准确鉴定鲶和大口鲶的试剂盒及其鉴定方法技术

本发明专利技术提供了一种准确鉴定鲶和大口鲶的试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括ＤＮＡ提取试剂，包括试剂１、试剂２、试剂３、试剂４和试剂５；聚合酶链式反应试剂，包括反应预混试剂６和试剂７；电泳和显色试剂，包括试剂８、试剂９、试剂１０和试剂１１。本发明专利技术特别提供一对特异引物ＮＳ和ＮＡ，利用该对引物进行ＰＣＲ扩增反应可准确鉴定鲶和大口鲶，特点是准确、批量、对鉴定鱼损伤轻，不会导致被鉴定活鱼死亡。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种准确鉴定鲶和大口鲶的试剂盒，包括ＤＮＡ提取试剂、聚合酶链式反应试剂、电泳和显色试剂：（ａ）ＤＮＡ提取试剂，包括试剂１：ＤＮＡ提取缓冲液：１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ，ｐＨ８．０；２ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ，ｐＨ８ ．０；０．４ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ，１％ＳＤＳ；试剂２：蛋白酶Ｋ２０ｍｇ／ｍＬ；试剂３：氯化钠６ｍｏｌ／Ｌ；试剂４：异丙醇；试剂５：７０％乙醇；（ｂ）聚合酶链式反应试剂：包括反应预混试剂６和试剂７；　 　试剂６：含有１０倍聚合酶链式反应缓冲液，其中含ＭｇＣｌ↓［２］１５ｍＭ，２．５μｌ；特异引物ＮＳ０．５－０．７５μｌ，１０μＭ和ＮＡ０．５－０．７５μｌ，１０μＭ、四种脱氧核苷酸的混合物０．５μｌ，每种１０μＭ和灭菌双蒸水１９．３７５ －２０．３７５μｌ；试剂７：Ｔａｑ酶，５Ｕ／μｌ；（ｃ）电泳和显色试剂，包括试剂８、试剂９、试剂１０和试剂１１；试剂８：为５０倍电泳缓冲液，含三羟基甲基氨基甲烷－乙酸和乙二胺四乙酸，浓度分别为０．０４Ｍ和０．００１Ｍ ；试剂９：为凝胶加样缓冲液，含ｗ／ｖ为４０％的蔗糖和０．２５％的溴酚蓝和二甲苯青ＦＦ；试剂１０：电泳级琼脂糖；试剂１１：溴化乙锭，０．５μｇ／μｌ；。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张其中，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]