本发明专利技术公开了一种利用细菌发酵制成一种多功能性发酵液的生产方法，特别是利用类球红细菌（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）制成一种功能性发酵液的生产方法。该菌种的保藏号为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１５６２。保藏时间：２００５年１２月１２日。方法是将培养皿分离后进行了摇瓶扶壮的菌种进行一级种子罐（２００Ｌ）与二级种子罐（２０００Ｌ）的扩大培养，用同样的方式转接至５０００Ｌ至２００００Ｌ大型发酵罐中进行规模化发酵。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种利用细菌发酵制成一种功能性发酵液的生产方法，特别是利用类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)制成一种功能性发酵液的生产方法。
技术介绍
目前，对于类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)的研究仅限于实验室水平，没有利用类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)的技术方案进行工业规模的深层发酵方法。同时，在饮料行业中，缺少一种利用生物发酵技术坐产的能对人体的健康起到极大促进作用的饮料。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用对类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)进行深层的工业化规模的发酵方法，得到的发酵液对人体的健康有益，能对人体的免疫系统进行调节，增加人体抵抗力。在本专利技术人的系列专利(中国CN1184307C)中，涉及了类似的发酵方法，但是经过专利技术人几年的继续试验，优化了发酵培养液的成分，并且优化了发酵条件，得到了效果更好、成本更低的发酵液。本专利技术利用类球红细菌工业化规模发酵的方法，该方法是将类球红细菌(Rhodobactersphaeroides)依次经过500ml三角烧瓶、50-200L的一级种子罐、500-2000L的二级种子罐和5000-20000L大型发酵罐深层发酵，发酵条件分别为500ml三角烧瓶恒温25-35℃，用300LX白炽灯光照，摇床转速每分钟50-60转下进行24小时；200L种子罐pH6.4-7.5，温度为25-35℃，用300LX白炽灯通过两个不同角度的视镜光照，恒温25-35℃发酵24小时通过一级种子罐(50-200L)与二级种子罐(500-2000L)进行扩大培养24小时，其中的培养温度、pH值、光照和通气压力与一级种子罐相同； 一级和二级种子罐的压力都为0.04Mpa；大型发酵罐的发酵条件如下通过三个不同角度的视镜给300-500LX炽灯光的光照，料液pH6.4-7.5，进气压力0.1-0.3Mpa，调整罐内压力0.05-0.08Mpa，控制温度25-35℃，发酵24小时；即得到发酵液，其特征在于所述的类球红细菌为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心、编号CGMCC No.1562，所述的培养液的配制方法为1000ml蒸馏水中无机盐溶液配比；MgSO4·7H2O 0.2-3.0克CaCl·2H2O0.1-1.0克FeSO4·7H2O 0.1-1.0克NaEDTA0.1-1.0克250ml蒸馏水中微量元素溶液配比；H3BO40.5-1.5克MnSO450-200毫克NaMoO420-100毫克ZnSO410-20毫克Cu(NO3)22-3毫克钼酸钠 6-15毫克亚硒酸钠6-15毫克；100ml蒸馏水中生长因子溶液配比生物素 0.2-0.5毫克维生素B110-30毫克烟酸10-30毫克对氨基苯甲酸10-20毫克；乳酸溶液配比蒸馏水 900毫升乳酸30-100毫升，用12N的NaOH溶液调pH6.4；硫酸铵溶液配比蒸馏水 800毫升硫酸铵3-8克用水加至1000毫升；溶解后用蒸馏水添至1000毫升，然后用12N的NaOH溶液调pH6.4磷酸缓冲液K2HPO415-50克KH2PO410-15克用水加至1000毫升；分别取a、无机盐溶液 10-30％、b、微量元素溶液0.1-1.0％c、生长因子溶液0.1％d、乳酸溶液2-10％e、硫酸铵溶液 0.5-2％f、磷酸缓冲液 1-5％将配比a-f按照上述百分比进行混合，其余为水，即得到培养液。做斜面试管或培养皿培养基时候另外添加蛋白胨1％，酵母膏0.2％。优选1000ml蒸馏水中无机盐溶液配比；MgSO4·7H2O 0.3克CaCl·2H2O0.05克FeSO4·7H2O 0.5克NaEDTA0.5克250ml蒸馏水中微量元素溶液配比；H3BO41.0克MnSO4120毫克NaMoO460毫克ZnSO415毫克Cu(NO3)22毫克钼酸钠 12毫克亚硒酸钠12毫克；100ml蒸馏水中生长因子溶液配比生物素 0.5毫克维生素B110毫克烟酸10毫克对氨基苯甲酸10毫克；乳酸溶液配比蒸馏水 900毫升乳酸40毫升，用12N的NaOH溶液调pH6.4；硫酸铵溶液配比蒸馏水800毫升硫酸铵5克用水加至1000毫升；溶解后用蒸馏水添至1000毫升，然后用12N的NaOH溶液调pH6.4磷酸缓冲液K2HPO440克KH2PO410克用水加至1000毫升；分别取a、无机盐溶液 20％、b、微量元素溶液0.2％c、生长因子溶液0.1％d、乳酸溶液5％e、硫酸铵溶液 1.5％f、磷酸缓冲液 3％将配比a-f按照上述百分比进行混合，其余为水，即得到培养液。做斜面试管或培养皿培养基时候另外添加蛋白胨1％，酵母膏0.2％。用上述方法得到的发酵液具有如下用途用其制备生物饮料，其中将发酵液与纯净水混合后，加食品添加剂调整口味。用5-10倍发酵液灌溉根部腐烂处可以治疗根腐病。用50-100倍的权利要求3中所述的发酵液喷洒水果果实和可生食蔬菜，可使植物果实的SOD提高。用100-150倍的权利要求3中所述的发酵液作为活菌生物材料。给养鱼、虾或蟹的池塘中按池塘水量的3-5ppm添加，会净化水质、减少疾病、提高生长速度。发酵液与水按照1∶5-10倍添加到奶牛、猪、鸡的饲料或者饮用水中喂养。以上的发酵液使用的频率和剂量为，1-3次每天，使用期限1个月以上效果明显。有益效果缩短了发酵时间，生产成本低，使用效果好，在实际的应用中得到了非常好的效果。具体应用和检测结果如下检测单位中国科学院微生物研究所；(2004)微检字第095号 检测鉴定负责人周宇光发现了植物所需要的多种营养成分，包括了多种植物生长所必需的成分，还检测了本专利技术产品与42种常用药的敏感性测试。检测单位山东省烟台市农业科学研究所；试验完成人姜学玲名称植物生长菌剂在黄瓜上试验总结报告结果经过对照组试验得到第一组亩产纯收入增加766.5元至995.25元第二组亩产纯收入增加566.5元至916.8元(经过亩产量和当年的标准市价得到)投入产出比分别为1∶2.83，1∶8.48，1∶61.12。不同施用方法黄瓜增产幅达到10％以上。施用方法为地下冲施结合叶面喷施或者单独叶面喷施。发酵液100倍稀释。检测单位山东省烟台市农业科学研究所；试验完成人姜学玲名称植物生长菌剂在辣椒上试验总结报告结果经过对照组试验得到 增产率达到5-10.7％投入产出比分别为1∶3.1，1∶2.9，1∶29.5。投入1元钱发酵液，可以得到2.9元回报，叶面喷施可以得到29.5元回报。施用方法为地下冲施结合叶面喷施或者单独叶面喷施。发酵液100倍稀释，进行叶面喷施，保证连续3次以上。检测单位滨州市土壤肥料工作站；试验完成人孙福来名称植物生长菌剂在黄瓜上试验总结报告时间2005.4.16至2005.7.25结果经过对照组试验得到亩产纯收入增加436.24元至754.565元(经过亩产量和当年的标准市价得到)投入产出比分别为1∶2.18，1∶6.76，1∶50.3。不同施用方法黄瓜增产幅达到10％以上。施用方法为地下冲施结合叶面喷施或者单独叶面喷施。发酵液100倍稀释。检测单位滨本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用类球红细菌工业化规模发酵的方法，其特征在于：该方法是将类球红细菌（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）依次经过５００ｍｌ三角烧瓶、５０－２００Ｌ的一级种子罐、５００－２０００Ｌ的二级种子罐和５０００－２００００Ｌ大型发 酵罐深层发酵，发酵条件分别为：５００ｍｌ三角烧瓶：恒温２５－３５℃，用３００ＬＸ白炽灯光照，摇床转速每分钟５０－６０转下进行２４小时；２００Ｌ种子罐：ｐＨ６．４－７．５，温度为２５－３５℃，用３００ＬＸ白炽灯通过两个 不同角度的视镜光照，恒温２５－３５℃发酵２４小时通过一级种子罐（５０－２００Ｌ）与二级种子罐（５００－２０００Ｌ）进行扩大培养２４小时，其中的培养温度、ｐＨ值、光照和通气压力与一级种子罐相同；一级和二级种子罐的压力都为０．０４Ｍｐａ ；大型发酵罐的发酵条件如下：通过三个不同角度的视镜给３００－５００ＬＸ白炽灯光的光照，料液ｐＨ６．４－７．５，进气压力０．１－０．３Ｍｐａ，调整罐内压力０．０５－０．０８Ｍｐａ，控制温度２５－３５℃，发酵２４小时；即得到发酵 液，其特征在于：所述的类球红细菌为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心、编号ＣＧＭＣＣＮｏ．１５６２，所述的培养液的配制方法为：１０００ｍｌ蒸馏水中无机盐溶液配比：ＭｇＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ０．２－ ３．０克ＣａＣｌ.２Ｈ↓［２］Ｏ０．１－１．０克ＦｅＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ０．１－１．０克ＮａＥＤＴＡ０．１－１．０克２５０ｍｌ蒸馏水中微量元素溶液配比；Ｈ↓［３］ＢＯ↓［１］０ ．５－１．５克ＭｎＳＯ↓［４］５０－２００毫克ＮａＭｏＯ↓［４］２０－１００毫克ＺｎＳＯ↓［４］１０－２０毫克Ｃｕ（ＮＯ↓［３］）↓［２］２－３毫克钼酸钠６－１５毫克亚硒酸 钠６－１５毫克；１００ｍｌ蒸馏水中生长因子溶液配比生物素０．２－０．５毫克维生素Ｂ↓［１］１０－３０毫克烟酸１０－３０毫克对氨基苯甲酸１０－２０毫克；乳酸溶液配比蒸 馏水９００毫升乳酸３０－１００毫升，用１２Ｎ的ＮａＯＨ溶液调ｐＨ６．４；硫酸铵溶液配比蒸馏水８００毫升硫酸铵３－８克用水加至１００...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王栋，
申请(专利权)人：王栋，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]
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