本发明专利技术公开了一种防治苹果真菌病害的菌剂。该菌剂的活性成分包括枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）和短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）。本发明专利技术的防治苹果真菌病害的菌剂，主要可以防治苹果轮纹病，其防治效果在８０％以上，兼治其他真菌病害，对苹果白粉病的防治效果在３０～６０％之间，对红腐病的防治效果可达４５％，对褐腐病的防治防治效果可达４０％，对苹果斑点落叶病的防治效果可达４２．３３％，苹果平均亩产增加９．３％，并且苹果品质得到明显改善，苹果的抗逆性明显提高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种防治苹果真菌病害并促增产的菌剂及其专用菌株与应用。
技术介绍
苹果轮纹烂果病是苹果生产上的重大病害，已成为当前果农和农业技术员亟待解决的难题。大部分苹果产区采果前烂果率在10% 15%，大发生年可达30%左右， 最高时甚至达到50%。我国每年因轮纹烂果病造成的经济损失达30亿 50亿元， 且生产上喷药次数也逐年增多，这样既给农民造成了巨大的经济损失，也对苹果的 出口和发展造成极大的影响，同时还给环境保护带来了潜在的危险。因此，对于该 病害采取合理的防治措施、提高防效，显得尤为重要。生物防治是近年来被证实很 有成效的新的防治途径，它主要是利用微生物之间的拮抗作用，选择对农产品不造 成危害的微生物来防治植物病害，既可以减少化学农药的用量和在农产品上的残 毒，又可以降低成本节约开支，有利于保护人体健康和生态环境以及实现经济的可 持续发展，顺应社会发展的需求。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种防治苹果真菌病害的菌剂及其专用菌株与应用。本专利技术所提供的菌剂，它的活性成分包括枯草芽孢杆菌(5"C///M^Z>"fc)和 短小芽孢杆菌(5a"'〃us/ 騰z7w50 。上述菌剂中，所述枯草芽孢杆菌(Bac///^ swZ)"^y)和所述短小芽孢杆菌(Sac/〃w p謂"M)的集落形成单位数目比为1:(0.2-5)，具体为1:L所述枯草芽孢杆菌(5a"7/uswto7^)具体可为枯草芽孢杆菌(5acr7/towto'fc) KTB004,所述短小芽孢杆菌(Sad〃ws; wm7旭)具体可为短小芽孢杆菌(5acf〃m / 謂/Zw50 KTB005。本专利技术所提供的枯草芽孢杆菌(5""7/^加&//&) KTB004是从发生苹果轮纹病 的果树的健康苹果枝干皮层中筛选获得的内生菌，短小芽孢杆菌(^fl"7/^;^m//^) KTB005是从发生苹果轮纹病的果树的健康苹果果实中筛选得到的内生菌，分别鉴定 为枯草芽孢杆菌(5a"7/wswto7&)和短小芽孢杆菌(5acz7/z^;7Mm//t )。枯草芽 包 杆菌(5ac/〃wwto7&) KTB004和短小芽孢杆菌(Bac/〃w; Mm//^) KTB005均已于2008年12月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称 CGMCC，地址为北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所)，保藏登记 号分别为CGMCC2816和CGMCC W 2817。枯草芽孢杆菌(Sac///^ wto7&)KTB004 CGMCC 2816菌体杆状，长2 3|nm， 宽0.7 0.8pm，革兰氏反应阳性，芽孢椭圆形或柱状，中生或近中生，壁薄。孢囊 不膨大，原生质中不含有e-羟基丁酸盐颗粒；在含有7。/。质量百分含量的NaCl中生 长，石芯牛奶不产酸，pH5.7条件下生长，v.p阳性，水解淀粉，可产酸，与葡萄 糖反应产气，能将N03—还原为N02—，厌氧条件下不能生长，接触酶阳性。与同种其它 枯草芽孢杆菌(Sa"7/^w^7^)相比菌体较宽。菌株KTB004的16S rDNA序列与 枯草芽孢杆菌(^0"7/^^&//&)的相似性为96%。短小芽孢杆菌(5a"7/M/ wm//w;y) KTB005 CGMCC JY2 2817菌体短杆状，大小 为(2.0 3.0)nmx(0.6 0.7)pm，革兰氏反应阳性；芽孢呈椭圆形，不明显膨大，芽 孢从中生到次端生，壁薄，易形成；在含有质量百分含量为2%、 5%或7%的化(]1中 均生长，在pH5.7或pH 6.8的营养肉汤中均生长，v.p阳性，不水解淀粉，可产 酸，不与葡萄糖反应产气，能以铵盐为氮源，可利用柠檬酸盐而不能利用丙酸盐， 不还原硝酸盐，不能厌氧生长，接触酶阳性。菌株KTB005的16S rDNA序列与短小 芽孢杆菌(SacZ/Z^pw/m'/M)的相似性为97%。本专利技术所提供的菌剂的活性成份也可仅由所述枯草芽孢杆菌(5flc///^ w^/fc) KTB004 CGMCC 2816和所述短小芽孢杆菌(5ac/〃wp^m7ws) KTB005 CGMCC We 2817组成。上述菌剂可以为液体菌剂，也可以为固体菌剂，在液体菌剂中加入吸附基质(如 轻质碳酸钙)，即可获得固体菌剂。上述菌剂中，所述枯草芽孢杆菌(5ac///^ w^/fc) KTB004 CGMCC Ws 2816和所述短小芽孢杆菌(5fl"7/ws; wm//^) KTB005 CGMCC Ws 2817可以分别独立包装，也可以混合在一起。所述枯草芽孢杆菌(Sac///^ wto7&) KTB004 CGMCC JV2 2816和所述短小芽孢 杆菌(丑flc/〃^/ Mm"ws) KTB005 CGMCC W 也属于本专利技术的保护范围。本专利技术的另一个目的是提供一种防治苹杲真菌病害的方法。本专利技术所提供的防治苹果真菌病害的方法，是在苹果生长期施用上述任一种菌 剂，使苹果真菌病害得到有效防治并且果实产量得到提高。上述方法中，所述真菌病害包括轮纹病、红腐病、褐腐病、白粉病和斑点落叶4病等。所述植物具体可为苹果。本专利技术的防治苹果真菌病害并促增产的菌剂，对苹果轮纹病的防治效果在80%以上，兼治苹果的其他真菌病害，对苹果白粉病的防治效果在30 60%之间，对红 腐病的防治防治效果可达45%，对褐腐病的防治防治效果可达40%，对苹果斑点落 叶病的防治效果可达42.33%，苹果平均亩产增加9.3%，并且苹果品质得到明显改 善，苹果的抗逆性明显提高。 具体实施例方式下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物 材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。 实施例l、菌剂中活性成分的筛选NA培养基的组成牛肉膏3g/L、蛋白胨5g/L、 NaC15g/L、琼脂20g/L。 pH 7. 0 7.2。 0,11 MPa压力下灭菌30min。在苹果轮纹病重病区，从发生苹果轮纹病的果树上选取健康的苹果果实和树 皮，分别用无菌水冲洗干净，各称取5g，用75。/。体积百分含量的乙醇浸泡3min，然 后将果实用1%体积百分含量的次氯酸钠溶液浸泡3 min，将树皮用O. 1%质量百分含 量的升汞浸泡3min，无菌水冲洗3 5次，最后一次无菌水冲洗液分别涂布于PDA和 NA培养基平板上，28r恒温培养3 4d，每个处理重复3次。若培养基平板上无菌落 长出，表明该材料表面灭菌彻底。取经检验表面灭菌彻底的树皮和叶片分别剪碎， 加入10mL无菌水和少许石英砂将树皮和叶片研磨成匀浆，静置20Mn后，各取O. lmL 涂NA培养基平板，涂布均匀，每个处理重复3次，28'C恒温箱中培养3 5d，获得单 菌落。接禾中苹果轮纹病病原菌(5o^yos/ /z"en'fl! 6ere"g〃'awa f.sp/^/co/a)(苹果轮纹 病病原菌属子囊菌门、囊孢壳属的真菌，无性阶段为无性菌类大茎点菌属)(徐梅 等，苹果轮纹病菌与干腐病菌的研究，河南林业科技，1999， 19巻第2期)于PDA 培养基平板中央，然后将上述获得的多个单菌落分别接种于苹果轮纹病病原菌的周 围，每个平皿中，在苹果轮纹病病原菌周围4个本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种防治苹果真菌病害的菌剂，它的活性成分包括枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）和短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：付学池，梅汝鸿，王琦，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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