The invention relates to the application of the coding sequence of the NS31 gene, which belongs to the field of biotechnology, especially the activation of HSP70. The purpose of the invention is obtained using the encoding sequence of a protein can induce HSP70 transcription and expression of NS31 gene sequences, using NS31 recombinant plasmid pEGFP N1 NS31 in eukaryotic cells can be induced by heat shock protein HSP70 activator.
【技术实现步骤摘要】
活化转录HSP70的NS31基因的编码序列的应用
本专利技术涉及属于生物
,特别涉及活化转录HSP70的NS31基因的编码序列的应用。
技术介绍
热休克效应是生物体在受热条件下保守的应激反应之一,在哺乳动物细胞中,热休克诱导细胞膜,细胞骨架和细胞器结构与功能的改变,影响细胞死亡,细胞周期,基因的转录翻译以及DNA的复制和修复等生命过程。热休克蛋白(Heatshockproteins,HSPs)在受热,生理变化或小分子化合物刺激下被诱导转录表达;热休克蛋白HSP70家族在真核生物中高度保守,能够促进蛋白折叠,降解和跨膜转运,以及蛋白与蛋白的相互作用等。HSP70的抑制剂和活化剂可以应用于热休克蛋白的基础研究领域,也可应用于新药开发的领域;许多小分子化合物能够抑制或活化HSP70的转录表达,如Apoptozole抑制热激蛋白HSP70和Hsc70转录表达;TRC051384能通过HSF1的激活诱导HSP70表达等。中国专利技术专利申请公布号:CN102816792A(一种调控热休克蛋白70表达、数量及活性的方法及其应用),以RNA干扰技术,下调肿瘤细胞或组织中H ...
【技术保护点】
活化转录HSP70的NS31基因的编码序列的应用,其特征在于:(1)将载体pEGFP‑N1和NS31基因的编码序列分别利用Xho I/PstI限制内切酶进行双酶切,37℃,20‑30min,进行DNA纯化,T4连接酶16℃连接18‑20h,获得pEGFP‑N1‑NS31质粒;(2)用步骤(1)中获得pEGFP‑N1‑NS31质粒转染真核细胞中,够诱导热休克蛋白HSP70转录活化,同时不会对HSC70和HSP90转录水平产生影响。
【技术特征摘要】
1.活化转录HSP70的NS31基因的编码序列的应用,其特征在于:(1)将载体pEGFP-N1和NS31基因的编码序列分别利用XhoI/PstI限制内切酶进行双酶切,37℃,20-30min,进行DNA纯化,T4连接酶16℃连接18-20h,获得pEGFP-N1-NS31质粒;(2)用步骤(1)中获得pEGFP-N1-NS31质粒转染真核细胞中,够诱导热休克蛋白HSP70转录活化,同时不会对HSC70和HSP90转录水平产生影响。2.根据权利要求1所述的应用:其特征在于:所述步骤(1)中NS31基因的编码序列通过设计克隆引物进行RT-PCR从GCRV-JX01病毒感染的草鱼肾脏细胞中扩增出。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述克隆引物为:F:C...
【专利技术属性】
技术研发人员:吕利群,喻飞,王浩,李婉娟,王龙龙,孙皓,
申请(专利权)人:上海海洋大学,
类型:发明
国别省市:上海,31
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