一株产较高热稳定性重组β－葡聚糖酶的基因工程菌及其构建制造技术

一株产较高热稳定性重组β－葡聚糖酶的基因工程菌及其构建，属于基因工程技术领域。本发明专利技术采用易错ＰＣＲ技术扩增高产β－葡聚糖酶的淀粉液化芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）ＳＹＢ－００１（ＺＬ．２００５１００３８４８８．８）专利菌株β－１，３－１，４－葡聚糖酶基因的开放阅读框序列，向其中随机引入突变，将改造后的基因插入到大肠杆菌表达载体ｐＥＴ２８ａ（＋）中，转化Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　　ｃｏｌｉ　　ＢＬ２１（ＤＥ３），构建重组子文库，经筛选，最终得到一株可以产较高热稳定性重组酶的突变株大肠埃希氏菌（Ｅ．ｃｏｌｉ　　ＢＬ２１（ＤＥ３）－ｐＥＴ２８ａ（＋）－ｂｇｌｔ１）ＣＧＭＣＣ　　Ｎｏ．２７４１。经酶学性质分析，ＣＧＭＣＣ　　Ｎｏ．２７４１最适温度为５５℃，在５０－５５℃下较稳定，各比出发菌ＳＹＢ－００１提高５℃。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一株产较高热稳定性重组β－葡聚糖酶的基因工程菌，其分类命名为大肠埃希氏菌（Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）－ｐＥＴ２８ａ（＋）－ｂｇｌｔ１），已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编码为ＣＧＭＣＣＮｏ．２７４１。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李崎，李永仙，郑飞云，刘春凤，顾国贤，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]