一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂及其制备方法和应用，所述制剂为转铁蛋白修饰的聚乳酸‑羟基乙酸/羧甲基壳聚糖包封竹红菌素的制剂，制剂中有效成分竹红菌素的最终质量体积比为0.2‑0.6mg/mL、转铁蛋白的最终质量体积比为0.5‑2mg/mL，溶剂为超纯水。本发明专利技术的主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂具有主动靶向过量表达转铁蛋白受体肿瘤细胞的功能，其具有水分散效果好，粒径均一，包封率高，稳定性好，材料的安全性能高等优点。同时制备工艺简单方便，制备得到的纳米制剂是一种主动靶向递送竹红菌素类光敏剂到多种肿瘤细胞的药物制剂。

A kind of nanoscale nanoscale preparation, preparation method and application of active target to specific tumor cells

The invention discloses an active target cells to specific tumor hypocrellin nano preparation and preparation method and application thereof, the formulation of transferrin modified polylactic acid glycolic acid / carboxymethyl chitosan preparation package sealing hypocrellin, preparation of active ingredient in hypocrella the quality of the final volume than the final quality volume is 0.2 0.6mg/mL, transferrin ratio is 0.5 2mg/mL, solvent for ultra pure water. The invention of the active targeting to specific tumor cells Hypocrelline nanoparticles possess active targeting excessive expression of transferrin receptor and tumor cell function, the water has good dispersing effect, uniform particle size, high encapsulation efficiency, good stability, high safety performance materials. At the same time, the preparation process is simple and convenient, and the prepared nano preparation is an active targeting drug delivery agent for the transformation of various kinds of tumor cells.

【技术实现步骤摘要】
一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于纳米医药
，具体涉及一种能够靶向过量表达转铁蛋白受体肿瘤细胞的转铁蛋白修饰的竹红菌素纳米制剂粒及其制备方法和应用。
技术介绍
光动力疗法(photodynamictherapy，PDT)是一种新型的医疗技术，主要用于肿瘤和其他疾病的治疗。光动力疗法被认为是临床上继手术、放疗、化疗后的第4种癌症治疗方法。自Dousherty等在20世纪70年代将光动力疗法推向临床研究以来，光动力疗法取得了令人瞩目的成绩。目前，国内外研究光动力疗法仍集中于它的抗肿瘤方面的应用。此外，光动力疗法在治疗类风湿性关节炎，黄斑变性病，抗菌，抗病毒等方面也有了更深入的研究。光动力疗法过程中不可缺少的三个组成部分分别是光，光敏剂和氧。光动力疗法的过程主要是光敏剂吸收光子的能量，从稳态跃迁到激发态，激发态的光敏剂再将能量传递给氧，生成活性氧(Radicaloxygenspecies，ROS)。机体内是有一定ROS水平，但是过高的活性氧水平则会损伤脂质，蛋白质和核酸等生物大分子，从而导致细胞死亡。在光动力过程中，光敏剂是整个过程的核心。整个PDT的发展都是随着光敏剂的发现，发展和应用而推进并完善的。与传统的三种癌症治疗手段相比较，PDT具有以下优点：(1)暗毒性低，光活性高。可以通过选择性的进行局部照射的方式，控制光敏剂的作用范围，从而降低正常组织的光损伤。(2)副作用小。相比于传统的化疗和放疗，PDT的毒副作用较小，对组织的损伤小。(3)药物在体内代谢快。药物在体内快速代谢，将不会在体内进行循环，造成不必要的治疗负担。虽然PDT的研究已经取得可观的进展，但是PDT也存在一些问题。就临床批准的光敏剂而言，仍然存在许多的缺陷，特别是长期的皮肤毒性，使接受治疗后的病人不能长时间在日光下暴露。而且临床使用的光敏剂并没有表现出一定的细胞选择能力，所以研究更为合适的光敏剂靶向成为了新的目标。竹红菌素(Hypocrellin)是我国民间药物竹黄的主要活性成分，是一种天然的苝醌类光敏色素，包括竹红菌甲素、竹红菌乙素、竹红菌丙素、竹红菌丁素。竹红菌素拥有杰出的抗肿瘤活性主要是由于它们的光敏特性决定的。其具有以下优点：(1)杰出的量子氧产率，包括产生单线态氧，超氧阴离子及羟基自由基。细胞内本身具有一定的活性氧水平，但是当大量的活性氧产生时，细胞由于无法及时清除这些额外的过氧化物，从而死亡。(2)此外，竹红菌素拥有较快的体内代谢速度，这能够避免病人在接受治疗后长时间光照带来的皮肤毒性。(3)易于分离纯化。可以从竹黄分离菌株中分离纯化得到大量的竹红菌素。因此竹红菌素被认为是一种非常有应用前景的光疗药物，具有潜在的临床应用价值。竹红菌素作为具有应用前景的光敏剂仍然存在着一些缺陷，如竹红菌素属于脂溶性化合物，在水溶液中的溶解度是极低的，不能达到有效的药物浓度，而且本身在血液中容易发生自发的聚集，造成血栓。此外，竹红菌素在合适的激发光下即可被激发形成活发态，传递能量给周围的氧形成活性氧，引起细胞的死亡。这种性质是没有肿瘤特异性的。所以竹红菌素的选择性不足也是需要解决的问题。为了克服竹红菌素的水溶性问题，主要采用化学修饰的方法合成水溶性的竹红菌素衍生物及制备水溶性的竹红菌素纳米载体。化学修饰的方法获得了一些水溶性竹红菌素的衍生物，但是往往得到的化合物量子氧产率不理想，或者是竹红菌素衍生物在细胞中的应用效果还未得到证实。所以通过化学修饰的途径是否能够达到理想的光动力治疗效果仍需进一步的验证。此外，使用载体包封竹红菌甲素是一个非常有前景方法。关于应用材料包封竹红菌素的资料：专利申请号200810024636.4公开了一种水溶性竹红菌素二氧化硅纳米粒的制备方法，选择的包封材料为二氧化硅。专利申请号200710025279.9公开了一种水溶性竹红菌素二氧化钛纳米粒的制备方法，所采用的包封材料为二氧化钛，包封药物为竹红菌素，形成的纳米粒径为150nm。利用上述载体对竹红菌素进行包裹，虽然得到了水溶性良好的纳米药物，但仍然存在缺陷，如该类药物载体的材料属于无机材料，药物经注射进入机体后，由于缺乏良好的生物相容性，在体内不能很好地进行代谢，可能给机体带来代谢负担。专利申请号200610001677.2公开了一种竹红菌素微乳液及其制备方法，采用天然油脂和表面活性剂为包封材料，其粒径为20-100nm。专利申请号200710120727.3公开了一种竹红菌素脂质体制剂及其制备方法，采用磷脂和胆固醇作为包封材料。这类脂质体纳米粒适合于静脉注射，但是在保存稳定性上仍然存在着不足，长期稳定性较低。专利申请号03148147.7公开了一类竹红菌素水溶性纳米及其用途，采用的包封材料为天然生物蛋白，多糖类大分子及可生物降解的高分子聚合物，制备成水溶性的超微粒，粒径为20-200nm。专利申请号201410198946.3公开了一种水溶性竹红菌素PLGA纳米粒及其制备方法，采用的包封材料是PLGA，纳米粒径为20-200nm之间。这类纳米粒采用可生物降解的高分子聚合物对竹红菌素进行包封，具有良好的生物相容性，但是形成的纳米粒粒径均匀度分布指数还不够理想，包封率较低，为55％。聚乳酸-羟基乙酸及羧甲基壳聚糖均属于生物可降解的高分子化合物，应用两种化合物对一些药物进行包封的文献已有报道，如胡云霞等报道的(高分子通报，2004(5):62-68)中采用两种化合物对抗癌药物5-氟尿嘧啶进行包封。但是两种化合物共同对竹红菌素进行包封来解决水溶性和包封率的问题还未见报道。一些肿瘤细胞，如肺腺癌A549和乳腺癌MDA-MB-231等细胞株由于快速生长而需要大量的铁离子，而铁离子的摄取依赖于细胞膜转铁蛋白受体介导的胞吞途径进行内化，所以这些细胞表面均过量表达转铁蛋白受体。所以这个有效的细胞摄取途径被用于位点特异性的递送抗肿瘤药物。例如，2014年，中国的Han等人也利用转铁蛋白修饰的脂质体纳米粒共递送DNA和多柔比星，并在过表达转铁蛋白受体的A549细胞中得到验证(InternationalJournalofNanomedicine,2014:4107-4116)。2015年，新加坡的Muthu等人采用流式细胞术分析MDA-MB-231细胞表面相比于NIH-3T3细胞有过量表达的转铁蛋白受体，于是用转铁蛋白与维生素ETPGS聚合共递送多烯紫杉醇和超亮金纳米粒，实现靶向递送化疗药物多柔比星(Biomaterials,2015,39:234)。但是使用转铁蛋白靶向修饰聚乳酸-羟基乙酸/羧甲基壳聚糖纳米粒用于递送竹红菌素类光敏剂进行光动力治疗的资料未见公开报道。同时在该靶向纳米粒中用聚乳酸-羟基乙酸和羧甲基壳聚糖制备纳米粒包封竹红菌素以提高包封率的资料未见公开文件。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术存在的缺陷，本专利技术提供一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂，该制剂为转铁蛋白修饰的聚乳酸-羟基乙酸/羧甲基壳聚糖包封竹红菌素的制剂，能够主动靶向过量表达转铁蛋白受体的肿瘤细胞，具有靶向性高，水分散效果好，粒径均一，包封率高，稳定性好，材料的安全性能高等优点。本专利技术还提供该主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂的制备方法和应用。技本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂，其特征在于，所述制剂为转铁蛋白修饰的聚乳酸‑羟基乙酸/羧甲基壳聚糖包封竹红菌素的制剂，制剂中有效成分竹红菌素的最终质量体积比为0.2‑0.6mg/mL、转铁蛋白的最终质量体积比为0.5‑2mg/mL，溶剂为水。

【技术特征摘要】
1.一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂，其特征在于，所述制剂为转铁蛋白修饰的聚乳酸-羟基乙酸/羧甲基壳聚糖包封竹红菌素的制剂，制剂中有效成分竹红菌素的最终质量体积比为0.2-0.6mg/mL、转铁蛋白的最终质量体积比为0.5-2mg/mL，溶剂为水。2.根据权利要求1所述的主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂，其特征在于，所述竹红菌素选自竹红菌甲素、竹红菌乙素、竹红菌丙素和竹红菌丁素中任意一种。3.一种权利要求1所述的主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将含有羧甲基壳聚糖和聚乙烯醇的水相和含有聚乳酸-羟基乙酸和竹红菌素的有机相，通过水包油挥发法制备聚乳酸-羟基乙酸/羧甲基壳聚糖包封的竹红菌素纳米制剂；(2)将步骤(1)聚乳酸-羟基乙酸/羧甲基壳聚糖包封的竹红菌素纳米制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈双林，林羲，闫淑珍，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32