甘蓝型油菜种子高油酸含量的分子标记方法及应用技术

本发明专利技术公开了甘蓝型油菜种子高油酸含量的分子标记方法及应用,属于作物分子育种领域涉及一种甘蓝型油菜种子高油酸含量的CAPS(切割片段长度多态性，CleavedAmplified Polymorphic Sequences)标记。本发明专利技术基于甘蓝型油菜种子高油酸含量控制基因BnFad2的突变位点，开发出有实用价值的CAPS标记并利用该标记进行单株基因型鉴定和高油酸株系筛选。本发明专利技术开发的CAPS标记适用于各分离世代筛选高油酸基因型与株系，准确快速高效，十分有利于高油酸油菜品种的MAS(标记辅助选择，Marker‑Assisted Selection)育种。

Molecular marker method and application of high oleic acid content in Brassica napus seed

【技术实现步骤摘要】
甘蓝型油菜种子高油酸含量的分子标记方法及应用
本专利技术涉及甘蓝型油菜种子高油酸含量的分子标记方法及应用，属于作物分子育种领域。本专利技术开发的CAPS分子标记可以对高油酸甘蓝型油菜株系进行选择，为培育高油酸油菜新品种服务。
技术介绍
油菜是世界上最重要的油料作物之一，近年来全球范围内菜籽油的年产量约为700万吨，仅次于大豆(USDA.http://www.ers.usda.gov/data-products/oil-crops-yearbook.aspx.2017)。正如其它任何一种植物油一样，菜籽油的脂肪酸组成是决定其使用方式和范围的关键特征。经过双低化(低芥酸和低硫苷)改良以后，一般而言菜籽油的脂肪酸组成为～7％的饱和脂肪酸(软脂酸C16:0和硬脂酸C18:0)、～61％的油酸(C18:1)、～11％的亚油酸(C18:2)和～21％的亚麻酸(C18:3)。高油酸(一般指油酸含量>75％)与其相比，具有几个明显优势：(1)较好的抗氧化能力，可使菜籽油具有更长的货架期同时也可避免氢化过程；(2)可以减低低密度脂蛋白，有利于心脑血管的人群；(3)与橄榄油具有几乎相同的脂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘蓝型油菜种子高油酸含量的CAPS标记方法，其特征在于,针对以下至少一个油菜种子高油酸含量的BnFad2基因核苷酸突变位点：(1)位于BnFad2同源基因BnFad2‑1核苷酸序列316处G至A的置换，即：G316A，突变基因命名为BnFad2‑1H；(2)位于BnFad2同源基因BnFad2‑2核苷酸序列908处G至A的置换，即：G908A,突变基因命名为BnFad2‑2H。采用以下至少一对引物：针对BnFad2‑1中G316位点的上、下游引物，序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；针对BnFad2‑2中G908位点的上、下游引物，序列分别如SEQ ID NO：3...

【技术特征摘要】
1.一种甘蓝型油菜种子高油酸含量的CAPS标记方法，其特征在于,针对以下至少一个油菜种子高油酸含量的BnFad2基因核苷酸突变位点：(1)位于BnFad2同源基因BnFad2-1核苷酸序列316处G至A的置换，即：G316A，突变基因命名为BnFad2-1H；(2)位于BnFad2同源基因BnFad2-2核苷酸序列908处G至A的置换，即：G908A,突变基因命名为BnFad2-2H。采用以下至少一对引物：针对BnFad2-1中G316位点的上、下游引物，序列分别如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示；针对BnFad2-2中G908位点的上、下游引物，序列分别如SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所示；扩增编码甘蓝型油菜油酸去饱和酶FAD2即BnFad2基因的核苷酸序列片段，并选择相应的限制性内切酶对PCR扩增产物进行酶切，可以标记油菜种子高油酸含量的BnFAD2基因核苷酸SNP突变位点。2.根据权利要求1所述的一种甘蓝型油菜种子高油酸含量的CAPS标记方法，其特征在于，能够对PCR产物进行酶切的限制性内切酶为，其中针对BnFad2-1的突变位点选择BssSI酶，针对BnFad2-2的突变位点选择HinfI酶。3.权利要求1或2所述一种甘蓝型油菜种子高油酸含量的CAPS标记方法的应用。4.权利要求1或2所述一种甘蓝型油菜种子高油酸含量的CAPS标记方法在各分离世代筛选高油酸基因型与株系的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，(1)通过权利要求1所述针对特定同源基因BnFad2突变位点设计的特异引物，利用PCR扩增出仅含有特定BnFad2同源基因中突变位点的片段；(2)选择相应的限制性...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙卫华，浦惠明，高建芹，胡茂龙，张洁夫，陈松，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32