以无血培养基制备A群链球菌制剂的方法及无血培养基技术

本发明专利技术公开了一种以无血培养基制备Ａ群链球菌制剂的方法及无血培养基，该方法是将Ａ群链球菌弱毒株工作种子批经过传代，在无血培养基中制备种子液及培养，所得培养物经过菌体灭活、冻干工序得到白色菌体干粉制剂即Ａ群链球菌制剂的过程；所用无血培养基重量配比为：胰蛋白胨１．２％、葡萄糖０．９％、酵母粉０．４％、氯化钠０．５％、磷酸二氢钾０．５％、其余为水，ｐＨ值为７．４～７．６；本发明专利技术利用无血培养基代替含血培养基培养制备Ａ群链球菌制剂，降低了制剂中潜在的异源性物质，避免使用血液成分还能有效降低培养基成本；该重量配比的培养基保证了制剂生物产量不减少和产量的稳定性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种以无血培养基制备Ａ群链球菌制剂的方法，该方法包括以下步骤：　　　　无血培养基的准备：将无血培养基在４５００ｒ／ｍｉｎ的条件下离心３０ｍｉｎ、抽滤，以保证培养基澄清无杂质，然后灭菌待用；　　　　传代：在无菌室内开启Ａ群链球菌弱毒株工作种子批，在斜面培养基上在３７℃的条件下，培养２０小时传三代，然后分别接种在无血培养基，在３７℃、１２０ｒ／ｍｉｎ的条件下振荡培养２０小时制备种子液，在传代前要进行革兰氏染色镜检，如发现污染杂菌则废弃；　　　　制备Ａ群链球菌制剂；将制好的生产用种子液接种在无血培养基中，在３７℃、１４０ｒ／ｍｉｎ的条件下振荡培养２０小时，在接种前要进行革兰氏染色镜检，如发现污染杂菌则废弃；　　　　菌体灭活：将青霉素和过氧化氢加入培养物内灭活，经过振荡、４５℃水浴３０ｍｉｎ，４５００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ；　　　　产品收集：经过菌体灭活后的培养物用生理盐水悬浮，二次离心后将沉淀物在－３７℃冻干７２小时得到白色菌体干粉制剂即Ａ群链球菌制剂，称重后密封保存于无菌瓶中。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邱芳萍，吴战宇，卢日峰，郎维，
申请(专利权)人：长春工业大学，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]