一种药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种药物组合物及其应用，所述药物组合物包括携带化学遗传基因的腺相关病毒和/或激活化学遗传基因的药物。本发明专利技术通过构建携带化学遗传基因的腺相关病毒并感染小鼠，靶向作用于骨髓腔内TH阳性神经元细胞，用药物激活能够特异性抑制神经元细胞的去甲肾上腺素分泌，达到安全有效且长时间的抑制交感神经并增加骨量的目的。本发明专利技术提供的药物组合物及其应用安全稳定、高效便捷，对神经细胞没有毒性，作用效果显著，具有巨大的应用前景和市场价值。

A drug composition and its application

The invention discloses a drug composition and its application, the pharmaceutical composition including a adeno-related virus carrying chemical genetic genes and / or a drug that activates a chemical genetic gene. By constructing the adeno-related virus carrying chemical genetic genes and infecting mice, the target is targeted to the TH positive neuron cells in the bone marrow, which can specifically inhibit norepinephrine secretion in neuron cells by drug activation, so as to achieve a safe, effective and long time inhibition of sympathetic nerve and increase bone mass. The drug composition provided by the invention is safe, stable, efficient and convenient, has no toxicity to the nerve cells, and has significant effect, and has great application prospect and market value.

【技术实现步骤摘要】
一种药物组合物及其应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种药物组合物及其应用。
技术介绍
交感神经是外周神经系统中一类重要的神经类型，交感神经的功能对于机体正常代谢的运转和腺体激素分泌的控制都发挥重要作用。由脊髓发出的神经纤维到交感神经节，再由此发出纤维分布到内脏、心血管和腺体。人体在正常情况下，功能相反的交感和副交感神经处于相互平衡制约中。当机体处于紧张活动状态时，交感神经活动起着主要作用。交感神经的初级节前神经元位于脊髓的胸腰部(thorako-lumbalesSystem)。这些神经节互连成干，被称为“交感神经干”。节后神经元继续传递信号到目标器官，并使用神经递质去甲肾上腺素。但一些交感神经纤维没有换元就离开交感神经干，到达主动脉的椎前神经节，或者到达受支配器官的器官旁神经节。在骨髓腔中有大量的交感神经末梢，交感神经的重要功能同其末梢释放的神经递质去甲肾上腺素密切相关，交感神经节后神经纤维释放的神经递质是去甲肾上腺素，去甲肾上腺素是非常重要的一类神经递质，可以通过与效应器上不同的受体结合而产生兴奋和抑制作用，这些受体分为两类，一类是α型肾上腺素受体(α-adrenergi本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括携带化学遗传基因的腺相关病毒和/或激活化学遗传基因的药物。

【技术特征摘要】
1.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括携带化学遗传基因的腺相关病毒和/或激活化学遗传基因的药物。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的化学遗传基因为hM4Di；优选地，所述激活化学遗传基因的药物为叠氮平-N-氧化物溶液。3.一种如权利要求1或2所述的药物组合物用于制备增加骨量的药物。4.一种用于非治疗目的的增加骨量的方法，其特征在于，采用如权利要求1或2所述的药物组合物，具体包括如下步骤：(1)构建携带化学遗传基因的腺相关病毒；(2)将步骤(1)得到的腺相关病毒感染TH神经元细胞，进行验证并标记胞体位置；(3)将步骤(1)得到的腺相关病毒感染小鼠骨髓，再在腹腔注射叠氮平-N-氧化物溶液。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述腺相关病毒的构建方法如下：(1’)构建质粒：将化学遗传基因、红色荧光基因和神经细胞特异性启动子构建在pAAV质粒上，得到pAAV-synDIO-hM4Di-mCherry；(2’)转染细胞：将步骤(1’)得到的质粒与腺相关病毒的病毒包装质粒pHelper和pAAV-RC9共转293FT细胞；(3’)收获病毒：转染后20-30h，优选24h换液，换液后12-20h，优选16h进行超速离心破膜，将破膜后悬液通过20％的蔗糖滤柱，收集上清，得到所述腺相关病毒。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2’)所述共转的转染试剂浓度为每200000个细胞用5-8mg/L的脂质体，优选为6mg/L的脂质体；优选地，步骤(3’)所述离心的转速为4000-6000g，优选为5000g；优选地，步骤(3’)所述换液后的培养液为含有丙酮酸钠的DMEM；优选地，所述丙酮酸钠的浓度为4-8mM，优选为5mM。7.根据权利要求4-6中任一项所述的方法，其特征在于，还包括计算所述腺相关病毒的滴度的步骤；优选地，所述腺相关病毒滴度为(1-3)×1012TU/mL，优选为1×1012TU/mL。8.根据权利要求4-7中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述腺相关病毒的感染浓度为细胞个数：病毒个数＝1:(400-600)，优选为1:500；优选地，步骤(2)所述神经元细胞为TH-cre转基因小鼠骨髓内TH神经元细胞；优选地于，步骤(2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：高大双，杨帆，刘运辉，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44