The invention discloses a method for designing cervical anti wound dressings resisting HPV. The dressings are based on the international colleagues' research on the function of SERPINA3 and IFN kappa and the fusion proteins designed by our laboratory for the study of the properties of these two proteins. The specific method is to use the overlap extension PCR technique to obtain the gene fragment of the fusion protein SERPINA3, IFN SERPINA3 kappa, which is covalently linked to the SERPINA3 of the amino acid sequence linker and the IFN binding kappa. The target gene was cloned into the prokaryotic expression vector Pet30 and expanded, and the three element fusion protein MBP SERPINA3 IFN SERPINA3 kappa could be obtained over 90% of the purity by MBP column affinity chromatography. We tested the inhibitory effect of the fusion protein on the replication of HSV 1 virus at both cellular and mouse levels. It is proved that the fusion protein is easy to purify, highly active, and has no side effects. It is very suitable for cervical HPV wound dressing.
【技术实现步骤摘要】
基于三元融合蛋白的抗HPV宫颈护创敷料设计所属
:本专利技术属于生物工程领域,具体涉及到分子克隆,蛋白质表达纯化,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),实时荧光定量PCR,小鼠皮肤创伤模型,病毒感染等技术。
技术介绍
:HPV病毒(HumanPapillomaVirus),又称为人乳头瘤病毒,是宫颈癌的元凶。它是一种DNA病毒,人类是HPV唯一的宿主。HPV进入机体皮肤粘膜后,主要潜伏于表皮内基底细胞间,一旦时机成熟它就会致病。临床上90%以上的宫颈癌是由十几种高危型HPV病毒引起的,其中最为危险的是HPV16型和18型。根据美国的调查数据,有26.8%女性会感染一种或多种HPV病毒,而感染了高危型的则占15.2%。在中国,也有相似的感染率,且随着近年性生活态度的改变,在年轻一代中HPV的感染率有快速上升的趋势。HPV通过密切的皮肤接触感染。80%感染者可以用1-2年的时间,通过机体的免疫能力将其清除。不能清除而持续感染者,发展为宫颈癌前病变的可能性大大增加。目前科学家已证明了经性生活传染的HPV病毒是引起宫颈癌的主要病因。近年来由于大多数患者对HPV疾病认识不足,导致其发病率及复发率持续增长,但相应的治疗手段却很不完善。目前治疗HPV的方法虽多,但普遍使用传统的治疗手段:如手术、激光、外涂药物等,其目的都只是去掉临床肉眼可见疣体,却难以解决亚临床及潜伏感染的问题,造成治标不治本致使反复发作。目前虽然已有HPV疫苗进入临床使用,但并没有得到广泛的推广,在人群中接种率很低。而且疫苗只能针对几种亚型,难以覆盖目前感染人类的十几种HPV病毒。疫苗也没有治疗的效 ...
【技术保护点】
一种针对HPV的宫颈护创敷料设计的方法。其特征在于针对HPV难清除,易复发的难题,并且基于蛋白的性质设计了带有MBP标签的融合蛋白MBP‑SERPINA3‑IFN‑κ,该融合蛋白均一性好,易于纯化,活性高,无副作用,非常适合作为抗HPV的宫颈护创敷料。
【技术特征摘要】
1.一种针对HPV的宫颈护创敷料设计的方法。其特征在于针对HPV难清除,易复发的难题,并且基于蛋白的性质设计了带有MBP标签的融合蛋白MBP-SERPINA3-IFN-κ,该融合蛋白均一性好,易于纯化,活性高,无副作用,非常适合作为抗HPV的宫颈护创敷料。2.根据权利要求1所述的抗HPV的宫颈护创敷料设计,其特征在于使用SERPINA3和IFN-κ两种活性蛋白。3.根据权利要求1所述的抗HPV的宫颈护创敷料设计,其特征在于融合蛋白中SERPINA3在前IFN-κ在后的设计顺序。4.根据权利要求1所述的抗HPV的宫颈护创敷料设计,其特征在于连接SERPIN...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘新奇,冀旺盛,宾亮华,
申请(专利权)人:南开大学,
类型:发明
国别省市:天津,12
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