基于纳米粒子的肝靶向疗法和成像制造技术

本发明专利技术提供一种纳米粒子，其包含：包含金属和/或半导体的核心；和多种共价连接至所述核心的配体，其中所述配体包含：至少一种肝靶向配体；至少一种包含生物活性剂的有效载荷配体；和至少一种包含碳水化合物的稀释配体。还提供了包含所述纳米粒子的药物组合物，其医学用途，包括肝癌的治疗和成像，和用于产生所述纳米粒子的方法。

Nanoparticle based liver targeting therapy and imaging

The invention provides a nanoparticle, which comprises: contains the core metal and / or semiconductor; and various ligands covalently attached to the core, wherein the ligand comprises at least one liver targeting ligand; at least one containing bioactive agent payload ligands; and at least one contains carbohydrate dilution ligand. A pharmaceutical composition containing the nanoparticles is also provided, and its medical uses include the treatment and imaging of liver cancer, and the method for producing the nanoparticles.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于纳米粒子的肝靶向疗法和成像专利
本专利技术涉及作为用于将试剂靶向递送至具体组织类型或位置的媒剂、尤其用于医学的纳米粒子，并且包括用于如肝癌等肝病症的治疗的方法。还公开了药物组合物、用于所述纳米粒子的产生的方法和其使用方法。专利技术背景本专利技术针对组合物和产品，和制造和施用所述组合物和产品的方法，包括用于哺乳动物并且尤其人类的治疗。药物递送提出了数种显著挑战，尤其关于作用位点。在治疗某些肿瘤的情况下，例如，仍需要能够使抗癌药物靶向肿瘤位点，同时使脱靶效应最小化的递送系统。原发性肝癌是全球第六种最常见的癌症并且是癌症死亡的第二大原因。最常见的肝癌是肝细胞癌(HCC)，占所有原发性肝癌的大约75％。HCC由变成恶性的肝细胞形成。B型肝炎、C型肝炎、黄曲霉毒素B1和滥用酒精是造成大约80％的人类HCC的四种因素。因此，如脂肪肝炎、纤维化和肝硬化等潜在疾病通常使常规HCC疗法复杂化。目前，如果肿瘤可切除，那么手术切除是HCC的主要治疗选项。然而，仅10-20％的HCC可使用手术完全地去除。因此，靶向药物递送由于获批的化学治疗剂的功效改进和减少的其副作用而受到主要关注(ShiB.等人,J.Histochem.Cytochem.,2013,第61卷,第901-909页)。WO0232404描述了碳水化合物偶合(包括乳糖偶合)的金纳米粒子。WO2014/125256描述了用于使生物活性剂靶向中枢神经系统(CNS)，例如用于治疗CNS病症的纳米粒子递送系统。Garg等人,AAPSPharmSciTech,2013,第14卷,第3期,第1219-1226页描述了用于将荧光香豆素衍生物细胞内递送至肝细胞的经过乳糖表面改质的金纳米媒剂。Penadés等人,Chem.Eur.J.,第9卷,第1909-1921页描述了荧光糖纳米粒子的合成。Penadés等人,CarbohydrateResearch,第344卷,第1474-1478页描述了评估配体密度和呈现对于使用乳糖官能化的金纳米粒子识别蛋白受体的影响的研究。Penadés等人,Chem.Bio.Chem.,第5卷,第291-297页描述了调查提供乳糖的糖纳米粒子减少实验性转移的进展的用途的研究。关于其它纳米粒子递送系统和关于将生物活性和/或可检测试剂递送至受试者中的具体组织或位置的方法，包括关于原发性肝癌的靶向治疗仍存在未满足的需要。本专利技术解决了这些和其它需要。专利技术简述广泛说来，本专利技术涉及具有肝靶向部分和有效载荷的纳米粒子，所述纳米粒子适用作用于将所述有效载荷递送至肝(包括肝的患病细胞)的媒剂。所述有效载荷可包含一种或多种分别用于治疗和/或成像应用的生物活性剂和/或可检测试剂。本专利技术人已经意外地发现其中乳糖配体经由形式乳糖-(OCH2CH2)m-(CH2)n-SH的相对长连接体共价连接至金核心的纳米粒子展现体内和体外靶向肝细胞。本文实施例中提供的证据表明了乳糖长连接体金纳米粒子(GNP)与在肝细胞上表达的无唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)相互作用。不希望受任何特定理论束缚，本专利技术人相信最接近核心的相对刚性(烷基)连接体部分与最接近乳糖基团的相对柔性(乙二醇)连接体部分的组合提供了用于与ASGPR相互作用并且最终用于将药物有效载荷递送至肝的有利配体布置。此外，本专利技术人已经发现了某些磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽当共价连接至纳米粒子核心时用于使纳米粒子靶向肝细胞癌细胞，例如相对于基础纳米粒子的7倍靶向，并且可对具有例如美登素类DM4化学治疗性有效载荷的纳米粒子提供肝靶向功能。因此，在第一方面，本专利技术涉及一种纳米粒子，其包含：包含金属和/或半导体的核心；和多种共价连接至所述核心的配体，其中所述配体包含：(i)至少一种肝靶向配体；(ii)至少一种包含生物活性剂和/或可检测试剂的有效载荷配体；和(iii)至少一种包含碳水化合物的稀释配体。因此，在一个相关第一方面，本专利技术可提供一种纳米粒子，其包含：包含金属和/或半导体的核心；和多种共价连接至所述核心的配体，其中所述配体包含：(iv)至少一种肝靶向配体；(v)至少一种包含生物活性剂的有效载荷配体；和(vi)至少一种包含碳水化合物的稀释配体。在一些情况下，所述肝靶向配体可选自：乳糖、FGF-4(成纤维细胞生长因子4)、c-Met(肝细胞生长因子受体)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合剂(例如，如US8388937所公开的磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽，尤其如其中所公开的SEQIDNO:1或10，或抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3抗体)、α-胎蛋白(AFP)受体结合剂(例如，如US2012/0270238所公开的AFP受体结合肽或抗AFP受体抗体)和ASGPR结合剂(例如半乳糖、N-乙酰基半乳糖胺、乳糖、葡萄糖、甘露糖，或糖模拟配体，如Mamidyala等人,J.Am.Chem.Soc.,2012,第1334卷,第4期,第1978-1981页所公开)。所述肝靶向配体也可为抗体或其结合片段，例如Fab片段(抗原结合片段)、单一结构域抗体/针对如磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、ASGPR、FGF-4、c-Met、AFP或其它肝表达蛋白或肝表达受体等肝或肝细胞标靶的纳米抗体。在一些情况下，所述肝靶向配体可包含磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽，其包含如SEQIDNO:1或2所陈述的氨基酸序列的肽或由所述肽组成；或为与所述氨基酸序列的不同之处在于不超过3个氨基酸的缺失、添加、修饰或取代的其变体，其中所述变体保持SEQIDNO1或2的肽与人类磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的结合亲和力的至少50％。结合亲和力可例如在竞争结合分析中确定，其中所述变体肽与SEQIDNO:1或2的肽竞争结合于人类磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3多肽。在某些情况下，所述磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3肽具有N端乙酰化和/或C端酰胺化。在一些情况下，所述肝靶向配体(例如乳糖或磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽)可经由连接体共价连接至纳米粒子核心(例如，金核心)。在一些情况下，所述肝靶向配体可经由第一连接体宫颈癌连接至核心，所述第一连接体具有2至50个原子的链长。具体说来，所述第一连接体可包含基团-(CH2)n-和/或-(OCH2CH2)m-，其中n和m独立地≥1。在某些情况下，所述第一连接体包含–(OCH2CH2)m-，其中m在1与10之间，例如其中m在范围5至9中，例如m为8。在某些情况下，所述第一连接体包含-(OCH2CH2)m-(CH2)n-，其中m＝1至0且n＝1至15。具体说来，m可在范围3至7中，和/或n可在范围5至12中。在一些情况下，所述至少一种肝靶向配体和所述第一连接体可选自由以下组成的组：HS-(OCH2CH2)8-CONH-RLNVGGTYFLTTRQ(SEQIDNO:1)；HS-(OCH2CH2)8-CONH-RLNVGGTYFLTTRQ-NH2(SEQIDNO:1)；HS-(OCH2CH2)8-CONH-YFLTTRQ(SEQIDNO:2)；HS-(OCH2CH2)8-CONH-YFLTTRQ-NH2(SEQIDNO:2)；HS-(OCH2CH2)6-NH(Ac)-RLNVGGTYFLTTRQ(SEQIDNO:1)；和HS-(OCH2CH2)6-NH(Ac)-YFLTTRQ(SEQIDNO:2)。在一些情况本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纳米粒子，其包含：包含金属和/或半导体的核心；和多种共价连接至所述核心的配体，其中所述配体包含：(i)至少一种肝靶向配体；(ii)至少一种包含生物活性剂的有效载荷配体；和(iii)至少一种包含碳水化合物的稀释配体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.24 GB 1513103.01.一种纳米粒子，其包含：包含金属和/或半导体的核心；和多种共价连接至所述核心的配体，其中所述配体包含：(i)至少一种肝靶向配体；(ii)至少一种包含生物活性剂的有效载荷配体；和(iii)至少一种包含碳水化合物的稀释配体。2.根据权利要求1所述的纳米粒子，其中所述肝靶向配体是选自：乳糖、半乳糖、N-乙酰基半乳糖胺或其它无唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)结合剂；磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合剂；α-胎蛋白(AFP)受体结合剂；FGF-4(成纤维细胞生长因子4)；c-Met(肝细胞生长因子受体)；和特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、ASGPR、FGF-4、c-Met或AFP的抗体或其结合片段。3.根据权利要求1或权利要求2所述的纳米粒子，其中所述肝靶向配体包含磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽或乳糖。4.根据权利要求3所述的纳米粒子，其中所述磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽包含氨基酸序列RLNVGGTYFLTTRQ(SEQIDNO:1)或YFLTTRQ(SEQIDNO:2)的肽或由所述肽组成，或为其变体，与所述氨基酸序列的不同之处在于不超过3个氨基酸的缺失、添加、修饰或取代，其中所述变体保持所述SEQIDNO1或SEQIDNO:2的肽与人类磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的结合亲和力的至少50％。5.根据权利要求4所述的纳米粒子，其中所述磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3肽具有N端乙酰化和/或C端酰胺化。6.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述肝靶向配体经由第一连接体共价连接至所述核心，所述第一连接体具有2至50个原子的链长。7.根据权利要求6所述的纳米粒子，其中所述第一连接体包含基团-(CH2)n-和/或-(OCH2CH2)m-，其中n和m独立地≥1。8.根据权利要求7所述的纳米粒子，其中所述第一连接体包含–(OCH2CH2)m-，并且其中m在1与10之间，任选地其中m为8。9.根据权利要求8所述的纳米粒子，其中所述至少一种肝靶向配体和所述第一连接体选自由以下组成的组：HS-(OCH2CH2)8-CONH-RLNVGGTYFLTTRQ；HS-(OCH2CH2)8-CONH-RLNVGGTYFLTTRQ-NH2；HS-(OCH2CH2)8-CONH-YFLTTRQ；HS-(OCH2CH2)8-CONH-YFLTTRQ-NH2；HS-(OCH2CH2)6-NH(Ac)-RLNVGGTYFLTTRQ；和HS-(OCH2CH2)6-NH(Ac)-YFLTTRQ。10.根据权利要求7所述的纳米粒子，其中所述第一连接体包含-(OCH2CH2)m-(CH2)n-，其中m＝1至10且n＝1至15。11.根据权利要求10所述的纳米粒子，其中m＝3至7且n＝5至12。12.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述第一连接体经由末端硫原子结合于所述核心。13.根据权利要求7所述的纳米粒子，其中所述经由所述第一连接体共价连接至所述核心的肝靶向配体具有式(I)的结构：其中所述第一连接体经由末端硫醇基结合于所述核心。14.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述至少一种有效载荷配体包含治疗剂。15.根据权利要求14所述的纳米粒子，其中所述治疗剂为化学治疗或细胞毒性化合物。16.根据权利要求15所述的纳米粒子，其中所述有效载荷配体包含选自由以下组成的组的化合物：美登素类DM4、多柔比星、伊立替康、铂(II)、铂(IV)、替莫唑胺、卡莫司汀、喜树碱、多西紫杉醇、索拉非尼、美登素美登素、美登素类DM1、一甲基澳瑞他汀E(MMAE)和帕比司他。17.根据权利要求16所述的纳米粒子，其中所述有效载荷配体包含美登素类DM4、MMAE或多柔比星。18.根据权利要求15所述的纳米粒子，其中所述有效载荷配体是选自：19.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述纳米粒子进一步包含至少一种包含可检测标记的其它有效载荷配体。20.根据权利要求19所述的纳米粒子，其中所述可检测标记包含荧光标记或光声染料。21.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述至少一种稀释配体包含单糖。22.根据权利要求21所述的纳米粒子，其中所述单糖为葡萄糖或半乳糖。23.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述至少一种稀释配体经由第三连接体共价结合于所述核心。24.根据权利要求23所述的纳米粒子，其中所述第三连接体具有2至10个原子的链长。25.根据权利要求24所述的纳米粒子，其中所述第三连接体包含-(CH2)n-，其中n＝2至3。26.根据权利要求25所述的纳米粒子，其中所述第三连接体经由末端硫原子结合于所述核心。27.根据前述权利要求中任一项所述的纳米粒子，其中所述至少一种经由所述第三连接体共价连接至所述核心的稀释配体具有式1、2、3、4或5的结构：其中所述第三连接体经由末端硫醇基结合于所述核心。28.根据权利要求1所述的纳米粒子，其中所述多种配体包含：含乳糖配体或磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3结合肽；含多柔比星配体或美登素类DM4配体；和包含半乳糖或葡萄糖的单糖配体。29.根据前述权利要求中任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·G·巴黎安多斯，E·D·T·多明盖斯，
申请(专利权)人：MIDA科技有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB