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快速检测细小脲原体的荧光定量PCR试剂盒制造技术

技术编号:1754836 阅读:452 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种快速检测细小脲原体的荧光定量PCR试剂盒,涉及一种性传播疾病病原体基因检测技术,适用于细小脲原体定性定量检测。本发明专利技术由DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、标准阳性模板pU-UP、阴性质控标准品组成;荧光定量PCR反应液含有细小脲原体特异性引物对和荧光探针。本发明专利技术特异性好,灵敏度高,定量精确,快速简便,可重复性高,可以对细小脲原体的全部4个血清型进行定性定量检测,可以替代传统的培养法,同时该试剂盒可以用于鉴别区分细小脲原体和解脲脲原体。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速检测细小脲原体的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于:由DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、标准阳性模板pU-UP、阴性质控标准品组成;荧光定量PCR反应液含有细小脲原体特异性引物对和荧光探针;正向引物为5′-CATTG ATGTTGCACAAGGAGAAA-3′,反向引物为5′-TTAGCACCAACATAAGGAGCTAAATC-3′;荧光探针序列为5′-TTGACCACCCTTACGAG-3′,荧光探针5′端标记报告荧光基团FA M,3′端标记不发光的淬灭基团标记,并连接小型凹槽结合物-MGB基团,标准阳性模板pU-UP是含有细小脲原体高度保守基因-脲酶基因的111个碱基对的核苷酸片段构成的pUCm-T载体,该载体在大肠杆菌DH5α中增殖;所述的PCR即聚合 酶链式反应,所述的UP即细小脲原体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:曹轩王业富
申请(专利权)人:武汉大学
类型:发明
国别省市:83[中国|武汉]

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