一种检测砧木和接穗亲和力的方法技术

本发明专利技术提供了一种检测砧木和接穗亲和力的方法，将带有细胞程序性死亡基因/细胞分裂素基因和GFP信号的砧木和细胞程序性死亡基因/细胞分裂素基因和RFP信号的接穗培养到为三叶一心时，用嫁接刀按45度角切割后，通过激光共聚焦观察细胞分裂素和细胞程序性死亡基因所带的GFP或RFP的信号分布和强弱，分析砧木和接穗的伤口愈合，进而判断其亲和性；利用荧光蛋白信号的强弱分析砧木中带有荧光标记的细胞程序性死亡基因和细胞分裂素基因的表达情况。若砧木和接穗中细胞程序性死亡基因的信号弱，而且砧木和接穗中细胞分裂素基因的信号强，说明砧木和接穗的亲和性高；若砧木和接穗中细胞程序性死亡基因的信号强，而且砧木和接穗中细胞分裂素基因的信号弱，说明砧木和接穗的亲和性低。

【技术实现步骤摘要】
一种检测砧木和接穗亲和力的方法
本专利技术属于嫁接
，具体涉及一种检测砧木和接穗亲和力的方法。
技术介绍
荧光蛋白如绿色荧光蛋白GFP在蓝色波长范围的光线激发下，会发出绿色荧光，红色荧光蛋白RFP在紫外光的照射下会发出红光，在生物学中经常被用作报告基因。目前砧木和接穗之间的亲和力鉴定主要通过嫁接后植株的成活率以及接穗的生长情况和结果特性来判定。在分子水平上尚缺乏砧木和接穗亲和力评估的方法。本申请通过构建带有荧光蛋白报告基因的细胞分裂素基因和细胞程序性死亡基因载体，转入砧木和接穗，可以追踪伤口愈合过程中砧木和接穗的功能，分析其信号强弱，从而判定砧木和接穗的亲和性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种检测砧木和接穗亲和力的方法。该方法能从分子水平上评估砧木和接穗的亲和力，准确性高，方便实用。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案：一种检测砧木和接穗亲和力的方法，包括以下步骤：1）取同一种砧木两份：砧木1和砧木2，取同一种接穗两份：接穗1和接穗2；2）将带有细胞程序性死亡基因的GFP和RFP分别活化后转入农杆菌，然后将带有GFP信号的载体转入砧木1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测砧木和接穗亲和力的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）取同一种砧木两份：砧木1和砧木2，取同一种接穗两份：接穗1和接穗2；2）将带有细胞程序性死亡基因的GFP和RFP分别活化后转入农杆菌，然后将带有GFP信号的载体转入砧木1，带有RFP信号的载体转入接穗1，获得带有荧光信号的砧木1和接穗1；3）将带有细胞分裂素基因的GFP和RFP分别活化后转入农杆菌，然后将带有GFP信号的载体转入砧木2，带有RFP信号的载体转入接穗2，获得带有荧光信号的砧木2和接穗2；4）将待检测植物的砧木和接穗在基质中培养四周，苗子为三叶一心时，用嫁接刀按45度角切割后，砧木1和接穗1、砧木2和接穗2分别通过嫁接夹...

【技术特征摘要】
1.一种检测砧木和接穗亲和力的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）取同一种砧木两份：砧木1和砧木2，取同一种接穗两份：接穗1和接穗2；2）将带有细胞程序性死亡基因的GFP和RFP分别活化后转入农杆菌，然后将带有GFP信号的载体转入砧木1，带有RFP信号的载体转入接穗1，获得带有荧光信号的砧木1和接穗1；3）将带有细胞分裂素基因的GFP和RFP分别活化后转入农杆菌，然后将带有GFP信号的载体转入砧木2，带有RFP信号的载体转入接穗2，获得带有荧光信号的砧木2和接穗2；4）将待检测植物的砧木和接穗在基质中培养四周，苗子为三叶一心时，用嫁接刀按45度角切割后，砧木1和接穗1、砧木2和接穗2分别通过嫁接夹固定，在湿度为85%-90%的黑暗25℃环境下生长，之后逐渐增强光照降低湿度，保证伤口愈合；5）嫁接后每3天，通过激光共聚焦...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭容芳，徐涵，陈晓东，赖钟雄，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：福建,35