用于使时钟基因的表达变化的组合物制造技术

本发明专利技术目的在于，提供用于使时钟基因的表达变化、以及通过该表达变化使昼夜节律变化的组合物，深入研究的结果表明，合欢树皮的水提取物能够使时钟基因的表达量及相位变化。另外发现，通过经口施与合欢树皮的水提取物，受试者午后睡意减少，而且清醒程度、意志、情绪及集中力增加，清晨型倾向增强。

A composition used to change the expression of the clock gene

The aim of the present invention is to provide the composition for changing the expression of clock genes and changing the circadian rhythm through the expression change, and the results show that the water extract of bark of the bark can change the expression and phase of the clock gene. In addition, it was found that after oral administration of water extract from bark of Acacia Barbara, the subjects' sleep in afternoon decreased, and their wakefulness, willpower, emotion and concentration increased.

【技术实现步骤摘要】
用于使时钟基因的表达变化的组合物
本专利技术涉及包含合欢树皮的水提取物作为有效成分的、用于使时钟基因的表达变化的组合物。另外，本专利技术涉及包含该提取物作为有效成分的、用于使昼夜节律变化的组合物。
技术介绍
地球上存在的大部分生物结合外部环境(主要是明暗循环)以约24小时的周期控制着生理功能(睡眠清醒、体温调节、摄食排泄、激素分泌等)，这样的生物学每天变化被称为“昼夜节律(Circadianrhythm)”。近年来由于这种昼夜节律异常而引起身心各种不适成为社会性问题。例如，由飞机等的移动导致的时差犯困、由换班(交替工作)等失常的生活方式引起的睡眠障碍、由夜晚型生活(熬夜、夜班等)导致的睡眠清醒节律等失常这样的由生活环境和/或工作环境的变化等导致的昼夜节律紊乱引起的问题较多。另外，由于随着年龄增长调整昼夜节律的褪黑素等激素分泌量降低，因此睡眠清醒、体温调节等各种节律在高龄者中减弱。由晚年睡眠障碍等导致的QOL降低也与近年来快速高龄化互相结合而作为社会性问题令人担忧。鉴于该现状，期望能够消除昼夜节律失常、减弱等、以及治疗、改善所述睡眠障碍等的方法，但现状是仍然没有确立这样的方法。在哺乳类中，视交叉上核(SCN)成为昼夜节律的控制中心，该视交叉上核(SCN)是直径仅为1毫米左右的小神经核，存在于从左右眼的视网膜延伸的视神经在脑内的视丘下部交叉而成的视神经交叉部位(视交叉)。然后，由SCN创造的昼夜节律通过时钟基因(Bmal1、Clock、Period、Cryptochrome等)这样的基因群形成。更具体而言，转录激活因子BMAL1及CLOCK蛋白质将Period及Cryptochrome基因的表达激活，由此转录翻译的Period(PER1、PER2)及Cryptochrome(CRY1、CRY2)蛋白质与BMAL1及CLOCK蛋白质相互作用，由此形成抑制自身转录这样的负反馈。其后，PER及CRY蛋白质受到磷酸化及泛素化修饰后被蛋白酶体分解，因此所述转录抑制被解除。然后，由BMAL1及CLOCK蛋白质引发的下个循环开始，该循环一周需要约24小时，这就是昼夜节律形成的分子机理。这样的时钟基因的反馈机制在肝脏、肌肉、肺、心脏这样的末梢组织、脑中的除了SCN以外的组织中也存在，已知通过该机制在末梢组织等中也形成昼夜节律。另外，该节律通过作为控制中心的SCN介由各种组织发出神经和/或激素等信号而被控制。这样，昼夜节律通过时钟基因的表达而被控制。因此，通过使该表达变化，从而使昼夜节律变化，进而进行能治疗由昼夜节律异常导致的睡眠障碍等的物质的探索(专利文献1～2)。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2008-266319号公报专利文献2：日本特开2015-110564号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术是鉴于上述现有技术中存在的课题而完成的，目的在于，提供用于使时钟基因的表达变化、并且通过该表达变化而使昼夜节律变化的物质。用于解决课题的方法本专利技术者们为了实现上述目的而进行了深入研究，结果发现，通过在小鼠胚胎成纤维细胞中添加合欢树皮的水提取物，能够在该细胞的时钟基因(Per2基因)的表达节律中抑制其振幅的渐进减弱。并且本专利技术者们得知，所述提取物根据施与细胞的时间点不同，既能够使Per2基因表达节律的波峰(相位)浓度依赖性地前进，又能够使其后退。并且，对小鼠经口施与合欢树皮的水提取物，分析其末梢组织(肝脏)中的时钟基因(Per1、Per2、Bmal1)的表达。其结果本专利技术者们发现，通过上述提取物，末梢组织中时钟基因的表达量及相位也发生变化。另外，对人经口施与合欢树皮的水提取物，结果发现，如同反映上述该提取物使时钟基因的表达变化的作用一样，受试者的清晨型倾向增强(入睡早，早晨早起变容易)，午后的睡意减少，活动性(清醒程度、意志、情绪及集中力)提高，从而完成了本专利技术。即，本专利技术提供以下＜1＞～＜3＞。＜1＞一种用于使时钟基因的表达变化的组合物，包含合欢树皮的水提取物作为有效成分。＜2＞根据＜1＞所述的组合物，其中，时钟基因是选自Per1基因、Per2基因和Bmal1基因中的至少一种基因。＜3＞根据＜1＞或＜2＞所述的组合物，是用于使昼夜节律变化的组合物。专利技术的效果根据本专利技术，能够使时钟基因的表达变化，还能够通过该表达变化使昼夜节律变化。并且，通过该变化，能够消除昼夜节律中的异常，因此，根据本专利技术，也能够治疗、改善(缓和)或预防由该异常引起的疾病(昼夜节律障碍等)。附图说明图1是显示时钟基因的表达节律、或由该表达节律控制的昼夜节律的概略的波形图。图2是显示添加了合欢树皮的水提取物(50μg/ml或100μg/ml)、或者作为对照的蒸馏水(DW)的小鼠胚胎成纤维细胞中的Per2基因的表达节律的波形图。图中的横轴显示为了重新设置各细胞中的Per2基因等时钟基因的表达循环使其同步而在培养基中添加地塞米松之后的天数。图3是显示对小鼠施与合欢树皮的水提取物的试验的日程的概略图。图4是显示经口施与了合欢树皮的水提取物(1mg或10mg)或作为对照(cont.)的蒸馏水的小鼠中的Per1基因的表达量的图。图5是显示经口施与了合欢树皮的水提取物(1mg或10mg)或作为对照(cont.)的蒸馏水的小鼠中的Per2基因的表达量的图。图6是显示经口施与了合欢树皮的水提取物(1mg或10mg)或作为对照(cont.)的蒸馏水的小鼠中的Bmal1基因的表达量的图。图7是显示小鼠中Per1基因的表达量的经时变化的图。其中，纵轴作为以Gapdh基因的表达量为基准的相对值显示Per1基因的表达量。横轴显示明暗条件下的时刻(以光照期开始时间(ZT；ZeitgeberTime)作为ZT0)。图8是显示在上午摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(关西学院大学式嗜睡量表，KSS)的结果的图。图9是显示在上午摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(视觉模拟评价量表，VAS)的结果(清醒程度)的图。图10是显示在上午摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(视觉模拟评价量表，VAS)的结果(意志)的图。图11是显示在上午摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(视觉模拟评价量表，VAS)的结果(情绪)的图。图12是显示在上午摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(视觉模拟评价量表，VAS)的结果(集中力)的图。图13是显示在上午摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(清晨型-夜晚型问卷，MEQ)的结果的图。图14是显示在晚餐时摄取合欢树皮的水提取物的人接受睡眠检查(清晨型-夜晚型问卷，MEQ)的结果的图。具体实施方式如后述实施例所示，在本专利技术中，表明了合欢树皮的水提取物能够使时钟基因的表达量及相位变化。另外，所述提取物能够介由时钟基因的表达变化使由该基因控制的昼夜节律也变化。所以，本专利技术提供包含合欢树皮的水提取物作为有效成分的用于使时钟基因的表达变化的组合物。另外，本专利技术提供包含该提取物作为有效成分的用于使昼夜节律变化的组合物。合欢树皮的水提取物首先，对于在本专利技术的组合物中作为有效成分包含的“合欢树皮的水提取物”进行说明。“合欢”是指属于豆科含羞草亚科的落叶乔木植物(Albiziajulibrissin)。在将该合欢的树皮供于下述提取处理的情况下，可以直接本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于使时钟基因的表达变化的组合物，包含合欢树皮的水提取物作为有效成分。

【技术特征摘要】
2016.10.04 JP 2016-1964591.一种用于使时钟基因的表达变化的组合物，包含合欢树皮的水提取物作为有效成分。...

【专利技术属性】
技术研发人员：渡边卓巳，柴田重信，
申请(专利权)人：康贝株式会社，学校法人早稻田大学，
类型：发明
国别省市：日本,JP