表达嗜热毛壳菌gla基因的酵母工程菌株及其构建方法技术

本发明专利技术是一种酵母基因工程菌Ｐｉｃｈｉａ　　ｐａｓｔｏｒｉｓ　　ＧＳ－ＧＬＡ－２２，通过ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＡＣＥ方法从嗜热毛壳菌Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ　　ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ获得糖化酶ｇｌａ基因，将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体ｐＰＩＣ９Ｋ上，获得表达重组质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／ｇｌａ，转化毕赤酵母ＧＳ１１５，再从中筛选出一种高效表达糖化酶的酵母基因工程菌。其中一重组子ＧＳ－ＧＬＡ－２２经６ｄ诱导，糖化酶蛋白表达量为０．８６ｍｇ／ｍＬ，其酶活为１６．７３Ｕ／ｍＬ，用于淀粉加工及其它工业领域，具有非常显著的经济价值和社会价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种表达嗜热毛壳菌ｇｌａ基因编码蛋白的酵母工程菌株，其特征是该菌株为一种毕赤酵母，通过ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＡＣＥ方法从嗜热毛壳菌Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ获得糖化酶基因ｇｌａ，将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体ｐＰＩＣ９ Ｋ上，获得表达重组质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／ｇｌａ，转化毕赤酵母ＧＳ１１５，从中筛选出高效表达糖化酶的酵母基因工程菌。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李多川，陈静，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]