一种能对霉菌毒素降解的菌株及其制剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种能对霉菌毒素降解的菌株及其制剂的制备方法，其特征在于：该菌株的保藏号为ＣＣＴＣＣ　Ｍ　２０８０８７，其生物学特性为细胞短杆状，无芽孢，革兰氏阴性，在ＴＳＡ培养基上菌落呈象牙色，好氧；接触酶阳性，氧化酶阴性，尿酶阳性，吲哚反应阴性，能水解七叶灵，不能双水解精氨酸，不能水解酪素，不能水解淀粉，不能分解酪氨酸，不能液化明胶，该菌株能利用葡萄糖，不能利用Ｌ－阿拉伯糖、Ｄ－甘露糖、麦芽糖；该菌株１６Ｓ　ｒＤＮＡ的Ｇｅｎｂａｎｋ登陆号为ＥＵ７９４９０８，以及利用所述菌株的制备液体菌剂、固体菌剂和霉菌毒素去毒剂的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种能降解毒素的菌株及其制剂的制备方法，尤其是一种 能对霉菌毒素降解的菌株及其应用。
技术介绍
真菌毒素是由植物病原真菌侵染谷类作物后产生的一类具有广泛化学 结构的有毒次级代谢产物，对人和动物具有广泛的毒性作用，能引起人和动物癌症、肝毒性等各种症状。目前已知能产生霉菌毒素的霉菌就有150余 种，霉菌毒素约有300种。其中在词料卫生上比较重要的霉菌毒素大部分来 源于曲霉菌属(Apergz7ws)、镰刀菌属(i^sw/謂)、青霉菌属(/^"&7//謂) 等。而由这些霉菌可以产生包括黄曲霉素、棕曲霉素、赭曲霉素、玉米赤 霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、 T-2毒素、伏马菌素等许多霉菌毒 素。据估计，每年全世界有25%的粮食作物受到霉菌毒素的污染。联合国 粮农组织估算，全世界每年由此造成的经济损失可达数千亿美元。因此， 农产品中霉菌毒素的污染问题己成为不可忽视的问题。而对于那些已被毒素污染的农产品的处理主要采取的还是物理或者化 学的方法，如分离霉变的谷物，加入未污染的产品进行混合以达到稀释 毒素的效果，加入吸附剂，如硅铝酸盐、沸石、膨润土、活性炭、硅藻 土等，或者是用一些碱性化合物，如氨水，氢氧化钠和氢氧化钙等来处理 毒素。虽然所有的这些都在一定程度上对减轻毒素污染有一定的作用，但 其最大的不足是去毒效果有限、可能造成重要营养物质的丢失、成本较 高等。因此该领域有关人士认为脱毒的最佳方法是生物脱毒，即在温和条 件下，不用有害的化学药品，不会造成营养价值的丢失，也不会降低适口 性，而使真菌毒素脱毒。由于微生物数量大、种类多，基因资源丰富，降 解有机污染物的潜力很大，几乎所有导致环境污染的有机物都能被微生物 所分解，而且干净彻底、无二次污染。因此，微生物去毒是目前消除毒素 污染的最好办法。我国是一个植物病害的重发区，而且在农产品的晾晒和储备方面的设 备和技术还是比较落后，这就造成我国农产品中的毒素含量偏高，毒素的 存在除了严重危害粮食的产量和品质，对人畜的健康，造成严重威胁以外， 还限制着我国农产品的出口贸易。对于毒素的处理国内还没有切实可行的 方法，市场上一些去毒素产品如天然霉菌毒素吸附剂，微生物去毒剂 等也是从国外进口的。进口产品的高昂价格阻碍了这些产品的广泛应用。上世纪八十年代开始欧美等国家就开始研究用方便、快速、灵敏的免 疫检测技术来检测农产品中的毒素，而九十年代开始就研究用生物的方法 对毒素进行处理，如用微生物和酶制剂处理毒素，从而降低或者是完全 去除农产品中毒素的危害。单端孢霉烯族真菌毒素(Trichothecene mycotoxins简称Ts)是由生长在 植物上的半知真菌(Fungi Imperfecti)类多种产毒真菌，在特定条件下所产生 的一类有相同基本化学结构的毒性代谢产物。这类毒素共包括了近100种 化合物，它们的基本结构是具有四环状12， 13—环氧单端孢烯族化合物骨 架结构。恨据其化学结构的不同， 一般将这类毒素分为A,B，C,D四类，其 中主要几种毒素包括脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)， T-2毒素，雪腐镰刀 菌烯醇(NIV)，镰刀菌烯酮等毒素。Ts在自然界中污染十分广泛，对人畜 健康危害较大。在粮食作物生长的任何地区，在一定的条件下，植物会遭到多种真菌 的侵害。尽管真菌的存在不是决定Ts存在的唯一指标.但由于其与Ts的产生 有关，因而真菌的存在是判断毒素存在最常用的指标。另外，T-2毒素和4. 15 一二醋酸草镰刀菌烯醇(DAS)被认为是所谓"黄雨"化学战剂的组分， 因而引起了国际间广泛的注意。在天然农产品中基本上都能检测到Ts的存 在，含量大多在0 10ppm之间。这些毒素的存在会引起人和动物产生头疼， 恶心，呕吐，出血，白细胞缺乏，咽炎，皮肤坏死，严重的会引起休克和 死亡。Ts之所以会产生如此严重的危害主要是因为Ts对机体各组织器官具有 广泛的生物效应，主要包括免疫系统、造血系统、消化系统和心血管系统。 破坏分裂旺盛的组织器官，如淋巴结、胸腺、胃肠道、骨髓、脾脏、睾丸和卵巢。作用机制一般认为是抑制蛋白蛋和DNA的合成。蛋白质合成效率 高的细咆，如胃肠道和淋巴细胞对Ts更为敏感。Ts的次要细咆毒性应包括引 起DNA断裂，增加膜的脆性以及影响能量代谢等。Ts具有弱的致畸性和致 癌性。免疫抑制和组织坏死比DNA损伤更为重要。Ts对胃肠道和淋巴器官 的毒性效应类似于放射性损伤，但毒性效应范围更为广泛，心脏和胰脏也 是耙器官。综上所述，为了保障我国人们的食品安全和身体健康，并保证农产品 的顺利出口，有必要分离筛选高效降解毒素的菌株，研究其生物学特性， 降解特性以及对毒素的解毒机理，并且把降解菌株和适当的材料结合，选 择合适的剂型，制成霉菌毒素去毒剂，进一步研究霉菌毒素去毒剂作为词 料添加剂和植物抑菌去毒剂的去毒效果。最终为解决饲料中毒素污染问题， 提高粮食的使用效率，保证畜牧业的安全生产，并对粮食产量和食品质量 安全控制起到很大的推动作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对粮食生产和饲料加工和保存过程中霉菌毒素 广泛污染的问题，开发研制出能对霉菌毒素降解的菌株及其制剂。本专利技术的目的是这样实现的 一种能对霉菌毒素降解的菌株，其特征 在于该菌株的保藏号为CCTCCM 208087，其生物学特性为细胞短杆状， 无芽孢，革兰氏阴性，在TSA培养基上菌落呈象牙色，好氧；接触酶阳性， 氧化酶阴性，尿酶阳性，吲哚反应阴性，能水解七叶灵，不能双水解精 氨酸，不能水解酪素，不能水解淀粉，不能分解酪氨酸，不能液化明胶， 该菌株能利用葡萄糖，不能利用L-阿拉伯糖、D-甘露糖、麦芽糖；该菌 株16SrDNA的Genbank登陆号为EU794908。在本专利技术中，所述的霉菌毒素包括单端孢霉烯族毒素，或黄曲霉毒素， 或玉米赤霉烯酮。一种利用权利要求l所述菌株的制剂的制备方法，其特征在于a)将菌株原种在培养皿上活化，并测定降解性能，接种于试管斜面上 获得试管种备用；b) 将试管种置于摇瓶培养基中振荡培养至对数期，获得菌种；c) 将上述培养好的菌种接种入种子罐，培养至对数生长期，获得种子液；e)将获得的种子液接种入生产罐发酵培养，出罐形成能对霉菌毒素降 解的液体菌剂。在上述能对霉菌毒素降解的菌株的制备方法中，摇瓶、种子罐和生产 罐所用的培养基为葡萄糖1.0%， (NHt) 2SO40.1%， K2HPO40.2%， MgS04 0.02%， NaC10.01%， CaC03 0.3%，蛋白胨0.05°/。，蒸馏水适量；培养基的 pH值7.2 7.5。在上述能对霉菌毒素降解的菌株的制备方法中所述的培养基需要 12rC高压湿热灭菌后冷却至30^35'C使用；所述的菌种按种子罐中培养 基的10%接种量接种入种子罐；所述的种子液按生产罐中培养基的IO %接种量接种入生产罐。在上述能对霉菌毒素降解的菌株的制备方法中，在种子罐和生产罐的 培养过程中无菌空气的通气量为l: 0.6~1.2,搅拌速度为180~240转/分，培 养温度为30 35。C ，发酵结束后菌体数量至少达到10亿个/ml。在上述能对霉菌毒素降解的菌株的制备方法中，将获得的能对霉菌毒 素降解的液体菌剂采用泥炭吸附形成固体菌剂剂型，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能对霉菌毒素降解的菌株，其特征在于：该菌株的保藏号为ＣＣＴＣＣ　Ｍ　２０８０８７，其生物学特性为细胞短杆状，无芽孢，革兰氏阴性，在ＴＳＡ培养基上菌落呈象牙色，好氧；接触酶阳性，氧化酶阴性，尿酶阳性，吲哚反应阴性，能水解七叶灵，不能双水解精氨酸，不能水解酪素，不能水解淀粉，不能分解酪氨酸，不能液化明胶，该菌株能利用葡萄糖，不能利用Ｌ－阿拉伯糖、Ｄ－甘露糖、麦芽糖；该菌株１６Ｓ　ｒＤＮＡ的Ｇｅｎｂａｎｋ登陆号为ＥＵ７９４９０８。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐剑宏，史建荣，陆琼娴，祭芳，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]