一种检测山羊催乳素基因单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测山羊催乳素（ＰＲＬ）基因单核苷酸多态性（ＳＮＰ）的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性）方法，该方法是以山羊基因组ＤＮＡ或包含ＰＲＬ基因的ＤＮＡ序列为模板，在Ｔａｑ　　ＤＮＡ聚合酶、Ｂｕｆｆｅｒ（缓冲环境）、Ｍｇ↑［＋＋］、ｄＮＴＰｓ存在的情况下，利用１对ＰＣＲ（聚合酶链式反应）引物，在ＰＣＲ条件下进行扩增，然后利用限制性内切酶对其进行酶切，再根据琼脂糖凝胶电泳对其进行片段大小分离，利用凝胶成像系统分析其片段大小，从而确定其单核苷酸多态性。该方法操作简单、快速，成本低，而且检测的精确度高，便于推广应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测山羊催乳素基因单核苷酸多态性的聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性方法，其特征在于，以山羊基因组ＤＮＡ或包含ＰＲＬ基因的ＤＮＡ序列为模板，在ＴａｑＤＮＡ聚合酶、缓冲环境、Ｍｇ↑［＋＋］、ｄＮＴＰｓ存在的情况下，利用一对聚合酶链式 反应引物，在ＰＣＲ条件下进行扩增，然后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，再通过电泳检测即可鉴定山羊催乳素基因单核苷酸多态性；所述的聚合酶链式反应引物包括：上游引物：Ｆｏｒｗａｒｄｐｒｉｍｅｒ：５′－ＡＴＴＣＣＴＧＧＡＧ ＣＣＡＡＡＧＡＧ－３′；下游引物：Ｒｅｖｅｒｓｅｐｒｉｍｅｒ：５′－ＴＧＴＧＧＧＣＴＴＡＧＣＡＧＴＴＧＴ－３′。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：蓝贤勇，陈宏，潘传英，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]