细胞结构体及细胞结构体的制造方法技术

本发明专利技术的课题在于提供一种能够在短时间内制造，并且具有规定以上的大小的细胞结构体及上述细胞结构体的制造方法。根据本发明专利技术，提供一种细胞结构体，该细胞结构体包含生物相容性高分子嵌段物及两种以上的细胞，且在多个细胞之间的间隙配置有多个生物相容性高分子嵌段物，其中，两种以上的细胞包含选自包括血管内皮细胞、心肌细胞、胰岛细胞、肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、角膜上皮细胞及视网膜色素上皮细胞的组中的至少一种第一细胞和选自包括间充质细胞、基质细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、成肌细胞、间充质干细胞、脂肪来源干细胞及脐带来源干细胞的组中的至少一种第二细胞。

The manufacturing method of cell structure and cell structure

The subject of the invention is to provide a cell structure capable of being manufactured in a short time and having a specified size, and a manufacturing method of the cell structure. According to the invention, a cell structure, the cell structure comprising a biocompatible polymer block and more than two kinds of cells, and the gap between a plurality of cell configuration with a plurality of biocompatible polymer block copolymer, which contains more than two kinds of cells, including endothelial cells selected from and the myocardial cells, islet cells, liver cells, epithelial cells, endothelial cells, nerve cells, embryonic stem cells, induced pluripotent stem cells, corneal epithelial cells and retinal pigment epithelial cells in the group of at least one selected from the group consisting of cells and mesenchymal cells, including stromal cells, fibroblasts, smooth muscle cells, myoblasts, mesenchymal stem cells, adipose derived stem cells and umbilical cord derived stem cells in the group of at least a second cell.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞结构体及细胞结构体的制造方法
本专利技术涉及一种细胞结构体及细胞结构体的制造方法。
技术介绍
目前，实现陷入功能障碍或功能不全的生物组织、器官的再生的再生医疗的实用化正在发展中。再生医疗为使用细胞、脚手架及生长因子这三因子将无法仅靠生物所具有的自然治愈能力恢复的生物组织再次制作成与原来的组织相同的形态或功能的新医疗技术。近年来，逐渐实现使用细胞的治疗。例如，可列举使用了自体细胞的培养表皮、使用了自体软骨细胞的软骨治疗、使用了间充质干细胞的骨再生治疗、使用了成肌细胞的心肌细胞片治疗、基于角膜上皮片的角膜再生治疗及神经再生治疗等。这些新治疗与以往的基于人造物的替代医疗(例如，人造骨填补剂和透明质酸注射等)不同，实现生物组织的修复、再生，且得到较高的治疗效果。实际上，使用了自体细胞的培养表皮和培養软骨等产品已经上市。专利文献1中记载有一种细胞结构体，该细胞结构体包含具有生物相容性的高分子嵌段物和细胞，且在上述多个细胞之间的间隙配置有多个上述高分子嵌段物。专利文献1中所记载的细胞结构体中，能够从外部向细胞结构体的内部传递营养，且具有充分的厚度，并且细胞在结构体中均匀存在。专利文献1的实施例中，使用由重组明胶或天然明胶原材料组成的高分子嵌段物证实高细胞生存活性。并且，专利文献2中记载有一种细胞移植用细胞结构体，该细胞移植用细胞结构体包含具有生物相容性的高分子嵌段物和至少一种细胞，且在上述多个细胞之间的间隙配置有多个上述高分子嵌段物。而且，专利文献3中记载有一种细胞移植用细胞结构体，该细胞移植用细胞结构体包含不含有戊二醛的生物相容性高分子嵌段物和至少一种细胞，且在多个细胞之间的间隙配置有多个生物相容性高分子嵌段物，其中，生物相容性高分子嵌段物的振实密度为10mg/cm3以上且500mg/cm3以下，或者高分子嵌段物的二维截面像中的截面积的平方根÷周围长度值为0.01以上且0.13以下。现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开WO2011/108517号专利文献2：日本特开2014-12114号公报专利文献3：国际公开WO2014/133081号
技术实现思路
专利技术要解决的技术课题当制造专利文献1～3中所记载的细胞结构体时，有时期待根据所使用的细胞的种类进一步缩短构建所希望大小的细胞结构体的时间，或期待形成更低的立体形状细胞结构体。本专利技术的课题在于能够在短时间内制造，并且具有规定以上的大小的细胞结构体。而且，本专利技术应解决的课题在于提供上述细胞结构体的制造方法。用于解决技术课题的手段本专利技术人等为了解决上述课题而进行深入研究的结果，在包含生物相容性高分子嵌段物和细胞，且在多个细胞之间的间隙配置有多个生物相容性高分子嵌段物的细胞结构体中，通过作为上述细胞组合使用在细胞结构体的形成中相对花费时间的第一细胞和对基材的粘附力强且易形成细胞块的第二细胞，在短时间内成功制造了具有规定以上的大小的细胞结构体。本专利技术是基于这些见解而完成的。即，根据本专利技术，可提供以下专利技术。(1)一种细胞结构体，该细胞结构体包含生物相容性高分子嵌段物和两种以上的细胞，且在多个上述细胞之间的间隙配置有多个上述生物相容性高分子嵌段物，其中，上述两种以上的细胞包含选自包括血管内皮细胞、心肌细胞、胰岛细胞、肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、角膜上皮细胞及视网膜色素上皮细胞的组中的至少一种第一细胞和选自包括间充质细胞、基质细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、成肌细胞、间充质干细胞、脂肪来源干细胞及脐带来源干细胞的组中的至少一种第二细胞。(2)根据(1)所述的细胞结构体，其中，上述第一细胞与上述第二细胞的细胞数的比率为9:1～1:99。(3)根据(1)或(2)所述的细胞结构体，其中，上述生物相容性高分子嵌段物的大小为10μm以上且300μm以下。(4)根据(1)至(3)中任一项所述的细胞结构体，其中，厚度或直径为400μm以上且3cm以下。(5)根据(1)至(4)中任一项所述的细胞结构体，其中，上述生物相容性高分子嵌段物的振实密度为10mg/cm3以上且500mg/cm3以下。(6)根据(1)至(5)中任一项所述的细胞结构体，其中，上述生物相容性高分子嵌段物中，交联有生物相容性高分子。(7)根据(6)所述的细胞结构体，其中，上述生物相容性高分子嵌段物的交联度为2以上，并且上述生物相容性高分子嵌段物的吸水率为300％以上。(8)根据(1)至(7)中任一项所述的细胞结构体，其中，上述生物相容性高分子嵌段物为通过对含有生物相容性高分子的固体物质进行粉碎而得到的生物相容性高分子嵌段物。(9)根据(8)所述的细胞结构体，其中，上述固体物质为对含有生物相容性高分子的水溶液进行冷冻干燥而得到的固体物质。(10)根据(1)至(9)中任一项所述的细胞结构体，其中，每一个细胞含有0.0000001μg以上且1μg以下的生物相容性高分子嵌段物。(11)根据(1)至(10)中任一项所述的细胞结构体，其中，生物相容性高分子为重组明胶。(12)根据(11)所述的细胞结构体，其中，重组明胶由下述式表示，式：A-[(Gly-X-Y)n]m-B式中，A表示任意氨基酸或氨基酸序列，B表示任意氨基酸或氨基酸序列，n个X分别独立地表示氨基酸中的任一种，n个Y分别独立地表示氨基酸中的任一种，n表示3～100的整数，m表示2～10的整数，另外，n个Gly-X-Y可以彼此相同，也可以不同。(13)根据(11)或(12)所述的细胞结构体，其中，重组明胶为如下中的任一个：由序列号1中所记载的氨基酸序列组成的肽；由序列号1中所记载的氨基酸序列中缺失、替换或添加有一个或多个氨基酸的氨基酸序列组成，并且具有生物相容性的肽；或由具有与序列号1中所记载的氨基酸序列80％以上相同序列的氨基酸序列组成，并且具有生物相容性的肽。(14)根据(1)至(13)中任一项所述的细胞结构体，其中，上述第一细胞为血管内皮细胞或肝细胞，上述第二细胞为成纤维细胞、平滑肌细胞或间充质干细胞。(15)一种细胞结构体的制造方法，该细胞结构体为(1)至(14)中任一项所述的细胞结构体，该制造方法包括对生物相容性高分子嵌段物与含有两种以上的细胞的培养液的混合物进行孵育，其中，上述两种以上的细胞包含选自包括血管内皮细胞、心肌细胞、胰岛细胞、肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、角膜上皮细胞及视网膜色素上皮细胞的组中的至少一种第一细胞和选自包括间充质细胞、基质细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、成肌细胞、间充质干细胞、脂肪来源干细胞及脐带来源干细胞的组中的至少一种第二细胞。(16)根据(15)所述的方法，其中，上述含有两种以上的细胞的培养液中的上述第一细胞与上述第二细胞的细胞数的比率为9:1～1:99。专利技术效果本专利技术的细胞结构体能够在短时间内制造，并且具有规定以上的大小。并且，根据本专利技术的细胞结构体的制造方法，能够在短时间内制造具有规定以上的大小的细胞结构体。附图说明图1表示实施例的条件A的液温分布。图2表示实施例的条件B的液温分布。图3表示实施例的条件C的液温分布。图4表示HepG2细胞(人肝癌来源细胞)和hMSC(人骨髓来源间充质干细胞)的镶嵌细胞块的形成。图5表示HepG2细胞(人肝癌来源细胞)和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞结构体，该细胞结构体包含生物相容性高分子嵌段物和两种以上的细胞，且在多个所述细胞之间的间隙配置有多个所述生物相容性高分子嵌段物，其中，所述两种以上的细胞包含选自包括血管内皮细胞、心肌细胞、胰岛细胞、肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、角膜上皮细胞及视网膜色素上皮细胞的组中的至少一种第一细胞和选自包括间充质细胞、基质细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、成肌细胞、间充质干细胞、脂肪来源干细胞及脐带来源干细胞的组中的至少一种第二细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.10 JP 2015-1385461.一种细胞结构体，该细胞结构体包含生物相容性高分子嵌段物和两种以上的细胞，且在多个所述细胞之间的间隙配置有多个所述生物相容性高分子嵌段物，其中，所述两种以上的细胞包含选自包括血管内皮细胞、心肌细胞、胰岛细胞、肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、角膜上皮细胞及视网膜色素上皮细胞的组中的至少一种第一细胞和选自包括间充质细胞、基质细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、成肌细胞、间充质干细胞、脂肪来源干细胞及脐带来源干细胞的组中的至少一种第二细胞。2.根据权利要求1所述的细胞结构体，其中，所述第一细胞与所述第二细胞的细胞数的比率为9:1～1:99。3.根据权利要求1或2所述的细胞结构体，其中，所述生物相容性高分子嵌段物的大小为10μm以上且300μm以下。4.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞结构体，其中，厚度或直径为400μm以上且3cm以下。5.根据权利要求1至4中任一项所述的细胞结构体，其中，所述生物相容性高分子嵌段物的振实密度为10mg/cm3以上且500mg/cm3以下。6.根据权利要求1至5中任一项所述的细胞结构体，其中，所述生物相容性高分子嵌段物中，交联有生物相容性高分子。7.根据权利要求6所述的细胞结构体，其中，所述生物相容性高分子嵌段物的交联度为2以上，并且所述生物相容性高分子嵌段物的吸水率为300％以上。8.根据权利要求1至7中任一项所述的细胞结构体，其中，所述生物相容性高分子嵌段物为通过对含有生物相容性高分子的固体物质进行粉碎而得到的生物相容性高分子嵌段物。9.根据权利要求8所述的细胞结构体，其中，所述固体物质为对含有生物相容性高分子的水溶液进行冷冻干燥而得到的固体物质。10.根据权利要求1至9中任一项所述的细胞结构体，其中，每一个细胞含...

【专利技术属性】
技术研发人员：中村健太郎，
申请(专利权)人：富士胶片株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP