一种高效动物肌腱粉碎方法技术

本发明专利技术公开了一种简便可行的跟腱类粉碎、除油脂方法，经该法粉碎得到的跟腱类粉末适宜于提取胶原蛋白，且胶原蛋白保持完整的三螺旋结构，可用于制备胶原蛋白海绵及胶原蛋白相关产品。该方法主要步骤：将富含胶原蛋白的动物跟腱机械去除筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗，冷冻。取出冷冻硬化后的动物跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。将跟腱类薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片。将跟腱类薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得跟腱类混悬液。将跟腱类混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的跟腱类粉末。本发明专利技术所提供的粉碎方法简单易行，节能节电，生产效率高，适宜于工业化生产。

A method of crushing the tendon of high efficiency animal

【技术实现步骤摘要】
一种高效动物肌腱粉碎方法
本专利技术涉及生物技术、医疗器械、日用化工
，特别涉及动物肌腱粉碎方法方法及其应用。
技术介绍
胶原蛋白广泛存在于肌腱、韧带、软骨、皮肤、牙齿等动物结缔组织中，起着支撑器官，赋予组织机械强度，对细胞的分化、运动化趋向、结缔组织的修复起着重要作用。胶原蛋白以其天然的止血、低毒性、低抗原性、低免疫性、能引导细胞再生和与人体相容性较好等优点，而广泛应用于生物医学材料和临床医。由于肌腱组织韧性强，不作特殊处理，切片与粉碎困难，直接影响胶原蛋白的提取效率。由于跟腱类来源于动物，有少量油脂类存在，易产生乳化，不利于胶原蛋白的纯化处理。可采用丙酮、乙醇、正丁醇浸泡除脂，但操作方法繁琐、易污染环境、有机溶剂残留等缺陷。经多次研究观察，采用冷冻切片法易于将跟腱切成薄片，采用氯化钠溶液湿法粉碎法可以高效地将跟腱粉碎成所需的各类粒径大小的跟腱类粉末；此外，采用氯化钠溶液湿法粉碎法可以有效地将跟腱中的油脂除去。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有跟腱粉碎技术中的不足之处而提供一种高效粉碎技术，该粉碎技术节能、环保。本专利技术的目的也在于针对跟腱中的油脂除去而提供简便易行的除去方法，适宜于工业化大生产。为达到上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现。有效粉碎动物跟腱及除去跟腱中油脂的方法，主要包括以下步骤：步骤一，将富含胶原蛋白的动物跟腱机械去除筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗干净，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的动物跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将跟腱类薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将跟腱类薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得跟腱类混悬液。步骤五，将跟腱类混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的跟腱类粉末。上述方案中，在所述步骤五后，可将粉碎后的跟腱粉末常温干燥、减压干燥、冷冻干燥后包装，入库。也可将上述制备的胶原粉末经Co60照射灭菌，然后包装，入库。上述方案中，所述步骤一中，动物跟腱包括牛跟腱、猪跟腱、羊跟腱和马跟腱等任何动物跟腱中的任意一种或两种以上的组合物。上述方案中，所述步骤一中冷冻为零摄氏或零摄氏度以下冷冻，常见的为冰箱或冰柜零摄氏度冷冻、零下10摄氏度冷冻、零下20摄氏度冷冻、零下50摄氏度冷冻、零下80摄氏度冷冻。上述方案中，所述步骤一中冷冻为零摄氏或零摄氏度以下冷冻，也包括采用一些特殊液体或气体冷冻方法，如采用液氮快速冷冻方法。上述方案中，所述步骤一中冷冻为零摄氏或零摄氏度以下冷冻，冷冻时间可长可短，达到所需切片的硬度即可。上述方案中，所述步骤二中刀片为手术刀片或市场上所能见到的任何锋利器具。上述方案中，所述步骤四中，氯化钠溶液的浓度可达到过饱和浓度，常用的为0.9％的浓度。上述方案中，所述步骤五中，将跟腱类混悬液离心，离心指的是使用各种离心机、冷冻离心机，其离心速度从速100rpm到20000rpm以上均可。上述方案中，所述步骤五中，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的跟腱类粉末。水洗的程度可以用硝酸银溶液滴定水液，如产生氯化银絮状沉淀，则表示脱盐不干净，需要继续清洗。上述方案中，所述步骤五中，弃去盐液，得粉碎后的跟腱类粉末。如果没有离心机，也可直接采用过滤的程序，再经适宜的方法进行干燥，得到所需的跟腱类粉末。本专利技术的有益效果：生产成本低，劳动强度小，不污染环境，适宜于工业化生产；所制备的胶原粉末或混悬液有利于胶原蛋白的提取，并制备成以胶原蛋白为原材料的各种医疗器械、制剂、日化产品。附图说明图1是本专利技术所提供的制备方法中所制备的跟腱粉末图2是利用本专利技术制备的跟腱粉末经提取后所制备的胶原蛋白海绵(实验室小试样品)图3是利用本专利技术制备的跟腱粉末经提取后所制备的胶原蛋白海绵(车间中试放大生产所得样品)图4是利用本专利技术制备的跟腱粉末经提取后所制备的胶原蛋白液图5是利用本专利技术制备的跟腱粉末经提取后所制备的胶原蛋白敷料图6是利用本专利技术制备的牛跟腱粉末经提取后所得到的的胶原蛋白溶液的凝胶蛋白电泳图具体实施方式为了使本专利技术所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1。有效粉碎牛跟腱及除去牛跟腱中油脂的方法，主要包括以下步骤：步骤一，去除牛跟腱机械筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗干净，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的牛跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将牛跟腱薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将牛跟腱薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得牛跟腱混悬液。步骤五，将牛跟腱混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的牛跟腱蛋白粉末。本实施例1牛跟腱粉碎方法，简便高效，生产成本低，能够适用于大规模生产和广泛推广的特点。实施例2。有效粉碎羊跟腱及除去羊跟腱中油脂的方法，主要包括以下步骤：步骤一，去除羊跟腱机械筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗干净，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的羊跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将羊跟腱薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将羊跟腱薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得羊跟腱混悬液。步骤五，将羊跟腱混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的羊跟腱蛋白粉末。实施例3。有效粉碎马跟腱及除去马跟腱中油脂的方法，主要包括以下步骤：步骤一，去除马跟腱机械筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗干净，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的马跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将马跟腱薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将马跟腱薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得马跟腱混悬液。步骤五，将马跟腱混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的马跟腱蛋白粉末。实施例4。有效粉碎猪跟腱及除去猪跟腱中油脂的方法，主要包括以下步骤：步骤一，去除猪跟腱机械筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗干净，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的猪跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将猪跟腱薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将猪跟腱薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得猪跟腱混悬液。步骤五，将猪跟腱混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的猪跟腱蛋白粉末。实施例5。胶原蛋白液及胶原蛋白敷料的制备步骤一，按专利技术方法所制得的牛跟腱蛋白粉末放于稀酸溶液中，并向稀酸溶液中加入活性为适量的蛋白酶，然后于4～10℃下搅拌提取48～72小时后，得到提取液；本实施例中，稀酸可醋酸、柠檬酸、盐酸、枸橼酸，溶液的pH值≤3。本实施例中，酶可为胃蛋白酶、无花果酶；酶与跟腱比例1000∶1-10∶1。步骤三，对步骤二得到的提取液进行离心并收集上清液；步骤四，往步骤三所得的上清液中加入适量氯化钠溶液，上清液中即析出胶原蛋白，快速水洗析出的胶原蛋白，即得到高纯度的胶原蛋白；步骤五，将步骤四得到的高纯度的胶原蛋白用稀酸或水溶解，根据所制备产品的要求不同，调节适宜pH或本文档来自技高网...

【技术保护点】
动物跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，将富含胶原蛋白的动物跟腱机械去除筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的动物跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将跟腱类薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将跟腱类薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得跟腱类混悬液。步骤五，将跟腱类混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的跟腱类粉末。

【技术特征摘要】
1.动物跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，将富含胶原蛋白的动物跟腱机械去除筋膜、肌肉和脂肪后，用水或氯化钠溶液漂洗，冷冻。步骤二，取出冷冻硬化后的动物跟腱，用刀片刮去跟腱表面的残余筋膜，用切片机将跟腱切成薄片。步骤三，将跟腱类薄片卷成条状，冷冻变硬后再切薄片；步聚四，将跟腱类薄片放入到一定浓度的氯化钠溶液，用粉碎机或研磨机粉碎，即得跟腱类混悬液。步骤五，将跟腱类混悬液离心，弃去盐液，水洗残渣，离心，得粉碎后的跟腱类粉末。2.根据权利要求1所述的跟腱类粉碎方法，其特征在于：在所述步骤五后，可将粉碎后的跟腱粉末常温干燥、减压干燥、冷冻干燥后包装，入库。也可将上述制备的胶原粉末经Co60照射灭菌，然后包装，入库。3.根据权利要求1所述的跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：所述步骤一中，动物跟腱包括牛跟腱、猪跟腱、羊跟腱和马跟腱等任何动物跟腱中的任意一种或两种以上的组合物。4.根据权利要求1所述的跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：所述步骤一中冷冻为零摄氏或零摄氏度以下冷冻，常见的为冰箱或冰柜零摄氏度冷冻、零下10摄氏度冷冻、零下20摄氏度冷冻、零下50摄氏度冷冻、零下80摄氏度冷冻。5.根据权利要求1所述的跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：所述步骤一中冷冻为零摄氏或零摄氏度以下冷冻，也包括采用一些特殊液体或气体冷冻方法，如采用液氮快速冷冻方法。6.根据权利要求1所述的跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：所述步骤一、步骤二中冷冻为零摄氏或零摄氏度以下冷冻，冷冻时间可长可短，达到所需切片的硬度即可。7.根据权利要求1所述的跟腱类的粉碎、除油脂方法，其特征在于：所述步骤二中刀片为手术刀片或市场上所能见到的任何锋利器具。...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭新生，张智武，陈新亮，吴文静，许新佳，周艳芳，崔碧玲，
申请(专利权)人：浙江崇山生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33