异荭草素在制备与胰岛素抵抗相关疾病中的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种异荭草素在制备与胰岛素抵抗相关疾病中的用途，本发明专利技术从葫芦巴中提取7种化合物，对这几种化合物进行活性研究，利用3T3‑L1细胞建立胰岛素抵抗(IR)模型，进一步从线粒体功能紊乱的层面对化合物降血糖活性进行深入的研究，探讨了7种化合物对糖尿病的预防和治疗机制，结果表明，本发明专利技术所述化合物能够抑制3T3‑L1细胞的分化，抑制脂滴积累，降低TG含量，并通过相关信号通路降低脂肪因子的转录水平，另外，所述化合物还通过降低细胞中ROS的水平，恢复3T3‑L1细胞线粒体膜电势，促进细胞中ATP的产生，防止线粒体DNA损伤，并促进线粒体的发生。

Isoorientin in preparation and use of insulin resistance related diseases

The present invention discloses a kind of isoorientin in the preparation and use of insulin resistance related diseases, the method of extracting the 7 compounds from the gourd in Bazhong, the research on the activity of these compounds, to establish insulin resistance using 3T3 L1 cell (IR) model, further from the mitochondrial dysfunction in compound reduction hypoglycemic activity of in-depth study, to explore the mechanism of prevention and treatment of diabetes mellitus, 7 compounds showed that the differentiation of the compounds of the invention can inhibit 3T3 L1 cells, inhibit the accumulation of lipid droplets, decrease the content of TG, and reduce the level of transcription, adipocytokines through signaling pathways in the compounds by reducing the level of ROS in cells, recovery of mitochondrial membrane L1 cell 3T3 potential, promote cell ATP, prevent the damage of mitochondrial DNA, and promote the development of mitochondria Students.

【技术实现步骤摘要】
异荭草素在制备与胰岛素抵抗相关疾病中的用途
本专利技术涉及活性化合物的筛选，特别是涉及异荭草素在制备与胰岛素抵抗相关疾病中的用途。
技术介绍
胡芦巴(Trigonellafoenum-graecumL.)是豆科、胡芦巴属、一年生草本植物，又名香豆子、香草儿等，主要分布在中国、印度、非洲北部等国家。胡芦巴作为一种药食同源的经济作物，具有悠久的药用和食用历史，在许多中国古籍药典中均有记载。《本草纲目》记载，胡芦巴对于治疗“寒湿脚气”、“小肠气痛”、“阴肿痛”、“气攻头痛”等疾病有显著的疗效。《嘉佑本草》记载：胡芦巴“主元脏虚冷气；得附子、硫黄治肾虚冷，腹胁胀满面色青黑；得怀香子、桃仁，治膀胱气”；《藏药志》中记载：“苦、温；治肺脓肿，并能止泻”。现代药理学对胡芦巴的成分及其主要活性进行了较为广泛的研究，研究结果发现胡芦巴含有多种活性成分，如油脂、胡芦巴胶、多糖、皂苷、黄酮、萜类、胡芦巴碱、香豆素、4-羟基异亮氨酸等。已有的研究结果表明，胡芦巴具有明确的降血糖作用。周玖瑶(葫芦巴对链佐霉素诱导糖尿病模型大鼠药理研究.中华中医药学刊,2007,25(5):1005-1007.)等通过给大鼠腹腔注射50mg/kg链佐霉素(Streptozotocin,STZ)建立胰岛素依赖型糖尿病(Insulin-dependentdiabetesmellitus,IDDM)动物模型，分别灌胃给予胡芦巴煎液和格列齐特溶液作为治疗组和阳性对照组，连续给药20天；测定大鼠血脂、血糖值、肝组织GSH、血清SOD和NO含量。结果表明，胡芦巴能明显降低IDDM大鼠血糖水平，明显降低HDL-C、TG、TC，血清中NO、SOD水平明显升高，对STZ引起的Ⅱ型糖尿病大鼠有明显的改善作用。孙晓风(胡芦巴总皂苷对血脂紊乱模型大鼠生化指标的影响.新疆医科大学学报,2005,28(2):101-103.)等通过对血脂代谢发生紊乱的大鼠饲喂胡芦巴皂苷提取物，发现不同剂量胡芦巴皂苷提取物处理模型组大鼠，与模型组比较，其体内血清TG﹑低密度脂蛋白(LDL)﹑高密度脂蛋白(HDL)﹑胆固醇(TC)代谢含量呈显著下降的趋势。魏友霞(葫芦巴种子提取物对糖尿病大鼠的影响.中成药,2007,29(3):450-451.)等也采用了SD大鼠高热量饲料(8周)喂饲，以链佐霉素(STZ)造模，然后以胡芦巴的水提物(主要成分为多糖)和醇提物(主要成分为不饱和脂肪酸)进行治疗(6周)，检测血糖(GLU)，总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)，各治疗组与对照组比较各指标均显著降低，HDL-C升高，水提组优于醇提组，有显著性差异，表明胡芦巴水提液在降低大鼠血糖同时，还能起到调节血脂代谢的作用。Gupta(EffectofTrigonellafoenum-graecum(fenugreek)seedsonglycaemiccontrolandinsulinresistanceintype2diabetesmellitus:adoubleblindplacebocontrolledstudy.JournaloftheAssociationofPhysiciansofIndia,2001,49:1057-1061.)等发现，给予II型糖尿病患者每天1g胡芦巴水提物，两个月后，与对照组相比较，胡芦巴处理组血糖水平、血清TG和胰岛素浓度明显下降，同时病人胰岛素敏感性和高密度脂蛋白胆固醇显著升高。但是目前研究结果都是在胡芦巴提取物或提取部位的基础上进行的，其单体化合物的研究报道仍然很少，其具体的功效化合物及其作用机制也尚不明确。
技术实现思路
本专利技术提供了如下葫芦巴黄酮类化合物在制备预防和/或治疗糖脂代谢紊乱疾病及相关领域的药物中的应用，所述化合物选自荭草素、异荭草素、牡荆素、异牡荆素其中之一或两者以上的组合。化合物结构式如下：(I)---异荭草素，(II)---牡荆素，(III)---异牡荆素，(IV)---荭草素。具体地，本专利技术提供了上述黄酮类化合物在制备预防和/或治疗胰岛素抵抗的药物中的应用。进一步地，所述药物是预防和/或治疗糖脂代谢紊乱相关疾病的药物。进一步地，所述疾病包括高血脂、心血管类疾病、糖尿病、高血压或代谢综合征。进一步地，所述药物是抑制脂肪细胞分化的药物。进一步地，所述药物是抑制PPARγ、C/EBPα或/和FAS的药物。进一步地，所述药物是改善线粒体功能损伤的药物。进一步地，所述药物通过调控胰岛素信号通路和/或AMPK信号通路中相关蛋白表达水平达到所述目的。进一步地，所述药物通过提高胰岛素信号通路中AKT蛋白的磷酸化水平，和/或，提高AMPK信号通路中AMPK蛋白的磷酸化水平达到所述目的。另外，本专利技术还提供了异荭草素作为AKT蛋白激动剂或AMPK蛋白激动剂的应用。另外，本专利技术还提供了异荭草素、牡荆素作为PPARγ拮抗剂或C/EBPα拮抗剂的应用。异荭草素、牡荆素能够降低脂肪因子PPARγ和C/EBPα的转录水平，从而实现对脂肪组织发生的调节作用。另外，本专利技术还提供了上述黄酮类化合物在制备抑制脂肪细胞分化或/和修复线粒体损伤的药物中的应用。需要说明的是，本专利技术中所用术语“激动剂”是指化合物因其存在所导致产生的蛋白质的生物活性与由蛋白质的天然配体的存在所产生的生物活性相同。本专利技术中所用术语“拮抗剂”是指化合物因其存在所导致产生的蛋白质的生物活性强度降低。本专利技术的有益效果是：本专利技术从葫芦巴中提取7种化合物，对这几种化合物进行活性研究，利用3T3-L1细胞建立胰岛素抵抗(IR)模型，进一步从线粒体功能紊乱的层面对化合物降血糖活性进行深入的研究，探讨了7种化合物对糖尿病的预防和治疗机制，结果表明，本专利技术所述化合物能够抑制3T3-L1细胞的分化，抑制脂滴积累，降低TG含量，并通过相关信号通路降低脂肪因子的转录水平，另外，所述化合物还通过降低细胞中ROS的水平，恢复3T3-L1细胞线粒体膜电势，促进细胞中ATP的产生，防止线粒体DNA损伤，并促进线粒体的发生。附图说明图1胡芦巴化合物对3T3-L1前脂肪细胞活力的影响(x±s,n＝4)；图2诱导不同时间的3T3-L1细胞的形态(200×)，其中，a图为正常细胞，b图为完全汇合后的正常细胞，c图为诱导第4天的细胞，d图为诱导第8天的细胞；图3胡芦巴化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂滴产生的影响(200×)；图4胡芦巴化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中TG含量的影响(##P<0.05vsCon；*P<0.05，**P<0.01vsMod)；图5胡芦巴化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂肪因子表达的影响；图6Dex处理不同时间3T3-L1细胞对2-NBDG的摄取(**P<0.01)；图7Dex处理不同时间3T3-L1细胞中AKT的磷酸化水平；图8胡芦巴化合物对3T3-L1细胞2-NBDG摄取的影响(x±s,n＝4,*P＜0.05,**P＜0.01)；图9胡芦巴化合物对3T3-L1细胞中p-AKT表达的影响；图10胡芦巴化合物对3T3-L1细胞中p-AMPK表达的影响；图11胡芦巴化合物对3T3-L1细胞PPARγ转录水平的影响；图12胡本文档来自技高网...

【技术保护点】
异荭草素在制备预防和/或治疗胰岛素抵抗的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.异荭草素在制备预防和/或治疗胰岛素抵抗的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物是预防和/或治疗糖脂代谢紊乱相关疾病药物。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述疾病包括高血脂、心血管类疾病、糖尿病、高血压或代谢综合征。4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述药物是抑制脂肪细胞分化的药物。5.根据权利要求1或4所述的应用，其特征在于，所述药物是抑制PPARγ、C/EBPα或/和FAS的药物。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洪伦，栾广祥，马筱，索有瑞，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海,63