抗乙草胺大豆根瘤菌剂的制备方法技术

抗乙草胺大豆根瘤菌剂的制备方法属于菌剂制备技术；本方法利用具有高效固氮活性大豆根瘤菌，在蔗糖酵母膏培养基中逐步提高乙草胺浓度，在乙草胺高压选择条件下培育抗性大豆根瘤菌，经纯系分离后形成抗乙草胺大豆根瘤菌原原种，将原原种挑取到斜面试管中形成一级菌种，再将一级菌种扩繁形成二级菌种接种到发酵罐内进行菌剂生产；本方法工艺技术简单，生产成本低廉，其制剂产品性能质量好，使用中解决了乙草胺对大豆根瘤固氮的伤害，提高大豆产量和品质。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种抗乙草胺大豆根瘤菌剂的制备方法，其特征是：　①、在蔗糖酵母膏培养基中加入乙草胺，使蔗糖酵母膏培养基中的乙草胺浓度为１００ｍｇ／Ｌ；将上述蔗糖酵母膏培养基在每个摇瓶中装入１５０ｍｌ，在１２０－１２５℃条件下灭菌３０－４０分钟，冷却后挑取一环具有高效固氮活性的大豆根瘤菌加入摇瓶中，在２８－３０℃条件下培养５－７天，得培养基液备用；　②、在蔗糖酵母膏培养基中加入乙草胺，使蔗糖酵母膏培养基中的乙草胺浓度为２００ｍｇ／Ｌ；将此乙草胺浓度的蔗糖酵母膏培养基在每个摇瓶中装入１５０ｍｌ，在１２０－１２５℃条件下灭菌３０－４０分钟，冷却后再将上述①中得到的培养基液挑取一环接种到灭菌后含乙草胺浓度为２００ｍｇ／Ｌ的蔗糖酵母膏培养基中，在２８－３０℃条件下培养５－７天，得培养基液备用；　③、依此类推，重复②的作业过程，每次在蔗糖酵母膏培养基中增加１００ｍｇ／Ｌ的乙草胺，直至蔗糖酵母膏培养基中乙草胺浓度为１０００ｍｇ／Ｌ；　④、把含乙草胺浓度为１０００ｍｇ／Ｌ的蔗糖酵母膏培养基中具有抗性的大豆根瘤菌进行纯系分离后保存于斜面试管中；　⑤、把纯系分离后的抗乙草胺大豆根瘤菌在蔗糖酵母膏斜面试管基中培养为一级菌种，再将该一级菌种在灭菌的蔗糖酵母膏培养基摇瓶中扩繁培养为二级菌种；对含有８％豆粉、５％麦麸、３％食盐、１％甘露醇、ＰＨ值为６．５－６．８的水溶液培养基进行灭菌冷却后接种二级菌种，在２８－３０℃条件下发酵培养４８－７２小时，过滤后得到液态抗乙草胺大豆根瘤菌剂，或者选择固定载体添加抗乙草胺大豆根瘤菌剂制成固态抗乙草胺大豆根瘤菌剂产品。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：丁伟，程茁，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]