基因多态性检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基因多态性检测方法，可用于单碱基多态性、基因突变、单碱基插入或缺失、微卫星分析等。本方法是首先设计两对引物，其中一对为通常ＰＣＲ引物，用于扩增含有基因多态性位点的ＤＮＡ片段；另一对为锚定引物，用于判断基因多态性的类型。再将上述两对引物及一个与锚定引物的锚定部分序列相同的引物加入到含有底物及其它ＰＣＲ扩增反应试剂的溶液中，在单管中进行ＰＣＲ扩增反应，并使扩增反应产生与基因多态性相对应的ＤＮＡ扩增产物，然后以凝胶电泳法、或毛细管电泳法、或微流控芯片法，或高效液相色谱法等分离技术检测，根据扩增产物中ＤＮＡ片段的多少及链长判断基因多态性的类型。为提高延伸反应的特异性，在锚定引物的３’端区域人为地引入一个与模板不互补的碱基。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于一种快速检测基因组中基因多态性(如单碱基多态性、单碱基插入或缺失)的方法，具体说是一种通过设计不同的引物，在单管中进行PCR扩增反应，并使扩增反应产生与基因多态性相对应的DNA扩增产物，然后用电泳或色谱的方法进行分离，根据扩增产物中DNA片段的多少及链长判断基因多态性的类型。本专利技术的目的就是为了解决现有单管四引物基因多态性分析法存在的缺点，提出一种成本低、易于操作、特异性高、不需复杂优化步骤就能快速完成基因多态性测定的方法。本专利技术的技术解决方案一种用于快速检测基因多态性的方法，具有如下特征(a)根据所测样本靶序列设计两对引物，其中一对为锚定引物；(b)将上述两对引物及一个与锚定引物的锚定部分序列相同的引物加入到含有底物及其它PCR扩增反应试剂的溶液中，进行PCR扩增反应；(c)以适当的方法检测扩增产物中链长不同的DNA片断；(d)根据反应产物中DNA片断的多少及其长短判断基因多态性的类型。本专利技术与以往技术相比，具有以下优点(1)特异性高。因为对基因多态性引物进行了人工修饰。(2)可同时测定多个基因多态性位点。(3)低成本。因为可利用一个标记的通用引物完本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于快速检测基因多态性的方法，具有如下特征：（ａ）根据所测样本靶序列设计两对引物，其中一对为锚定引物；（ｂ）将上述两对引物及一个与锚定引物的锚定部分序列相同的引物加入到含有底物及其它ＰＣＲ扩增反应试剂的溶液中，进行ＰＣＲ扩增反应；（ｃ）以适当的方法检测扩增产物中链长不同的ＤＮＡ片断；（ｄ）根据反应产物中ＤＮＡ片断的多少及其长短判断基因多态性的类型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周国华，卜莹，张晓丹，伍小勇，古卓良，
申请(专利权)人：中国人民解放军南京军区联勤部军事医学研究所，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]