从发酵液收获晶体制造技术

一种从发酵液中生产结晶和／或无定形代谢物悬液的方法，包括用一或多种凝固剂和／或一或多种絮凝剂处理所述发酵液；并从该凝固和／或絮凝的发酵液中用分离装置分离所述发酵液的生物量，从而得到结晶和／或无定形代谢物悬液。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种简单有效的从发酵液获得结晶和/或无定形代谢物悬液的方法。
技术实现思路
已经惊喜发现一种简单有效的从发酵液生产结晶和/或无定形代谢物悬液的方法，可用下步骤生产(a)用一或多种凝固剂(coagulant)和/或一或多种絮凝剂处理所述发酵液，及(b)从该凝固和/或絮凝的发酵液中用分离装置分离所述发酵液的生物量(biomass)，从而得到结晶和/或无定形代谢物悬液。专利技术详述本专利技术提供了一种简单有效的从发酵液生产结晶和/或无定形代谢物悬液的方法。本专利技术方法可被用到未处理过的发酵液或经过首次处理，例如pH调节，温度调节，和/或水稀释的发酵液。目的代谢物本专利技术目的代谢物可以是抗生素如青霉素或头孢菌素，或化学商品如柠檬酸。所述代谢物也可以是蛋白，例如治疗性蛋白如胰岛素或酶。所述酶可以是水解酶，转移酶，裂解酶，异构酶，或连接酶。在优选实施方案中，所述方法可应用到蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶，纤维素酶，和氧化还原酶。蛋白酶合适的蛋白酶包括动物、植物或微生物来源的蛋白酶，优选微生物来源的蛋白酶，还包括了经过化学修饰或蛋白工程化的突变体。所述蛋白酶可以是丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶，优选碱性微生物蛋白酶或胰蛋白酶类蛋白酶。碱性蛋白酶的实例可以是枯草溶菌素，特别是那些来源于芽孢杆菌属(Bacillus)的蛋白酶，例如枯草溶菌素(subtilisin)Novo，枯草溶菌素Carlsberg，枯草溶菌素309，枯草溶菌素147和枯草溶菌素168(WO 89/06279)。胰蛋白酶类蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢属(Fusarium)蛋白酶，见WO 89/06270和WO 94/25583所述。有用的蛋白酶的实例是见WO 91/00345，WO 92/19729，WO 98/20115，WO 98/20116和WO 98/34946所述的变异体，特别是在位置27，36，57，76，87，97，101，104，120，123，167，170，194，195，206，218，222，224，235和274处发生一个或多个位点取代的变异体。脂酶合适的脂酶包括细菌或真菌来源的脂酶，也包括了经过化学修饰或蛋白工程化的脂酶突变体。可以采用的脂酶例如来源于腐质霉属(与嗜热酶属(Thermomyces)同义)的脂酶，例如见EP 258 068和EP 305 216所述的来源于H.Lanuginosa(T.Lanuginosus)的脂酶或见WO 96/13580所述的来源于H.insolens的脂酶；假单胞菌属脂酶，例如来源于P.alcaligenes或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)(EP 218 272)，葱头假单胞菌(P.cepacia)(EP 331376)，司徒茨氏假单胞菌(P.stutzeri)(GB 1,372,034)，荧光假单胞菌(P.fluorescens)，假单胞菌菌株(Pseudomonas sp.)株系SD 705(WO 95/06720和WO 96/27002)，P.wisconsinensis(WO 96/12012)；芽孢杆菌属脂酶，例如来源于枯草芽孢杆菌(B.subtilis)(Dartois等，1993，Biochemica et BiophysicaActa，1131，253-360)，嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)(JP 64/744992)或短小芽孢杆菌(B.pumilus)(WO 91/16422)。其它实例还可以采用见WO 92/05249，WO94/01541，EP 407 225，EP 260105，WO 95/35381，WO 96/00292，WO 95/30744，WO 94/25578，WO95/14783，WO 95/22615，WO 97/04079和WO 97/07202所述中的脂酶变异体。淀粉酶合适的淀粉酶(α和/或β-淀粉酶)包括细菌或真菌来源的淀粉酶，也包括了经过化学修饰或蛋白工程化的淀粉酶突变体。淀粉酶包括了，例如见GB1,296,839详述的来源于芽孢杆菌属，例如来源于地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)特定株系的α-淀粉酶。可以采用的淀粉酶实例有WO 94/02597，WO 94/18314，WO 96/23873和WO 97/43424所述的变异体，特别是在位置15，23，105，106，124，128，133，154，156，181，188，190，197，202，208，209，243，264，304，305，391，408和444处发生一个或多个位点取代的变异体。纤维素酶合适的纤维素酶包括细菌或真菌来源的纤维素酶，也包括了经过化学修饰或蛋白工程化的突变体。合适的纤维素酶包括了来源于芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰孢属、草根霉属(Thielavia)和支顶孢属(Acremonium)的纤维素酶，例如公开于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US5,776,757和WO 89/09259的来源于Humicola insolens、嗜热毁丝霉菌(Myceliophthora thermophila)和尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)的真菌纤维素酶。特别合适的纤维素酶是带有护色效果(colour care benefits)的碱性或中性纤维素酶，所述纤维素酶的实例见EP 0 495 257，EP 0 531 372，WO 96/11262，WO 96/29397和WO 98/08940所述的纤维素酶。其它实例为WO 94/07998，EP 0 531 315，US 5,457,046，US 5,686,593，US 5,763,254，WO 95/24471，WO 98/12307和WO 99/01544所述的纤维素酶变异体。氧化还原酶根据本专利技术处理的氧化还原酶包括过氧化物酶(EC 1.11.1.7)和氧化酶，如漆酶和过氧化氢酶(EC 1.11.1.6)。过氧化物酶本专利技术方法所用的过氧化物酶优选由真菌或细菌等微生物产生。特别优选鬼伞属过氧化物酶，特别是长根鬼伞(C.macrorhizus)或灰盖鬼伞(C.cinereus)过氧化物酶，或其变体。漆酶及漆酶相关酶 在本专利技术范畴，漆酶及漆酶相关酶是指酶分类(EC 1.10.3.2)包含的任何漆酶，酶分类(EC 1.10.3.1)包含的任一chatechol氧化酶，酶分类(EC 1.3.3.5)包含的任一胆红素氧化酶或酶分类(EC 1.14.18.1)包含的任一单酚单加氧酶。微生物漆酶可以来源于细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)，合适的实例有来源于如下菌株的漆酶曲霉属，脉孢菌属(Neurosrora)，例如粗糙脉孢霉(N.crassa)，Podospora，葡萄孢属(Botrytis)，金钱菌属(Collybia)，层孔菌属(Fomes)，香菇属(Lentinus)，灰侧耳菌属(Pleurotus)，栓菌属，例如T.villosa和T.verdicolor，丝核菌属(Rhizoctonia)，例如茄属丝核菌(R.solani)，鬼伞属，例如褶纹鬼伞(C.plicatil本文档来自技高网...

【技术保护点】
从发酵液生产结晶和／或无定形代谢物悬液的方法，其包括（ａ）用一或多种凝固剂和／或一或多种絮凝剂处理所述发酵液，及（ｂ）从该凝固和／或絮凝的发酵液中用分离装置分离所述发酵液的生物量，从而得到结晶和／或无定形代谢物悬液。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：本尼尼尔森，安德斯兰克马德森，马丁T乔根森，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：DK[丹麦]