一株能产没食子酸的拟茎点霉菌制造技术

一株能产没食子酸的拟茎点霉菌，属于生物工程技术领域。本发明专利技术的菌株ＣＣＴＣＣ　　Ｎｏ：Ｍ２０８０１５是第一次在拟茎点霉属（Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ）中发现的能通过发酵法产没食子酸的菌株，其产物为现今多种药物原材料－没食子酸。为用微生物法生产没食子酸，从而保护环境，保护茶条槭植物资源，为没食子酸的工业化生产提供可能性。

【技术实现步骤摘要】
一株能产没食子酸的拟茎点霉菌
一株能产没食子酸的拟茎点霉菌(尸力07^;^^印.)，本专利技术涉及 一株微生物菌株，属于生物工程
技术背景没食子酸(Gallic Acid， GA)又叫3、 4、 5—三羟基苯甲酸、 五倍子。是从茶条槭(Acer ginnala Maxim)叶子中分离得到的天 然产物，是一种可用于医药、化工等生产的原料。在医药工业中，没 食子酸及其衍生物对冠心病、脑血栓、胃溃疡、抗菌、抗血吸虫、抗 病毒性肝炎、老年性痴呆、抗肿瘤等显示出多方面的功效；在化工、 轻工、食品等方面，没食子酸作为原料均有广泛的应用。没食子酸主要从茶条槭叶子中提取，茶条槭在我国主要分布在东 北山地、内蒙古及华北山地，长江流域也有生长，在黑龙江省主要分 布在小兴安岭、完达山、张广才岭等山区。虽然分布很广，但是数量 少、较星散、极少成林、且生长缓慢。由于长期掠夺式采叶方式已使 茶条槭基因资源遭到了很大浪费和破坏，原料的质量和数量很难得到 保证。目前商业用没食子酸由茶条槭叶片提取法生产，此方法缺憾是树 叶受季节限制，资源匮乏，每生产lg没食子酸，需800-1000kg叶子， 要采摘几千棵大树，而且威胁植物生存，现今市场对没食子酸的需求 量越来越大，仅黑龙江省每年就计划生产600吨，需茶条槭干叶7000 吨左右，现在的研究还是运用常规的育种技术，因此没食子酸的原料 保障就成为其是否能成功走向市场的最为关键因素。因而广辟生产途 径，解决没食子酸资源贫乏问题变得十分迫切。现将主要的研究集中在合成、半合成、组织培养和真菌研究、 栽培等方面。迄今为止，化学家们对没食子酸合成通过单宁水解、酶法转化等 手段来合成没食子酸，但是合成的成本过高，从生产的角度无实际意 义，没食子酸作为多种产品的原料须从天然物中取得，所以对天然资 源开发和生物工程利用处于没食子酸研究的核心地位。用微生物方法来生产没食子酸，操作简便、容易控制、成本低。 是最有应用前景的途径之一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株能产没食子酸的拟茎点霉菌，从而为 没食子酸的微生物发酵法工业生产创造条件，保护环境的同时保护树 种植物资源。为了达到上述目的，本专利技术在分析国内外药用植物内生真菌研究 结果的基础上，对茶条槭内生真菌进行了分离、鉴定及代谢产物分析， 筛选出高产没食子酸的内生真菌一一拟茎点霉属。本专利技术所采用的技术方案是取茶条槭茎段为外植体，经过表面 消毒后培养、分离、纯化得到单一菌种。然后通过经典分类和分子生 物学方法分类，确定其归属于拟茎点霉属(外0/^/^issp.);发酵培 养7天收集菌丝，最后用HPLC方法检测代谢物，证明该菌种含有没 食子酸。该微生物菌株的rRNA转录间区(internal transcribed spacer, ITS),序列片段506bp，序列为ACGCGCCCCA GGCGCACCCA GAAACCCTTT GTGAACTTAT ACCTTACTGT 50 TGCCTCGGCG CTAGCTGGTC CTCCGGGGCC CCTCCTTCTG GAGGAGCAGG 100 CACGCCGGCG GCCAACCCAA CTCTTGTTTT TACACTGAAA CTCTGAGCAC 150 AAAACATAAA TGAATCAAAA CTTTCAACAA CGGATCTCTT GGTTCTGGCA 2 00 TCGATGAAGA ACGCAGCGAA ATGCGATAAG TAATGTGAAT TGCAGAATTC 250 AGTGAATCAT CGAATCTTTG AACGCACATT GCGCCCTCTG GTATTCCGGA 300 GGGCATGCCT GTTCGAGCGT CATTTCAACC CTCAAGCCTG GCTTGGTGAT 350 GGGGCACTGC TTCTTACCCG AGAAGCAGGC CCTGAAATTC AGTGGCGAGC 4 00 TCGCCAGGAC CCCGAGCGCA GTAGTTAAAC CCTCGCTCTG GAAGGCCCTG 4 50 GCGGTGCCCT GCCGTTAAAC CCCCAACTTC TGAAAATTGA CCTCGGATCA 500 GTAGGA 506本专利技术的有益效果为没食子酸的工业化生产，为保护环境、保 护植物资源，提供一条新途径。本菌株是第一次从茶条槭中分离得内生真菌，产量可观，培养7天干菌内达到22. 57mg. g 、其能为没食子酸的工业化生产提供可能。 生物材料样品保藏-拟茎点霉属<formula>formula see original document page 5</formula>，保藏日期2008年 1月23日，保藏单位名称及简称中国典型培养物保藏中心CCTCC， 登记入册编号CCTCCNo:M208015。附图说明图l没食子酸标样液相色谱图 图2拟茎点霉菌CP0701液相色谱图权利要求1、一株产没食子酸的微生物菌株，其分类命名为拟茎点霉菌属(Phomopsis sp.)CP0701，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，登记入册编号CCTCC NoM208015。2、 根据权利要求l所述的微生物菌株，其为从茶条槭植物中分离 的内生真菌。3、 根据权利要求l所述的微生物菌株，其特征是产物为没食子酸。全文摘要一株能产没食子酸的拟茎点霉菌，属于生物工程
本专利技术的菌株CCTCC NoM208015是第一次在拟茎点霉属(Phomopsis)中发现的能通过发酵法产没食子酸的菌株，其产物为现今多种药物原材料——没食子酸。为用微生物法生产没食子酸，从而保护环境，保护茶条槭植物资源，为没食子酸的工业化生产提供可能性。文档编号C12P7/42GK101280279SQ20081006426公开日2008年10月8日 申请日期2008年4月9日 优先权日2008年4月9日专利技术者景天忠, 曾凡锁, 由香玲, 范桂枝, 詹亚光, 齐凤慧 申请人:东北林业大学;詹亚光;齐凤慧本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株产没食子酸的微生物菌株，其分类命名为拟茎点霉属ＣＰ０７０１（Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓｓｐ．ＣＰ０７０１），已保藏于中国典型培养物保藏中心，登记入册编号ＣＣＴＣＣＮｏ：Ｍ２０８０１５。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：詹亚光，齐凤慧，景天忠，曾凡锁，范桂枝，由香玲，
申请(专利权)人：东北林业大学，詹亚光，齐凤慧，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]