【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种分离纯化皮肤表皮干细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)首先取一块皮肤,置于含青链霉素的生理盐水中,用含青链霉素的PBS(一)冲洗,去血污及毛发;2)在解剖镜下将皮肤与皮下组织分开,将皮肤切成0.1~0.2×0.1~ 0.2cm↑[2]大小的小块,按表皮面朝上贴于玻璃平皿中,每皿3-4块,加培养基;培养基的配方为:Medium199+15~20%NBS即新生牛血清+5~8μg/mlinsulin(胰岛素)+0.5μg/ml氢化可的松+青链霉素100u /ml;3)置于CO↓[2]培养箱中培养,培养箱内的条件为5%CO↓[2],饱和湿度,37℃,每两天换液一次;4)经3天-4天后,从组织块边缘长出上皮样细胞铺路石样生长,7天-12天后,在上皮样细胞层上有小圆形细胞聚集呈克隆 样生长,待这些克隆直径达100-150μm时,在解剖镜下挑取这些克隆,用0.20%Trypsin即胰蛋白酶和0.02%EDTA适当处理,用玻璃针将这些细胞吸入铺有明胶的3.5cm塑料皿中,用无血清培养基培养;无血清培养基的配方为:F ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:杨学义,窦忠英,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:61[中国|陕西]
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