传染性法氏囊病病毒超强毒的检测制造技术

提供了鉴定动物感染ｖｖＩＢＤＶ的方法。该方法包括使获自动物的核酸样品或从动物扩增ＲＮＡ获得的核酸产物与一种或多种探针对接触，其中每个探针对都包括一个突变探针与一个锚定探针，然后确定任何杂交复合物的解链温度，该杂交复合物是当一个或多个探针对与样品中的核酸杂交时形成的。这种测定是使用ＦＲＥＴ分析进行。在一个实施方案中，突变探针含有与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１的第一个突变靶序列或其反向互补物相同的序列，其中８２７位的胞嘧啶置换为胸腺嘧啶，８３０位的胞嘧啶置换为胸腺嘧啶，而且８３３位的胸腺嘧啶置换为胞嘧啶。在另一个实施方案中，突变探针含有与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１的第二个突变靶序列相同的序列，其中８９７位的鸟嘌呤置换为腺嘌呤，９０５位的胞嘧啶置换为胸腺嘧啶，而且９０８位的胞嘧啶置换为胸腺嘧啶。这里还提供了含有可用于本发明专利技术的核苷酸探针对的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

【技术保护点】
一种鉴定动物感染传染性法氏囊病病毒超强毒（ｖｖＩＢＤＶ）的方法，所述方法包括　　　　使核酸试验样品与设计用来与含有ｖｖＩＢＤＶ的ＶＰ２基因的有义链的８２７位核苷酸到８３３位核苷酸的第一个突变靶序列或其反向互补物杂交的第一突变探针接触，并与设计用来与第一个突变靶序列上游的０到５个核苷酸的第一锚定序列杂交的第一锚定探针接触；　　　　其中核酸试验样品是获自动物的双链ＲＮＡ，来源于双链ＲＮＡ的ｃＤＮＡ，双链ＲＮＡ的单链，或ｃＤＮＡ的单链，或其任何组合；　　　　其中第一突变探针的长度为１２个或更多个核苷酸，而且含有序列ＴＡＡＴＡＴＣ，ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２，或其反向互补物；　　　　其中第一锚定探针长度为１２个或更多个核苷酸，而且其从它的互补序列解离的温度，比第一突变探针从它的互补序列解离的温度至少高４℃；和　　　　其中第一突变探针和第一锚定探针在下面的条件下与核酸试验样品接触，该条件为允许第一突变探针与第一锚定探针与ｖｖＩＢＤＶ的ＶＰ２基因的一条链或另一条链杂交，以提供第一杂交复合物；和　　　　确定第一突变探针从第一个杂交复合物解离的温度；　　　　其中第一突变探针与第一锚定探针中的一个用受体荧光团标记，第一突变探针与第一锚定探针的另一个用荧光能量转移对的供体荧光团标记；　　　　其中第一杂交复合物的形成和第一杂交复合物的解离通过荧光共振能量转移（ＦＲＥＴ）分析确定，和　　　　其中第一突变探针从第一杂交复合物解离的温度，高于第一突变探针从ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１解离的温度，或者在第一突变探针从它的互补序列解离的温度的４℃范围内，二者都表明该动物感染ｖｖＩＢＤＶ。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：DJ杰克伍德，
申请(专利权)人：俄亥俄州州立大学研究基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]