replace the role of the strong tissue type promoter in the transformant screening, at the same time, it can reduce the potential risk of the transgenic screening marker gene to biological safety and improve the transgenic rice. Biological safety is of great significance.

【技术实现步骤摘要】
一种水稻愈伤组织特异高表达启动子的鉴定及应用
本专利技术涉及一种水稻愈伤组织特异性高表达启动子的克隆鉴定及其应用于转基因选择标记表达的方法。属于植物分子生物
技术背景植物的生长发育受到基因表达的精确调控，启动子通过与转录因子的相互作用在特定的组织中调控基因在合适的时间进行表达或关闭，不同基因表达的强弱程度也受到启动子的调控，因此启动子序列与基因的编码序列同样重要。根据基因表达的调控方式，启动子可以分为组成型启动子，即在所有或大多数的组织中均能表达；时空特异型启动子，即在特定的生长阶段或组织中进行表达；诱导型启动子，即在外界物理或化学信号刺激时表达。组成型启动子如：烟草花叶病毒(CaMV)的35S启动子、水稻的Actin1启动子和玉米的Ubiquitin1启动子，这些启动子早已广泛应用于植物的基因工程研究中，用于目标基因的过量表达，如抗除草剂基因等。但是越来越多的实验证明，在植物的遗传转化中运用组织特异表达的启动子控制目标基因的表达能更有效的避免使用组成型启动子带来的潜在负作用，如能减少组成型表达增加的代谢负担，降低转基因食品安全风险及对与环境的不良影响，以及重复使用相同启本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的水稻愈伤组织特异性高表达的启动子，其具有如下核苷酸序列之一：1)序列表中序列1所示的DNA序列；2)在严格条件下与1)限定的DNA序列能够杂交且具有相同功能的DNA序列；3)与1)限定的DNA序列至少具有90％以上的同源性且具有相同功能的DNA序列。

【技术特征摘要】
1.分离的水稻愈伤组织特异性高表达的启动子，其具有如下核苷酸序列之一：1)序列表中序列1所示的DNA序列；2)在严格条件下与1)限定的DNA序列能够杂交且具有相同功能的DNA序列；3)与1)限定的DNA序列至少具有90％以上的同源性且具有相同功能的DNA序列。2.根据权利要求1所述的启动子，其核苷酸序列如表中序列1所示。3.根据权利要求1或2所述的启动子的表达载体、宿主菌或转基因株系。4.启动筛选标记基因在水稻愈伤组织中表达的方法，其包括以下步骤：(1)将权利要求1或2所述的启动子插入植物表达载体的选择标记基因上游，得到重组质粒；(2)将所得重组质粒通过农杆菌介导的方法转...

【专利技术属性】
技术研发人员：周洁，王栩鸣，杨勇，余初浪，程晔，严成其，陈剑平，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，宁波大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33