一种广地龙蚓苗个体及种群质量评价方法技术

本发明专利技术公开了一种广地龙蚓苗个体及种群质量评价方法。本发明专利技术的广地龙蚓苗个体质量评价方法，包括以下步骤：观察广地龙个体完整度、体色以及生殖环带，测量广地龙个体重量、体长、生殖环带直径和活力；若广地龙个体完整，背部棕褐色至紫灰色、腹部浅黄棕色，生殖环带未明显，且同时满足广地龙个体重量≥4.0g，体长≥9.0cm，生殖环带直径≥4.5mm和活力≥35.0s，则判断该广地龙个体为合格广地龙蚓苗。本发明专利技术的评价方法可以用于广地龙蚓苗采收和蚓苗投放，促进广地龙养殖业的发展。本发明专利技术评价方法科学、操作简便。

A method for evaluating the quality of individual and population of vermis

The invention discloses a method for evaluating the quality of the individual and the population of the vermis. Earthworm Pheretima seedling individual quality evaluation method of the invention comprises the following steps: To observe P.aspergillum integrity, and color reproduction of individual bands measured Pheretima individual weight and body length, ring diameter and reproductive activity; if P.aspergillum individual integrity, back brown to purple grey color, yellow brown abdomen, no obvious reproductive ring, and meet the Pheretima individual weight than 4.0g at the same time, the body length is larger than 9.0CM, the reproductive ring diameter over 4.5mm and energy is more than 35.0s, it is determined that the individual is qualified Pheretima earthworm Pheretima seedlings. The evaluation method of this invention can be used for the harvesting of vermis and the release of the vermis, which can promote the development of the aquaculture. The method of evaluation of the invention is scientific and easy to operate.

【技术实现步骤摘要】
一种广地龙蚓苗个体及种群质量评价方法
：本专利技术属于蚯蚓养殖和中药材资源开发
，具体涉及一种广地龙蚓苗个体及种群质量评价方法。
技术介绍
：地龙，又称蚯蚓，是常见陆生环节动物，地龙性寒、味咸，主要功效有清热定惊，通络，平喘，利尿。研究表明地龙具有降血压平喘、镇静解热、抗凝血、抗血栓、抗癌、增强免疫功能等作用。目前我国市场上地龙药材主要为“广地龙”、“沪地龙”，其中广地龙是广东道地药材，在药材行业内被公认为品质最优。随着人类医药健康需求的不断增长和变化，对中药资源的需求量越来越大。由于我国大部分的中药材来自野生，随着野生资源减少，广地龙的人工养殖将成为主要来源。因此，筛选出符合规格的广地龙蚓苗是人工养殖广地龙的首要环节，有利于广地龙的生长和繁殖，同时也为广地龙药材的生产提供质量保证。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于克服现有技术中的缺陷，提供一种广地龙蚓苗个体及种群质量评价方法。本专利技术的第一个目的是提供一种广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：观察广地龙个体完整度、体色以及生殖环带，测量广地龙个体重量、体长、生殖环带直径和活力；若广地龙个体完整，背部棕褐色至紫灰色、腹部浅黄棕色，生殖环带未明显，且同时满足广地龙个体重量≥4.0g，体长≥9.0cm，生殖环带直径≥4.5mm和活力≥35.0s，则判断该广地龙个体为合格广地龙蚓苗。所述的广地龙个体体长是指生殖环带至尾部的长度。优选，所述的测量广地龙个体体长具体为将广地龙置于体积分数为50％酒精中，待其麻醉至身体处于松弛状态，测量生殖环带至尾部的长度。优选，所述的测量广地龙个体生殖环带直径具体为在广地龙安静状态下测量生殖环带直径。优选，所述的测量广地龙个体活力具体为将广地龙置于体积分数为50％酒精中，记录其麻醉至身体处于松弛状态所需时间。所述的广地龙个体完整优选为广地龙具有完整的器官且个体完整无损伤。在进行广地龙种苗质量评价之前先对待测广地龙进行DNA分子鉴定。所述的广地龙DNA分子鉴定：提取广地龙基因组DNA，根据基因库中广地龙的线粒体COⅠ和16SrRNA基因序列设计引物进行PCR扩增，PCR产物电泳检测，分析条带扩增结果，基因序列测序，测序结果拼接后经BLAST(BasicLocalAlignmentSearch)相似性检索，寻找相匹配的序列，分析检测样品与基因库中广地龙的线粒体COⅠ和16SrRNA基因序列相似度，确认样品是否为广地龙品种。本专利技术的第二个目的是提供一种广地龙蚓苗种群质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：随机采集若干个广地龙个体，测量广地龙个体重量、体长、生殖带环直径和活力，计算出采集的广地龙个体重量的平均值X1和标准差SV1，广地龙个体体长的平均值X2和标准差SV2，广地龙个体生殖带环直径的平均值X3和标准差SV3，广地龙个体活力的平均值X4和标准差SV4，根据广地龙个体重量、体长、生殖带环直径和活力的平均值和标准差，分别计算出广地龙个体重量、体长、生殖带环直径和活力的离散系数CV1、CV2、CV3和CV4；若同时满足X1≥5.5g，CV1≤0.28，X2≥11.0cm，CV2≤0.2，X3≥5.0mm，CV3≤0.16，X4≥42s和CV4≤0.15，则判断该广地龙蚓苗种群为合格广地龙蚓苗种群。所述的广地龙个体体长是指生殖环带至尾部的长度。优选，所述的测量广地龙个体体长具体为将广地龙置于体积分数为50％酒精中，待其麻醉至身体处于松弛状态，测量其生殖环带至尾部的长度。优选，所述的测量广地龙个体生殖环带直径具体为在广地龙安静状态下测量生殖环带直径。优选，所述的测量广地龙个体活力具体为将广地龙置于体积分数为50％酒精中，记录其麻醉至身体处于松弛状态所需时间。本专利技术的有益效果：本专利技术的评价方法科学、操作简便、对实验仪器要求较低。本专利技术的评价方法可以用于广地龙的蚓苗采收、投放和广地龙的人工养殖，促进广地龙生长和繁殖。附图说明：图1是广地龙(参环毛蚓)的COI序列。具体实施方式：以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：广地龙DNA分子鉴定从广西陆川县广地龙(参环毛蚓)养殖基地随机采集样品，提取地龙基因组DNA，根据基因库中广地龙的线粒体COⅠ基因序列设计引物进行PCR扩增，PCR产物进行基因序列测序，获得的基因序列结果拼接后(如图1所示，如SEQIDNO.1所示)，经BLAST(BasicLocalAlignmentSearch)相似性检索，寻找相匹配的序列，分析检测样品与基因库中广地龙的线粒体COⅠ基因序列相似度，结合形态学分析，确定采集样品为广地龙。实施例2：从陆川县广地龙(参环毛蚓)养殖基地随机采集50个样品，编号为1～50。采集的所有的广地龙均具有完整的器官且个体完整无损伤，背部棕褐色至紫灰色、腹部浅黄棕色，生殖环带未明显。经过形态学鉴定和DNA分子鉴定均为广地龙品种。1、广地龙重量测量使用电子天秤称量50个样品的重量，重复3次，取平均值，统计结果如下表1和表2：表1：广地龙蚓苗重量测定结果(单位：g)编号重量编号重量编号重量编号重量编号重量14.2118.2215.8316.6413.523.1126.7227.5328.0427.132.2136.5234.3335.0436.444.6143.5249.9346.0444.754.4154.6256.3355.4455.867.7166.0264.3366.3463.676.8176.3276.3375.3475.486.7185.1286.8385.2484.893.4196.9292.6397.3495.8105.8205.9307.4405.9506.4表2：广地龙蚓苗重量范围数量注：“[”代表大于等于，“)”代表小于2、广地龙生殖环带直径测量使用游标卡尺测量广地龙安静状态下生殖环带直径，重复3次，取平均数，统计结果如下表3和表4：表3：广地龙蚓苗生殖环带直径测定结果(活体—安静)(单位：mm)编号直径编号直径编号直径编号直径编号直径14.8116.2215.5315.7414.324.2126.6225.8326.3426.735.2135.9234.4335.2436.345.8144.9245.9345.5445.855.7156.2254.1355.3455.267.4165.6265.6364.7465.175.3175.7275.5375.1475.387.2185.1286.1384.4485.093.1195.2294.7396.1494.7105.3204.6306.8405.1505.4表4：广地龙蚓苗生殖环带直径范围频数注：“[”代表大于等于，“)”代表小于3、广地龙体长测量将广地龙置于体积分数为50％酒精中，待其麻醉至身体处于松弛状态，用直尺测量其生殖环带至尾部长度，重复3次，取平均数，统计结果如下表5和表6：表5：50％酒精处理广地龙蚓苗体长测定结果(生殖环带至尾部)(单位：cm)编号长度编号长度编号长度编号长度编号长度113.21112.7219.53112.2418.5210.21211.22213.23213.54211.537.51312.52310.83310.14311.848.51本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：观察广地龙个体完整度、体色以及生殖环带，测量广地龙个体重量、体长、生殖环带直径和活力；若广地龙个体完整，背部棕褐色至紫灰色、腹部浅黄棕色，生殖环带未明显，且同时满足广地龙个体重量≥4.0g，体长≥9.0cm，生殖环带直径≥4.5mm和活力≥35.0s，则判断该广地龙个体为合格广地龙蚓苗。

【技术特征摘要】
1.一种广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：观察广地龙个体完整度、体色以及生殖环带，测量广地龙个体重量、体长、生殖环带直径和活力；若广地龙个体完整，背部棕褐色至紫灰色、腹部浅黄棕色，生殖环带未明显，且同时满足广地龙个体重量≥4.0g，体长≥9.0cm，生殖环带直径≥4.5mm和活力≥35.0s，则判断该广地龙个体为合格广地龙蚓苗。2.根据权利要求1所述的广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，所述的广地龙个体体长是指生殖环带至尾部的长度。3.根据权利要求1所述的广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，所述的测量广地龙个体体长具体为将广地龙置于体积分数为50％酒精中，待其麻醉至身体处于松弛状态，测量生殖环带至尾部的长度。4.根据权利要求1所述的广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，所述的测量广地龙个体生殖环带直径具体为在广地龙安静状态下测量生殖环带直径。5.根据权利要求1所述的广地龙蚓苗个体质量评价方法，其特征在于，所述的测量广地龙个体活力具体为将广地龙置于体积分数为50％酒精中，记录其麻醉至身体处于松弛状态所需时间。6.一种广地龙蚓苗种群质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：随机采集若干个广地龙个体，测量广地龙个体重量、体长、生殖带环直径和活力，计算出采集的广地龙个体重量...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄庆，毛润乾，李志武，
申请(专利权)人：广东省生物资源应用研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44