【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于大蒜病毒RT-PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于大蒜花叶病毒(GMV)、大蒜潜隐病毒(GCLV)的检测。 二、技术背景大蒜(Alliμm sativum L.)是我国一种重要的出口蔬菜。但大蒜属花粉败育型植物，生产中主要靠鳞茎进行无性繁殖。因此，病毒在大蒜营养器官中不断积累增殖造成品种退化，使产量和质量下降，严重影响我国大蒜的生产和出口。大蒜病毒病属于难治疗病害，迄今还没有一种有效的药物。大蒜花叶病毒病是大蒜花叶病毒(GMV，Garlic mosaic virus)侵染大蒜植株引起的病害，其田间植株症状呈现出显著黄色条纹花叶，叶片呈扭曲、折叠及萎缩状态，病毒粒子体为700～800μm，以鳞茎、汁液、蚜虫、蓟马及线虫等传毒。大蒜潜隐病毒病是大蒜潜隐病毒(GCLV，Garlic commonlatent virus)侵染大蒜植株引起的病害，其田间植株不表现出任何带毒症状，即无症带毒，并不影响产量但在自然条件下，该病毒多数与大蒜花叶病毒混合侵染大蒜植株，被侵染的病株常常呈现出系统花叶症状。病毒粒子体为580～720μm，以鳞茎、汁液和蚜虫等传...
【技术保护点】
一种大蒜病毒ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒，包括：反转录试剂盒，ＰＣＲ试剂盒及阳性对照三部份： １）反转录试剂盒，含有ＰＣＲ试剂管１和无ＲＮＡ酶的水，其中 ＰＣＲ试剂管１内含１０×ｂｕｆｆｅｒ，ｄＮＴＰ，ＭｇＣｌ↓［２］，ＲＮＡ酶抑制因子，ｏｌｉｇｏ－ｄＴ引物，反转录酶； ２）ＰＣＲ试剂盒，含有ＰＣＲ试剂管２、试剂Ａ及试剂Ｂ，其中 ＰＣＲ试剂管２内含１０×ＰＣＲ ｂｕｆｆｅｒ，ＭｇＣｌ↓［２］，ｄＮＴＰ，Ｔａｑ酶， 试剂Ａ内含引物ＧＭＶＰ１：５’－ＴＧＧＡＡＧＧＣＡＡＡＧＴＴＡＣＡＧＧＡＧＧ－３’ 引物ＧＭＶＰ２：５’－ＧＴＣＡＡＡＴＧＣＧＴ...
【技术特征摘要】
1.一种大蒜病毒RT-PCR检测试剂盒，包括反转录试剂盒，PCR试剂盒及阳性对照三部份1)反转录试剂盒，含有PCR试剂管1和无RNA酶的水，其中PCR试剂管1内含10×buffer，dNTP，MgCl2，RNA酶抑制因子，oligo-dT引物，反转录酶；2)PCR试剂盒，含有PCR试剂管2、试剂A及试剂B，其中PCR试剂管2内含10×PCR buffer，MgCl2，dNTP，Taq酶，试剂A内含引物GMVP15’-TGGAAGGCAAAGTTACAGGAGG-3’引物GMVP25’-GTCAAATGCGTACCGTGCGAGA-3’试剂B内含引物GCLVP15’-AGTTGCGACTGCTGAAGACC-3’，引物GCLVP25’-GCCATTACGCCTATTCCTAC-3’3)阳性对照，为从大蒜病叶中提取的，含有GMV、GCLV两种病毒RNA的RN...
【专利技术属性】
技术研发人员：侯喜林，张昌伟，史公军，王建军，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]
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