一种检测山羊繁殖力的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测山羊繁殖力的方法。是检测待测山羊基因组中的ＧｎＲＨＲ基因的第７５７位核苷酸为Ｇ还是突变为Ａ，确定山羊的基因型，然后通过基因型确定山羊繁殖力；如果山羊基因组中的ＧｎＲＨＲ基因的第７５７位核苷酸为Ｇ时，其纯合体的基因型为ＡＡ；山羊基因组中的ＧｎＲＨＲ基因的第７５７位核苷酸突变为Ａ时，其纯合体的基因型为ＢＢ；它们的杂合体基因型为ＡＢ；ＢＢ基因型山羊的繁殖力高于ＡＢ基因型山羊和ＡＡ基因型山羊。本发明专利技术的方法利用遗传标记多态性确定山羊的繁殖力，可以迅速、简便的检测济宁青山羊的繁殖力，为山羊的育种提供了一个准确简便的检测其繁殖力的方法。

【技术实现步骤摘要】


技术介绍
促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone, GnRH)是一种十肽，是 下丘脑一垂体一性腺轴的关键神经内分泌调节因子，GnRH作用的发挥依赖于促性 腺激素释放激素受体(gonadotropin releasing hormone receptor, GnRHR)的存在。 GnRHR是位于促性腺细胞表面的一种高亲和G蛋白耦联受体，GnRH和GnRHR在 促性腺细胞表面结合，促进垂体前叶合成和释放促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)和促黄体激素(luteinizing hormone, LH)。哺乳动物的排卵依赖于 LH高峰，GnRH和GnRHR的分泌增加都会引起LH高峰。因此，GnRH基因和GnRHR 基因在哺乳动物的繁殖调控中起着重要作用。Yang-Feng等(1986)使用荧光原位杂交把人的GnRH-I基因定位到染色体 8p21-pl 1.2 (Yang-Feng T L, Seeburg P H, Francke U. Human luteinizing hormone-releasing hormone gene (LHRH) is located on short arm of chromosome 8 (region 8pll.2-p21). Somat Cell Mol Genet, 1986, 12(1):95-100) ， White等(1998)把 人的GnRH- II基因定位到染色体20pl3( White R B, Eisen J A， Kasten T L, Fernald R D. Second gene for gonadotropin-releasing hormone in humans. Proc Natl Acad Sci USA, 1998,95(l):305-309) 。 GnRH首先从哺乳动物中分离出来并被测序，现在已经从不 同的动物中分离到16种不同形式的GnRH(SomozaGM, Miranda LA， Strobl-Mazzula P, Guligur L G. Gonadotropin-releasing hormone (GnRH): from fish to mammalian brains. Cell Mol Neurobiol, 2002, 22(5-6):589-609)，所有这些变体不外乎是鸡的 GnRH (cGnRH)和哺乳动物的GnRH (mGnRH)，从鸡分离出来的cGnRH-II是一 种普遍存在的GnRH肽，从鱼到人都存在。Fernald等(1999)根据DNA序列和脑 分区的系统发育研究，以不同的方式分类GnRH亚型(Fernald RD, White RB. Gonadotropin-hormone genes: phylogeny, structure, and ftinctions. Front Neuroendocrinol, 1999,20(3):224-240) : mGnRH被定义为GnRH- I ， cGnRH-II被定义为GnRH-II 。 以前认为灵长类脑中只含有mGnRH即现在被定义的GnRH-1 ，现在从成年的短尾 猴和猕猴脑提取物中发现了两种形式的GnRH，类似于mGnRH和cGnRH。通过克 隆人的GnRH基因，发现该基因包含4个外显子和3个内含子，存在很大的前体基因。人GnRH前体蛋白包括N端信号肽和C端Gly-Lys-Arg序列延伸(SherwoodN M, Lovejoy D A， Coe I R. Origin of mammalian gonadotropin-releasing hormones. EndocrRev， 1993， 14(2):241-254)。Montgomery等(1995)通过研究把绵羊的GnRHR基因定位到6号染色体上 (Montgomery G W, Penty J M, Lord E A, Brooks J, Mcneilly A S. The gonadotrophin-releasing hormone receptor maps to sheep chromosome 6 outside of the region of the FecB locus.Mammalian Genome, 1995, 6(6):436-438) 。 Campion等 (1996)获得了绵羊GnRHR基因完全的编码序列，绵羊GnRHR基因由3个外显子和 2个内含子组成(Campion C E, Turzillo A M, Clay C M. The gene encoding the ovine gonadotropin-releasing hormone (GnRH) receptor: cloning and initial characterization. Gene, 1996, 170(2):277-280) 。 Rohrer等(1999)将猪的GnRHR基因定位到染色 体8ql.l-ql.2 (Rohrer G A. Mapping four genes from human chromosome 4 to porcine chromosome 8 further develonps the comparative map for an economically important chromosome of the swine genome. Anim Genet, 1999, 30(l):60-62) 。 Kakar等(1995) 通过Southern杂交分析把人的GnRHR基因定位到染色体4ql3，开放阅读框位于3 个确定的外显子之间，全长18.9kb (Kakar S S, Neill J D. The human gonadotropin-releasing hormone receptor gene (GNRHR) maps to chromosome band 4ql3. Cytogenet Cell Genet, 1995, 70(3-4):211-214)。目前发现哺乳动物存在两种GnRHR,即GnRHR- I和GnRHR- II 。 GnRHR- I 在所有哺乳动物中存在，GnRHR-II首先在两栖动物中发现。最近研究证明绒猴、猕 猴、绿猴等灵长类动物同时存在两种受体基因(Neill J D, Duck L W, Sellers J C. A gonadotropin-releasing hormone receptor specific for GnRH- II in primates. Biochem Biophys Res Commum, 2001 ，282(4): 1012-1018)。小鼠GnRHR- I基因的 cDNA编码327个氨基酸，人和绵羊的GnRHR- I基因的cDNA编码328个氨基酸， 即在第二个细胞外环多了一个赖氨酸(Lys)残基(Kaiser UB, Conn PM， Chin WW本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测山羊繁殖力的方法，是检测待测山羊基因组中的ＧｎＲＨＲ基因的第７５７位核苷酸为Ｇ还是突变为Ａ，确定山羊的基因型，然后通过基因型确定山羊繁殖力；所述ＧｎＲＨＲ基因的核苷酸序列为自ＧＥＮＢＡＮＫ　ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ　ＮＵＭＢＥＲ为Ｌ４２９３７的第１至１２３６位核苷酸；　所述确定山羊的基因型的方法为：如果山羊基因组中的ＧｎＲＨＲ基因的第７５７位核苷酸为Ｇ时，其纯合体的基因型为ＡＡ；山羊基因组中的ＧｎＲＨＲ基因的第７５７位核苷酸突变为Ａ时，其纯合体的基因型为ＢＢ；它们的杂合体基因型为ＡＢ；　通过基因型确定山羊繁殖力的方法为：所述ＢＢ基因型山羊的繁殖力高于ＡＢ基因型山羊和ＡＡ基因型山羊。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：储明星，狄冉，方丽，马月辉，李奎，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]