重组α－葡聚糖酶融合蛋白高效生产方法及相关表达载体和菌株技术

本发明专利技术提供了一种重组α－葡聚糖酶融合蛋白高效生产方法，通过ＰＣＲ方法获得编码油脂酵母α－葡聚糖酶的基因序列，将其构建入带有Ｈｉｓ　　Ｔａｇ标签的毕赤酵母分泌表达载体，并转化毕赤酵母获得高表达菌株，通过优化的高密度发酵和纯化工艺，获得了高纯度的带有Ｈｉｓ　　Ｔａｇ的α－葡聚糖酶融合蛋白，其具有高度的α－葡聚糖酶活。该方法工艺简便、高分泌表达α－葡聚糖酶融合蛋白，获得的α－葡聚糖酶融合蛋白纯度高、活性好、生产成本低。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种高效生产α－葡聚糖酶融合蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：ａ．在适合的表达条件下，培养一酵母工程细胞，所述酵母工程细胞整合有内含编码所述α－葡聚糖酶融合蛋白的核苷酸序列的酵母分泌表达载体，所述核苷酸序列编码的蛋白包含ＳＥＱＩＤＮＯ：２和ＳＥＱＩＤＮＯ：４所示的氨基酸序列，从而分泌表达出所述α－葡聚糖酶融合蛋白；ｂ．分离纯化出表达的所述α－葡聚糖酶融合蛋白。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周祥山，张元兴，陈琳，范卫民，陆建，江希，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]