一种芯片原位聚合酶链反应检测目标基因的方法技术

一种利用基因芯片的检测方法，是在芯片表面进行原位ＰＣＲ反应对待测基因进行检测的方法。将普通ＰＣＲ反应中的上游引物连接ｐｏｌｙ（Ｔ）的臂结构后，５’端氨基修饰后连接于醛基修饰的玻片等载体上，在芯片表面上进行的一种芯片原位ＰＣＲ反应。利用本发明专利技术能有效解决目前基因芯片杂交中小片断探针和待测大片段不能有效杂交的问题，实现了样品处理和标记同步化和原位检测。本发明专利技术可用于ＳＮＰ检测、转基因植物检测、疾病检测等方面。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种芯片原位ＰＣＲ检测目标基因的方法，其特征在于根据目标基因设计一对特异性引物，上游引物的５’端连接有１５－２０个碱基长的多聚胸腺嘧啶结构，这种上游引物的５’端再经氨基修饰后点于醛基修饰的玻片上，然后以待测样品的基因组脱氧核糖核酸为模板，在芯片上进行原位ＰＣＲ反应，利用ＤＮＡ聚合酶的特异性来实现对特定目的片段的扩增，在引物延伸过程中加入地高辛标记的ｄＵＴＰ，随后采用传统酶标技术对延伸产物进行检测，使检测结果通过底物颜色呈现于尼龙膜或硝酸纤维膜表面，检测结果可直接目测或用廉价的光学扫描仪读取数据，从而实现样品的处理、标记同步化和原位检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵建龙，高秀丽，杨剑波，景奉香，
申请(专利权)人：中国科学院上海微系统与信息技术研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]