【技术实现步骤摘要】
，本专利技术利用高效率乳杆菌电转化感受态的制备，大肠杆菌谷胱甘肽基因的导入，NICE表达系统的构建， 以及谷胱甘肽基因的诱导表达，进行该基因工程菌的构建。属于生物工程技术 领域。
技术介绍
乳杆菌是一类使用广泛的益生菌，在食品发酵行业被广泛应用。由于乳杆 菌的最适生长温度一般在30。C-37。C，而在实际生产中，起酵物的冷冻保藏、低 温培育和发酵产品的冷藏过程都将使乳杆菌要经历远低于最适生长温度的冷冻 条件，从而影响其生命力。研究发现，乳杆菌胞内谷胱甘肽含量的增加能显著提高其对于冷冻胁迫的 耐受能力，但部分乳杆菌本身不具备合成谷胱甘肽的能力，或合成谷胱甘肽的 能力较弱。将谷胱甘肽合成基因导入乳杆菌，使其在少量食品级诱导物nisin的 诱导下，自身合成谷胱甘肽，提高乳杆菌对于冷冻条件的适应能力。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，提 高乳杆菌对于冷冻条件的适应能力。本专利技术的技术方案的详细描述 一种抵御冷冻胁迫乳杆菌基因工程菌的构 建方法，通过高效率乳杆菌电转化感受态的制备，导入谷胱甘肽基因的质粒pNZ3203的提取，NICE表达系统构建的质粒pNZ9530...
【技术保护点】
一种抵御冷冻胁迫乳杆菌基因工程菌的构建方法，其特征是：通过高效率乳杆菌电转化感受态的制备，导入谷胱甘肽基因的质粒ｐＮＺ３２０３的提取，ＮＩＣＥ表达系统构建的质粒ｐＮＺ９５３０的提取，质粒ｐＮＺ３２０３和ｐＮＺ９５３０的导入，以及谷胱甘肽基因的诱导表达；步骤为： （１）高效率乳杆菌电转化感受态的制备： ａ）挑旧金山乳杆菌ＤＳＭ２０４５１↑［Ｔ］单菌落接种到ＭＭＲＳ培养液中，３０℃静置培养过夜； ｂ）２％ ｖ／ｖ接种至２０ｍＬ ＭＭＲＳ培养液中，３０℃静置培 养细胞ＯＤ↓［６００］至０．５－０．８； ｃ）培养物装至５０ｍＬ预冷的无菌离心...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈坚，薛峰，张娟，堵国成，廖鲜艳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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