制备头孢拉定的方法技术

本发明专利技术描述了制备头孢拉定的方法，所述方法包括：在反应混合物中，存在酶的情况下，使７－氨基脱乙酰氧基头孢烷酸（７－ＡＤＣＡ）与活化形式的Ｄ－二氢苯基甘氨酸（ＤＨａ）反应，形成头孢拉定，使得７－ＡＤＣＡ到头孢拉定的转化率为至少７０％，其中，反应混合物中Ｄ－二氢苯基甘氨酸（ＤＨ）的浓度小于２ｗｔ．％，其中，７－ＡＤＣＡ到头孢拉定的转化率等于（ｎ↓［ＣＥＦ］／ｎ↓［７－ＡＤＣＡ］）×１００％，其中，ｎ↓［ＣＥＦ］＝形成的头孢拉定的数量（以摩尔计），ｎ↓［７－ＡＤＣＡ］＝加入到反应混合物中的７－ＡＤＣＡ的总量（以摩尔计）。本发明专利技术还描述了制备头孢拉定水合物的方法，其特征在于，所述方法包括：在反应混合物中，存在酶的情况下，使７－氨基脱乙酰氧基头孢烷酸（７－ＡＤＣＡ）与ＤＨａ反应，形成头孢拉定；制备包含至少部分头孢拉定的水溶液；以及使头孢拉定从所述水溶液中结晶出来。本发明专利技术还描述了可通过根据本发明专利技术的方法获得的头孢拉定水合物。本发明专利技术还描述了４５０ｎｍ处吸光度小于０．０５０的头孢拉定水合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及，所述方法包括在存在酶的情况下，使7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)与活化形式的D-二氢苯基甘氨酸(DHa)反应；本专利技术还涉及可通过根据本专利技术的方法获得的头孢拉定。WO-A-97/04086公开了用酶来生产β-内酰胺抗生素的方法，其通过用母体β-内酰胺与活化形式的侧链反应来实现，其中包括用7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)与活化形式的D-二氢苯基甘氨酸(DHa)反应来制备头孢拉定。该公开文本除描述了合成反应，即活性侧链与母体β-内酰胺的反应之外，还描述了通过目标产物和活性侧链的水解会形成侧链酸。在头孢拉定的酶生产的情况下形成的侧链酸是D-二氢苯基甘氨酸(DH)。WO 97/04086此外还公开了在存在野生型E.coli酰基转移酶的情况下对头孢拉定进行的酶合成，其示出，当青霉素酰基转移酶被固定到特定的载体上时，会获得增加的合成/水解(S/H)比例。在WO 97/04086的方法中，已获得了高达68％的从7-ADCA和二氢苯基甘氨酸甲酯到头孢拉定的转化率。人们发现，当寻找能使转化率增加的头孢拉定的酶合成方法时，会遇到显著的可加工性的问题。具体而言，人们发现，当增大转化率时，反应混合物可能会变得高度粘滞，并且所述增加的粘度甚至会使得更高的转化率无法以实用的方式实现。本专利技术的目的是使得7-ADCA和DHa能以高转化率转化为头孢拉定。该目的是通过本专利技术来实现的，本专利技术提供了，所述方法包括在反应混合物中，存在酶的情况下，使7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)与活化形式的D-二氢苯基甘氨酸(DHa)反应，形成头孢拉定，使得7-ADCA到头孢拉定的转化率为至少70％，其中，反应混合物中D-二氢苯基甘氨酸(DH)的浓度小于2wt.％。我们惊奇地发现，粘滞的混合物是反应期间形成的水解产物(即，DH)结晶的结果。通过根据本专利技术将DH保持在低浓度，就可以使得DH的结晶被最小化或被避免，并可以获得增加的转化率，而不会遇到可加工性方面的问题。根据本专利技术的方法的进一步的好处在于从反应混合物中回收头孢拉定可以以简单的方法来进行，从而获得稳定、优质的产物。本文中使用的7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸也被称为7-ADCA。本文中使用的活化形式的D-二氢苯基甘氨酸也被称为DHa。本文中使用的D-二氢苯基甘氨酸也被称为DH。根据本专利技术的方法包括在反应混合物中，存在酶的情况下，使7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)与活化形式的D-二氢苯基甘氨酸(DHa)反应，形成头孢拉定，使得7-ADCA到头孢拉定的转化率为至少70％，优选为至少80％，更优选为至少90％。本文中使用的7-ADCA到头孢拉定的转化率被定义为(nCEF/n7-ADCA)×100％，其中，nCEF＝所形成的头孢拉定的总量(以摩尔计)，以及，n7-ADCA＝加入到反应混合物中的7-ADCA的总量(以摩尔计)。所形成的头孢拉定可以在反应混合物中以例如溶解形式和/或固体形式的任何形式存在，例如为头孢拉定水合物。可用任何合适的方式将7-ADCA加入到反应混合物中。一次性将全部数量的7-ADCA加入到反应混合物中是可行的。将至少部分7-ADCA在反应过程期间加入到反应混合物中也是可行的。根据本专利技术，反应混合物中DH的浓度小于2wt.％。优选地，反应混合物中DH的浓度小于1.5wt.％，更优选小于1.0wt.％，更优选小于0.8wt.％。反应混合物中DH的降低的浓度可以有如下优点由于DH的结晶导致的粘滞混合物的形成被进一步减少或被完全避免。本文中使用的以wt.％表示的DH的浓度是相对反应混合物的总重给出的，即包括可能存在于反应混合物中的液相重量和固体组分的重量在内的总重，所述固体组分例如是被固定的酶和/或固体反应物或反应产物。反应混合物可以是下述任何合适的混合物，在所述混合物中，可在存在酶的情况下，进行7-ADCA与活化形式的DH的反应。优选地，反应混合物是水性反应混合物。水性反应混合物还可以含有有机溶剂或有机溶剂的混合物，优选地，所述有机溶剂或有机溶剂的混合物的含量小于30vol.％，更优选地，小于20vol.％，更优选地，小于10vol.％，更优选地，小于5vol.％(相对液体总体积而言)。优选地，有机溶剂是具有1-7个碳原子的醇，例如一元醇，特别是甲醇或乙醇；二醇，特别是乙二醇；或三醇，特别是甘油。优选地，水性反应混合物含有至少70vol.％的水，更优选地，至少80vol.％，更优选至少90vol.％，最优选至少95vol.％的水(相对液体总体积而言)。在根据本专利技术的方法中，DHa可以是酰胺，例如D-二氢苯基甘氨酸(DH)的一级、二级或三级酰胺，或D-二氢苯基甘氨酸(DH)的酯。优选地，DHa是DH的酯，例如DH的低级烷基(1-4C)酯。优选的是D-二氢苯基甘氨酸甲酯(DHMe)，最优选的是以盐的形式存在的DHMe，例如，DHMe的蚁酸盐或HCl盐。其它DH酯的蚁酸盐或HCl盐也是可以使用的。可以用任何合适的方法将反应混合物中DH的浓度在整个反应期间保持为小于2wt.％，优选小于1.5wt.％，更优选小于1.0wt.％，更优选小于0.8wt.％。优选的条件见下文所述。DHa对7-ADCA的摩尔比(即用加入到反应混合物中的DHa的总量去除以加入到反应混合物中的7-ADCA的总量(两者均以摩尔计))可在很宽的范围内变动。优选地，该摩尔比小于2.5，优选在0.5至2.0之间，更优选在0.7至1.8之间。施加于反应混合物中的7-ADCA和活化形式的DH(DHa)的浓度可在很宽的范围内变动。加入到反应混合物中的7-ADCA和加入到反应混合物中的DHa的摩尔总量可在每升反应混合物10至2000毫摩尔之间，优选在每升反应混合物50至1500毫摩尔之间。在本专利技术的一种优选的实施方式中，使得7-ADCA与DHa反应得到至少70％的DHa到头孢拉定的转化率，优选为至少80％，更优选为至少90％，其中DHa到头孢拉定的转化率＝(nCEF/nDHa)×100％，其中，nCEF＝所形成的头孢拉定的总量(以摩尔计)，以及，nDHa＝加入到反应混合物中的DHa的总量(以摩尔计)。可用很多方式来加入反应混合物中的DHa。所有的DHa可在最初，即在反应开始时例如一批加入。也可以在反应过程期间向反应混合物中加入至少部分的DHa。例如，可以通过控制反应混合物的pH和/或温度，将反应混合物中DH的浓度在整个反应期间保持为小于2wt.％，优选小于1.5wt.％，更优选小于1wt.％，更优选小于0.8wt.％。应用的pH和温度可在很宽的范围内变动。用以形成头孢拉定的反应例如可在-5至35℃之间的温度下进行，优选在0至30℃之间的温度下进行。更优选地，该反应在5至25℃之间的温度下进行。用于形成头孢拉定的反应例如可在6至9之间的pH下进行。优选地，该反应在6.3至8.5之间的pH下进行。可用多种方法将反应混合物的pH调节为想要的pH值，例如通过加入酸例如无机酸，特别是硫酸、盐酸或硝酸来进行化学调节。还可以通过加入例如氢氧化钠或氨水的碱来将pH调节为希望的pH值。通过在经过稀释的反应物7-ADCA和DHa浓度下进行反应，或使用具有经过改善的性质(例如改善的S/H比)的酶，可将反本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备头孢拉定的方法，所述方法包括：在反应混合物中，存在酶的情况下，使７－氨基脱乙酰氧基头孢烷酸（７－ＡＤＣＡ）与活化形式的Ｄ－二氢苯基甘氨酸（ＤＨａ）反应，形成头孢拉定，使得７－ＡＤＣＡ到头孢拉定的转化率为至少７０％，其中，所述反应混合物中Ｄ－二氢苯基甘氨酸（ＤＨ）的浓度小于２ｗｔ．％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：卡洛斯恩利奎伦哈特，哈罗德莫洛穆迪，西奥多瑞斯约翰内斯格德弗里德玛丽亚，丹尼斯海姆斯柯克，安佳格拉里达马格勒瑟霍根博姆，
申请(专利权)人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]