细菌革兰双检实时荧光定量ＰＣＲ检测试剂盒及用途制造技术

本发明专利技术提供一种革兰双检实时荧光定量ＰＣＲ检测试剂盒，由定量ＰＣＲ反应液１、革兰阳性标准品２、革兰阴性标准品３、阳性对照品４、阴性对照品５、细菌ＤＮＡ抽提裂解液６、盒体８组成。盒体８设有容器孔，分别放置ＰＣＲ反应液管、标准品、对照品、细菌ＤＮＡ抽提裂解液。本发明专利技术试剂盒设计合理，运用实时荧光定量ＰＣＲ技术，采用细菌通用引物和革兰阴、阳性双特异荧光探针，通过实时荧光定量，不仅进行细菌革兰阴、阳性菌分型，而且对检测的阴、阳性菌进行实时准确定量，可在检测细菌革兰阴、阳性菌ＤＮＡ中应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
细菌革兰双检实时荧光定量ＰＣＲ检测试剂盒，其特征是由定量ＰＣＲ反应液（１）、革兰阳性标准品（２）、革兰阴性标准品（３）、阳性对照品（４）、阴性对照品（５）、细菌ＤＮＡ抽提裂解液（６）、盒体（８）组成，盒体（８）设有容器孔，分别放置ＰＣＲ反应液管（１）、革兰阳性标准品（２）、革兰阴性标准品（３）、阳性对照品（４）、阴性对照品（５）、细菌ＤＮＡ抽提裂解液（６），ＰＣＲ反应液（１）由单管分装，矩阵排列，其中定量ＰＣＲ反应液（１）含有ＰＣＲ缓冲液、ＭｇＣｌ↓［２］、ｄＮＴＰｓ、细菌检测用上游引物、检测用下游引物、荧光探针、耐热ＤＮＡ聚合酶，其中：上游引物序列为：５′－ＣＡＡＣＧＣＧＡＡＧＡＡＣＣＴＴＡＣＣ－３′下游引物序列为：５′－ＡＣＧＴＣＡＴＣＣＣＣＡＣＣＴＴＣＣ－３′。革兰阳性探针为：５′－ＦＡＭ－ＡＣＧＡＣＡＡＣＣＡＴＧＣＡＣＣＡＣＣＴＧ－ＴＡＭＲＡ－３′革兰阴性探针为：５′－ＨＥＸ－ＣＡＡＣＡＴＴＴＣＡＣＡＡＣＡＣＧＡＧＣＴＧ－ＴＡＭＲＡ－３′革兰阳性标准品序列为：ＣＡＡＣＧＣＧＡＡＧＡＡＣＣＴＴＡＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＡＣＡＴＣＣＴＴＴＧＡＣＡＡＣＴＣＴＡＧＡＧＡＴＡＧＡＧＣＣＴＴＣＣＴＣＴＴＣＧＧＧＧＧＡＣＡＡＡＧＴＧＡＣＡＧＧＴＧＧＴＧＣＡＴＧＧＴＴＧＴＣＧＴＣＡＧＣＴＣＧＴＧＴＣＧＴＧＡＧＡＴＧＴＴＧＧＧＴＴＡＡＧＴＣＣＣＧＣＡＡＣＧＡＧＣＧＣＡＡＣＣＣＴＴＡＡＧＣＴＴＡＧＴＴＧＣＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＡＡＧＴＴＧＡＣＴＧＣＣＧＧＴＧＡＣＡＡＡＣＣＧＧＡＧＧＡＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＧＡＣＧＴ革兰阴性标准品序列为：ＣＡＡＣＧＣＧＡＡＧＡＡＣＣＴＴＡＣＣＴＧＧＴＣＴＴＧＡＣＡＴＣＣＡＣＡＧＡＡＣＴＴＴＣＣＡＧＡＧＡＴＧＧＡＴＴＧＧＴＧＣＣＴＴＣＧＧＧＡＡＣＴＧＴＧＡＧＡＣＡＧＧＴＧＣＴＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＣＧＴＣＡＧＣＴＣＧＴＧＴＴＧＴＧＡＡＡＴＧＴＴＧＧＧＴＴＡＡＧＴＣＣＣＧＣＡＡＣＧＡＧＣＧＣＡＡＣＣＣＴＴＡＴＣＣＴＴＴＧＴＴＧＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＧＣＣＧＧＧＡＡＣＴＣＡＡＡＧＧＡＧＡＣＴＧＣＣＡＧＴＧＡＴＡＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＧＧＴＧＧＧＧＡＴＧＡＣＧＴ其中细菌ＤＮＡ抽提裂解液含有１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉ－ＨＣｌ、ｐＨ７．６、５ｍｍｏｌ／Ｌ乙二胺四乙酸二钠、０．５％十二烷基硫酸钠。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴亦栋，尚世强，赵正言，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]