一种适于甲醇酵母表达的耐高温高比活细菌植酸酶基因制造技术
A high temperature and high ratio live bacterial phytase gene suitable for the expression of methanol yeast
The invention discloses a secretory expression of high temperature method to obtain high specific activity phytase gene in Pichia pastoris, the specific process is: 9 phytase gene from Jerson spp. first optimization for Pichia pastoris expression gene after gene family in vitro transformation, construction of the phytase gene mutant library the yeast expression library and high throughput screening, phytase gene YAPPA102 resistant to high temperature, the thermostable phytase gene YAPPA102 was cloned into Pichia pastoris expression vector, to achieve an efficient form of phytase. The expressed phytase has high temperature resistance and stable structure.
【技术实现步骤摘要】
一种适于甲醇酵母表达的耐高温高比活细菌植酸酶基因
本专利技术属于微生物基因工程领域，具体地说利用化学合成方法及基因家族改组技术，改造来源耶尔森菌的酸性植酸酶基因，使之能在毕赤酵母中高效表达，表达的植酸酶具有耐高温性，结构稳定。
技术介绍
禾谷类、豆科类及油料作物是人的食品和动物饲料中的主要原料。这些原料中虽含有大量的磷，但其中50%-70%是以植酸磷（六磷酸肌醇）的形式存在（Salunkhe1982，食品研究进展）。植酸酶能将植酸磷水解成肌醇和磷酸。单胃动物缺乏分解植酸磷所必需的酶，磷的利用率很低。在饲料中添加植酸酶可以提高植物性饲料中磷的利用率。开发植酸酶的直接原因来源于植酸带来的磷污染。一方面，植酸中螯合的磷无法吸收利用，另一方面则是必须在饲料和食品中添加大量无机磷，造成磷源浪费和环境污染（Cromwell1991，生物技术在食品工业中的应用进展）。随着养殖业的发展，无机磷的排泄量大幅度上升，磷污染遍及河流、山川和平原耕作地，直接威胁人类自身的生存。自80年代中期，欧洲就致力于寻找全面解决无机磷污染的方案(CouncilDirective91/676/EEC)...
【技术保护点】
一种编码如下的耐高温高比活植酸酶基因序列，SEQ ID NO.12所示，gctcctgtcg ctgctcctgt cactggttac actctggaga gagtcgtcat cctgtccaga 60cacggtgtta gaagtcctac taagcagact gagctgatga acgacgtcac tcctgacaag 120tggccacagt ggcctgttcc tgctggttat ctgactccta gaggtgctca gctggtcact 180ctgatgggtg gtttctacgg tgactacttc agaaaccag...
【技术特征摘要】
1.一种编码如下的耐高温高比活植酸酶基因序列，SEQIDNO.12所示，gctcctgtcgctgctcctgtcactggttacactctggagagagtcgtcatcctgtccaga60cacggtgttagaagtcctactaagcagactgagctgatgaacgacgtcactcctgacaag120tggccacagtggcctgttcctgctggttatctgactcctagaggtgctcagctggtcact180ctgatgggtggtttctacggtgactacttcagaaaccagggtctgctgcctgctggttgt240cctgctgacggtactctgtacgctcaggctgacatcgaccagagaactagactgactggt300caggctttcctggatggtatcgctcctggttgtggtctgaaggtccactaccaggctgac360ctgaagaagaatgatcctctgttccaccctgtcgaggctggtgtctgtcagctggactct420actcagactcacagagctatcgaggctcagtgcggtgctcctctgtctgagctgtctcag480agatacgctaagcctttcgctcagatgggtgagatcctgaacttcactgcttctccttac540tgcaagtctctccagcagcagggtaagtcttgcgacttcgctactttcgctgctaacgag600gtctgtgtcaaccaggggggtactaaggtctctctgtctggtcctctggctctgtcttct660actctgggtgaaatcttcctgctccagaactctcagggtatgcctgacgtcgcttggcac720agactgtctggtgctgagaactgggtctctctgctgtctctgcacaacgctcagttcga...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭日荷，姚泉洪，王荣谈，严培兰，王波，田永生，高建杰，李振军，许晶，付晓燕，韩红娟，王丽娟，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海,31
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