利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法，其涉及的步骤为：（１）菌种选择；（２）斜面培养；（３）种子培养；（４）扩大培养；（５）收集发酵产物；（６）低分子量透明质酸分离；（７）乙醇沉淀；（８）产物干燥。本发明专利技术利用微生物转化胆固醇生成重要的甾体类药物的过程中，同时获得高附加值的低分子量透明质酸，工艺步骤简单，成本低，产率较高，具有重要的理论意义和极好的市场前景，能产生巨大的经济效益。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法，其特征在于，所述方法涉及的工艺步骤如下：　　　　（１）菌种选择：选用博德特氏菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ　　ｓｐ．）Ｂ４　　ＣＧＭＣＣ　　Ｎｏ．２２２９；　　　　（２）斜面培养：将上述菌种接种于固体斜面基本无机盐培养基上，２５～３７℃条件下，静止培养２４～７２小时；　　　　（３）种子培养：取步骤（２）培养后的菌株在无菌条件下用接种环接１～２环于２０～１００ｍＬ含有质量百分比为０．０１％～１．０％胆固醇的基本无机盐培养基中，２５～３７℃条件下，振荡培养２４～７２小时，制得种子液；　　　　（４）扩大培养：以体积百分比为２％～１０％的接种量，将上述种子液接种于５０～１０００ｍＬ含有质量百分比为０．１％～１．０％的胆固醇的基本无机盐培养基中，２５～３７℃条件下，振荡培养４８～１４４小时；　　　　（５）收集发酵产物：将步骤（４）所得的发酵液以２０００～８０００ｒｐｍ转速离心１０～３０分钟，收集上清液，上清液即含低分子量透明质酸；　　　　（６）低分子量透明质酸分离：将步骤（５）中获得的上清液利用超滤的方法浓缩至１～１０ｍｌ，通过离子交换层析获得含低分子量透明质酸的溶液；　　　　（７）乙醇沉淀：将步骤（６）中获得的含低分子量透明质酸的溶液用３倍体积的无水乙醇沉淀，收集沉淀即得低分子量透明质酸；　　　　（８）干燥：将步骤（７）中获得的低分子量透明质酸沉淀置于１００℃烘箱中干燥，得固体低分子量透明质酸。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋欣，林彦良，林建强，曲音波，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]