【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种鱼类基因原位修饰育种的方法,其特征在于,它包括下述步骤: 1)分离鱼的β-肌动蛋白基因启动调控序列、生长激素基因启动调控序列及其侧翼序列; 2)以鱼的基因中的所述生长激素基因启动调控序列作为同源重组的靶DNA片段; 3)通过同源重组将所述β-肌动蛋白基因启动调控序列替代所述生长激素基因启动调控序列; 4)构建同源重组载体: A)所述同源重组载体包括生长激素启动调控序列5′侧翼序列、生长激素启动调控序列3′侧翼序列、β-肌动蛋白基因启动调控序列、绿色荧光蛋白正向标记基因及两个同向的Cre/loxP序列、红色荧光蛋白负向标记基因; B)所述生长激素启动调控序列5′侧翼序列作为同源长臂,所述生长激素启动调控序列3′侧翼序列作为同源短臂; C)将所述两个同向的Cre/loxP序列分别置于所述绿色荧光蛋白正向标记基因的两侧,然后将所述绿色荧光蛋白正向标记基因置于所述同源长臂与所述同源短臂的内侧; D)将所述红色荧光蛋白负向标记基因置于所述同源长臂与所述同源短臂的外侧; E)经限制性内切酶消化,得到线性重组DNA片段; 5)鱼进行人工 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:吴玉萍,朱作言,胡炜,徐安龙,
申请(专利权)人:中山大学,中国科学院水生生物研究所,
类型:发明
国别省市:44[中国|广东]
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