The invention discloses a preparation method of the blend ion exchange membrane and a method for the application of the protein separation. The preparation comprises the following steps: N methyl pyrrolidone as the solvent, the sulfonated poly aryl ether ketone and preparation of polysulfone membrane casting solution for membrane material with isopropanol water solution as coagulation bath, preparation of blend film on non-woven fabric using scraper. Its application in isoelectric focusing electrophoresis system, device by ion exchange membrane is divided into a plurality of membrane chamber, three (hydroxymethyl) aminomethane buffer solution pH by automatic titration the membrane chamber pH value control in a certain gradient; using isoelectric point of different protein and biological molecules are different, will in different field conditions to different membrane protein separation chamber. The blend ion exchange membrane of the invention can make the purity of the product close to 100%.
【技术实现步骤摘要】
一种共混离子交换膜的制备和应用方法
本专利技术属于膜分离
,具体涉及一种共混离子交换膜的制备和应用方法。
技术介绍
等电聚焦电泳技术是蛋白质的高效分离技术,其原理是利用两性电解质在凝胶中创造一个pH梯度,同时利用蛋白质具有两性解离和等电点的特点,对蛋白质进行分离分析。蛋白质等电聚焦电泳技术分离效率高、分离富集同时完成等优点。等电聚焦薄膜电泳技术是利用离子交换膜将连续液相分割成数个膜室,通过控制膜室的pH形成梯度,从而在电场作用下达成分离效果。该技术可以对蛋白质及生物分子进行高效分离、富集,并保证蛋白质损失降低到最低程度。等电聚焦薄膜电泳技术的关键之一是离子交换膜的性能,膜的离子交换能力和孔径对分离效果影响显著。孔径过小,将降低膜通量,甚至截留蛋白质分子,从而降低分离效果;孔径过大,则难以控制膜室pH,难以达成分离效果。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供了一种共混离子交换膜的制备和应用方法。本专利技术的方法能够提高PH梯度的可调控性,有效地分离蛋白质,能够得到高纯度的产物。本专利技术公开了一种共混离子交换膜的制备和应用方法,涉及一种分离纯化蛋白质的共混离子交换膜及其分离装置,包括如下步骤:以N-甲基吡咯烷酮为溶剂,以磺化聚芳醚酮和聚砜为膜材料制备铸膜液,利用刮刀在无纺布上制备复合膜;分离装置由复合膜分割为四个膜室,以三(羟甲基)氨基甲烷为缓冲溶液,将四个膜室的PH值控制在一定梯度;分离腔的两侧分别设置有一电极室,其中一电极室内设置有一正电极,另一电极室内设置有负电极;在分离腔上设置有缓冲液输和样品进口和出口,通过酸碱自动滴定控制各膜室pH;实验过程中通 ...
【技术保护点】
一种共混离子交换膜的制备和应用方法,涉及一种分离纯化蛋白质的共混离子交换膜及其分离装置,包括如下步骤:以N‑甲基吡咯烷酮为溶剂,以磺化聚芳醚酮和聚砜为膜材料制备铸膜液,利用刮刀在无纺布上制备复合膜;分离装置由复合膜分割为四个膜室,以三(羟甲基)氨基甲烷为缓冲溶液,将四个膜室的PH值控制在一定梯度;分离腔的两侧分别设置有一电极室,其中一电极室内设置有一正电极,另一电极室内设置有负电极;在分离腔上设置有缓冲液输和样品进口和出口,通过酸碱自动滴定控制各膜室pH;实验过程中通过控制各膜室的pH,使不同等电点的蛋白质在电场作用下分开停留在两个不同膜室中,达成分离效果。
【技术特征摘要】
1.一种共混离子交换膜的制备和应用方法,涉及一种分离纯化蛋白质的共混离子交换膜及其分离装置,包括如下步骤:以N-甲基吡咯烷酮为溶剂,以磺化聚芳醚酮和聚砜为膜材料制备铸膜液,利用刮刀在无纺布上制备复合膜;分离装置由复合膜分割为四个膜室,以三(羟甲基)氨基甲烷为缓冲溶液,将四个膜室的PH值控制在一定梯度;分离腔的两侧分别设置有一电极室,其中一电极室内设置有一正电极,另一电极室内设置有负电极;在分离腔上设置有缓冲液输和样品进口和出口,通过酸碱自动滴定控制各膜室pH;实验过程中通过控制各膜室的pH,使不同等电点的蛋白质在电场作用下分开停留在两个不同膜室中,达成分离效果。2.根据权利要求1所述的一种共混离子交换膜的制备方法,其特征在于:所述的分离膜采用共混离子交换膜;铸膜液以N-甲基吡咯烷酮为溶剂,溶质分别为磺化聚芳醚酮和聚砜,质量分数分别为10%~15%,15%~10%;支撑层为无纺布,...
【专利技术属性】
技术研发人员:周政忠,陈莲花,郑涛,袁浩然,
申请(专利权)人:常州大学,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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