The present invention relates to a variant of the isolated lipase, which are located at one or more locations of the mature polypeptide corresponding to the SEQ ID NO:2 I86D, E, N, Q, E87C, I90D, E, Q, and N92D, and include the substitution of the lipase activity. In some embodiments, the present invention relates to isolated polynucleotides that encode these variants; nucleic acid constructs containing these polynucleotides, carriers, and host cells; methods for producing these variants; and compositions containing these variants. The invention also relates to a method for obtaining lipase variants, a cleaning method, and a use of lipase variants for cleaning.
【技术实现步骤摘要】
脂肪酶变体以及编码其的多核苷酸本申请是基于申请日为2013年3月22日，优先权日为2012年4月2日，申请号为201380017421.9，专利技术名称为“脂肪酶变体以及编码其的多核苷酸”的专利申请的分案申请。序列表的引用本申请包括一个计算机可读形式的序列表，将其通过引用结合在此。专利技术背景专利
本专利技术涉及脂肪酶变体、编码这些变体的多核苷酸、产生这些变体的方法以及使用这些变体的方法。相关技术说明脂肪酶被包括在洗涤剂组合物中以提高洗涤性能并且特别用以改进脂质污物去除。除其他之外，助洗剂也被包括在洗涤剂组合物中，其目的是用于降低钙浓度，这是由于钙沉积可以导致被处理表面的“泛灰”。低水平的钙可以显示导致脂肪酶活性的降低。在许多脂肪酶中的催化位点被盖结构域(盖区域或盖)掩盖，并且研究已经指示该盖对于脂肪酶活性是重要的并且具有激活脂肪酶的作用。在水/脂质界面的存在下增强的催化活性称为“界面激活”，并且描述了两亲表面环即盖与界面接触时打开时的情形。舒(Shu)等人在《酶与微生物技术》48(2011)129-133中生成了四个黑曲霉脂肪酶(ANL)突变体，其中一个没有...
【技术保护点】
一种脂肪酶变体，该脂肪酶变体在对应于SEQ ID NO：2的成熟多肽的位置I86D,E,N,Q、E87C、I90D,E,Q、以及N92D,E,Q的盖螺旋中的一个或多个位置处包括取代，其中该变体具有脂肪酶活性。
【技术特征摘要】
2012.04.02 EP 12162804.41.一种脂肪酶变体，该脂肪酶变体在对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置I86D,E,N,Q、E87C、I90D,E,Q、以及N92D,E,Q的盖螺旋中的一个或多个位置处包括取代，其中该变体具有脂肪酶活性。2.如权利要求1所述的变体，该变体是一种选自下组的亲本脂肪酶的变体，该组由以下各项组成：a.与SEQIDNO：2或3的成熟多肽具有至少60％的序列一致性的一种多肽；b.一种由多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸在低严谨度条件下与(i)SEQIDNO：1的成熟多肽编码序列，或(ii)(i)的全长互补体杂交；c.一种由多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQIDNO：1的成熟多肽编码序列具有至少60％的一致性；以及d.SEQIDNO：2或3的成熟多肽的一个片段，该片段具有脂肪酶活性。3.如权利要求1-2中任一项所述的变体，该变体与SEQIDNO：2或3的成熟多肽具有至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但小于100％的序列一致性。4.如权利要求1-3中任一项所述的变体，其中改变的数目是1-20个，例如1-10个和1-5个，如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、19个或20个改变。5.如权利要求1-4中任一项所述的变体，该变体包括在对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置86的位置处的取代。6.如权利要求5所述的变体，其中该取代是用Asn、Asp、Gln、或Glu的取代。7.如权利要求1-4中任一项所述的变体，该变体包括在对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置87的位置处的取代。8.如权利要求7所述的变体，其中该取代是用Cys的取代。9.如权利要求1-4中任一项所述的变体，该变体包括在对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置90的位置处的取代。10.如权利要求9所述的变体，其中该取代是用Asp、Gln、或Glu的取代。11.如权利要求1-4中任一项所述的变体，该变体包括在对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置92的位置处的取代。12.如权利要求11所述的变体，其中该取代是用Asp、Gln、或Glu的取代。13.如权利要求1-12中任一项所述的变体，该变体包括在两个位置处的取代，这两个位置对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置I86D,E,N,Q、E87C、I90D,E,Q、以及N92D,E,Q中的任何。14.如权利要求1-12中任一项所述的变体，该变体包括在三个位置处的取代，这三个位置对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置I86D,E,N,Q、E87C、I90D,E,Q、以及N92D,E,Q中的任何。15.如权利要求1-12中任一项所述的变体，该变体包括在对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置I86D,E,N,Q、E87C、I90D,E,Q、以及N92D,E,Q的每个位置处的取代。16.如权利要求1-15中任一项所述的变体，该变体包括对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的选自下组的位置的一个或多个取代，该组由以下各项组成：D62C；S83T；R84G；I86P；E87T,A,Q；W89L；G91L,A；L93T；N94D,S；F95Y；D96T,I；L97P,F；K98Q,D,T。17.如权利要求1-16中任一项所述的变体，该变体包括对应于SEQIDNO：2的成熟多肽的位置的任何以下取代组或由其组成：a)S83T+R84G+I86D+E87T+W89L+I90Q+G91L+N92D+L93T+F95Y+D96T+K98T；b)S83T+E87T+G91L+N92D+F95Y+D96T+L...
【专利技术属性】
技术研发人员：J思克乔德乔尔根森，J文德，A斯文德森，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK
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