半滑舌鳎雌性特异AFLP片段及遗传性别鉴定的PCR方法技术

一种半滑舌鳎雌性特异ＡＦＬＰ片段及遗传性别鉴定的ＰＣＲ方法，包括雌性特异ＡＦＬＰ片段的回收、ＡＦＬＰ片段的克隆、序列分析以及半滑舌鳎遗传性别鉴定的ＰＣＲ方法；建立了分离和克隆半滑舌鳎雌性特异ＡＦＬＰ片段的技术，获得了雌性特异ＤＮＡ片段，设计了特异的引物，将ＡＦＬＰ标记转化成ＳＣＡＲ标记，创建了半滑舌鳎遗传性别鉴定的ＰＣＲ技术。本发明专利技术首次分离到半滑舌鳎雌性特异的ＤＮＡ片段，查明了其ＤＮＡ序列，建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的ＰＣＲ分析技术。本发明专利技术具有先进、高效、准确、可靠的特点，在半滑舌鳎性别控制和单性苗种生产中具有重要应用价值，同时在其它鱼类遗传性别鉴定和性别控制研究中也具有应用前景。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种半滑舌鳎雌性特异ＡＦＬＰ片段的克隆与序列分析，其特征在于它的技术内容包括如下三个方面：１）雌性特异ＡＦＬＰ片段的回收；２）雌性特异ＡＦＬＰ片段的克隆；３）雌性特异ＡＦＬＰ片段的序列分析：１）、雌性特异ＡＦＬＰ片段的回收： 选取能扩增出３８２ｂｐ雌性特异ＡＦＬＰ条带的引物组合，进行ＡＦＬＰ扩增，扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，用刀片切下含有３８２ｂｐ雌性特异ＤＮＡ条带的聚丙烯酰胺凝胶，溶解后回收目的片段备用；２）、雌性特异ＡＦＬＰ片段的克隆：　 　将回收的雌性特异ＡＦＬＰ片段，克隆到ｐＭＤ１８－Ｔ载体中，采用标准的方法进行连接和转化，采...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈松林，李静，田永胜，沙珍霞，王清印，庄志猛，徐建勇，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院黄海水产研究所，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]